高产 β-丙氨酸基因工程菌的构建与优化

为构建高产β-丙氨酸基因工程菌,克隆了来源于枯草芽孢杆菌的L-天冬氨酸-α-脱羧酶(panD)基因,在E.coli BL21 (DE3)中异源表达,得到重组菌后,采用不同方法进行优化。通过选用不同表达载体、对目的基因序列进行密码子优化以及对菌株进行自动诱导的策略,逐步提高目的蛋白的表达量,进而提高β-丙氨酸产量。结果表明,经优化后,菌株30a-1的β-丙氨酸产量提高到140.82mmol/L,较优化前提高了2.5倍。     

Paraburkholderia caffeinitolerans CF3咖啡因降解特性及降解途径

通过单因素试验对实验室筛选鉴定的菌株Paraburkholderia caffeinitolerans CF3咖啡因降解特性进行研究。通过检测降解率和生物量,确定了菌株CF3降解咖啡因最优条件为咖啡因质量浓度1 g/L、初始pH 4.5、培养温度30℃、转速190 r/min,在此条件下,咖啡因降解率可达99.5%。利用HPLC分离鉴定咖啡因降解物,在胞外培养液中检测到可可碱、副黄嘌呤和7-甲基黄嘌呤,因此确定菌株CF3是通过N-脱甲基途径降解咖啡因。