HIV-1膜蛋白在甲醇型酵母中的表达和抗原性的研究

通过计算机辅助分析了中国广西B/C重组亚型HIV-1病毒株的Env蛋白(共851氨基酸残基)氨基酸的疏水性、潜在的抗原表位,与其它亚型的Env蛋白在氨基酸组成的保守性方面进行了比较,选择了env基因的469-511aa,538-674aa和700-734aa三段保守性及抗原性都较强的氨基酸序列构建成嵌合基因,将嵌合基因构建到毕赤酵母Pichia pastoris表达载体pPICZαB中,利用甲醇诱导表达,对表达的蛋白进行了Wester blot和SDS-PAGE分析,结果表明,三段基因能在毕赤酵母Pichia pastoris中表达,产物为40kD的特异性诱导糖蛋白,通过Ni-sepharose 4B金属Ni螯合层析柱分离纯化表达蛋白,酶联免疫检测结果表明,纯化的抗原有很强的抗原特异性,可以用于HIV检测试剂的研制和开发。     

条件复制腺病毒的构建

条件复制腺病毒是针对第一代复制缺陷型腺病毒在临床应用中存在的问题而构建的能在肿瘤细胞特异复制的基因治疗载体。该从其构建机制、构建方式及效力评价等方面论述了为实现特异性高效复制所应考虑的诸多方面的问题,如特异性启动子的选择,基因重组方案的设计,以及相应的效力评价体系的构建等。     

四川地区宫颈癌HPV59型感染及其E6基因突变

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤,特定型别的人乳头瘤病毒(HPV)感染是引发宫颈癌的主要因素[1].根据HPV致癌性的不同可分为高危型,低危型.Munoz N[2]等对来自9个国家的1918例宫颈癌组织进行各型HPV筛查,最终确认HPV-16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73及82型为高危型.李洁等[3]用核酸印迹技术对1986至1994年间来自我国14个省市自治区的1008宫颈癌组织进行HPV型别检测,发现HPV-16、18、31、35、51、58等型的存在,并发现各地区主要流行型别随地理位置有所差异.     

HIV-1病毒样颗粒疫苗的构建及免疫原性研究

人免疫缺陷病毒HIV在全球的迅猛传播使得有效疫苗的研制工作变成重中之重.出于安全考虑,减毒或灭活的HIV病毒不能作为疫苗应用,VLPs则因为不具有病毒基因组而带来的安全性成为一个极具吸引力的选择.本研究通过共转染筛选得到了一个有效而持久表达HIV-1结构蛋白gag和env的真核细胞系,证实了细胞培养上清中的gag和env能够自组装成为病毒颗粒.这些VLPs能够在不经佐剂加强的条件下诱导产生具有特异性的体液和细胞免疫应答.     

重基础,视前沿,培养研究型高素质人才——吉林大学生命科学学院《生物化学》课程教学经验和体会

《生物化学》课程是生命科学最重要的专业基础课。我们在该课程的教学过程中,从教学内容、教材选择、课堂教学形式改革和教学团队建设等多方面入手,重视该课程的基础性,着眼于生物化学发展的前沿性和应用性,把培养高素质研究型生命科学人才作为目标。系统分析了《生物化学》课程的教学规律和特点,例举了一些实例介绍吉林大学生命科学学院《生物化学》课教学经验、体会和做法。     

HIV-1 gagpol重组腺病毒疫苗的构建及其免疫原性的研究

目的：构建HIV-1重组腺病毒疫苗并初步鉴定其免疫原性。方法：用Adeno-XExpressionSystem试剂盒将HIV—lgagpol基因片段插入到腺病毒载体上,通过脂质体介导将获得的重组腺病毒质粒Adeno—X-gagpol转染至293细胞,使之自主包装成有感染活性的重组腺病毒tad—gagpol,用western-blotting法鉴定其表达情况;用CsCl密度梯度离心法纯化该重组腺病毒,以5×10^8 pfu／mL的滴度lmL单次免疫小鼠,15天后测小鼠体液免疫效果。结果：克隆序列与设计相符,重组腺病毒疫苗能稳定表达gag—pol蛋白,体液免疫中检测出抗p55和p24的特异性抗体。结论：HIV—lgagpol重组腺病毒构建成功,具有一定的体液免疫原性。