IN VITRO AND IN VIVO CHEMOTACTIC EFFECT OF MIP-1a GENE TRANSFECTED TUMOR VACCINE ON IMMUNE EFFECTOR CELLS

ＩＮＶＩＴＲＯＡＮＤＩＮＶＩＶＯＣＨＥＭＯＴＡＣＴＩＣＥＦＦＥＣＴＯＦＭＩＰ－１ａＧＥＮＥＴＲＡＮＳＦＥＣＴＥＤＴＵＭＯＲＶＡＣＣＩＮＥＯＮＩＭＭＵＮＥＥＦＦＥＣＴＯＲＣＥＬＬＳ１ＣｈｅｎＧｕｏｙｏｕ陈国友ＣａｏＸｕｅｔａｏ２曹雪涛ＬｅｉＨｏｎｇ雷虹...     

ANTITUMOR EFFECT OF GRANULOCYTE-MACROPHAGE COLONY-STIMULATING FACTOR(GM-CSF)-GENE ENCODED VACCINIA MELANOMA ONCOLYSATE AND ITS IMMUNOLOGICAL MECHANISMS

ＡＮＴＩＴＵＭＯＲＥＦＦＥＣＴＯＦＧＲＡＮＵＬＯＣＹＴＥＭＡＣＲＯＰＨＡＧＥＣＯＬＯＮＹＳＴＩＭＵＬＡＴＩＮＧＦＡＣＴＯＲ（ＧＭＣＳＦ）ＧＥＮＥＥＮＣＯＤＥＤＶＡＣＣＩＮＩＡＭＥＬＡＮＯＭＡＯＮＣＯＬＹＳＡＴＥＡＮＤＩＴＳＩＭＭＵＮＯＬＯＧＩ...     

微酸法提取肿瘤抗原肽体外冲击树突状细胞后回输体内的抗肿瘤效应

肿瘤抗原可以由肿瘤细胞的MHCⅠ类分子提呈于细胞表面,经微酸法可以从肿瘤细胞表面洗脱下被MHCⅠ类分子所提呈的抗原多肽,进一步纯化富集后可获得高纯度的肿瘤抗原多既.从癌性腹水分离FBL3白血病细胞,以微酸提取液洗脱瘤细胞表面1类肽,洗脱液经Separk C18柱吸附,乙酸洗脱后,可获得分子量小于5,000D的多肽分子,冻干后即可用作肿瘤抗原多肽富集产物.骨髓诱生的树突状细胞,加人FBL3酸提抗原可有效激发FBL3特异性T细胞株的增殖,表明可以被酸提抗原多肽树突状细胞提呈给T细胞.将酸提抗原冲击后的树突状细胞回输小鼠体内,2天后,皮下接种FBL3细胞(3×10~6),而另设FBL3冻融抗原冲击DC治疗组及未处理组.酸提抗原致敏DC治疗组小鼠可诱导较     

经IFN-γ诱导的人IL-2基因修饰的人原代成纤维细胞体外细胞因子表达及某些免疫学特性的研究

成纤维细胞作为基因治疗载体细胞是肿瘤基因治疗的一项重要途径,但以往的研究仅仅将成纤维细胞作为载体而忽略了其自身的免疫学功能的发挥。本文采用本室构建的逆转录病毒载体将IL-2基因转入人原代成纤维细胞,再用IFN-7诱导。结果表明,IFN-7诱导后,IL-2基因修饰的成纤维细胞MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD40等分子表达具有一定程度的增高,并且表达IL-2、IL-1、IL-6等,由于这些免疫分子及细胞因子的表达与肿瘤抗原的递呈、效应细胞的激活密切相关,提示这种经IFN-7诱导后的IL-2基因修饰的成纤维细胞可能作为抗原递呈细胞而参与肿瘤抗原的递呈及效应细胞的激活。     

T细胞及相关免疫分子在淋巴细胞趋化因子增强肿瘤自杀基因疗法中的作用

本室以往的研究表明,用腺病毒作为载体将大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(CD)基因与小鼠淋巴细胞趋化因子(Itn)基因联合体内转染,具有显著的抗肿瘤效应.本文对其免疫机理进行了进一步研究,发现CT26结肠腺癌细胞体外经过CD/Ltn基因转染并给予前体药物5-FC后,CT26结肠腺癌细胞表达CD80和CD54分子明显增加,提示经CD自杀基因和Ltn基因联转移后,肿瘤细胞免疫原性增加.荷瘤小鼠体内经联合治疗后,小鼠脾细胞分泌IL-2和IFN-γ明显增加.体内用抗CD4、CD8抗体阻断实验研究结果的表明,联合应用自杀基因和Ltn基因治疗主要通过诱导CD8~ T细胞发挥抗肿瘤作用.     

腺病毒介导的肝癌自杀基因疗法的实验研究

本文观察了胞嘧啶脱氨酶(CD)基因/5-氟胞嘧啶(5FC)自杀基因疗法对肝癌模型的治疗作用。以CMV启动子调控CD基因的重组腺病毒载体AdexCMV.CD在体外能有效转染人肝癌细胞株SMMC-7721和HepG2,转染后的细胞体外生长能力无明显变化,对5FC的敏感性明显增高。当以AFP上游调控序列驱动CD基因的重组腺病毒载体AdexAFP.CD分别转染SMMC-7721和HepG2时,CD基因能在HepG2中表达,使HepG2对5FC的敏感性增高,但不能使SMMC-7721的生长受到5FC的抑制。[~3H]TdR掺入法观察体外旁观者效应时发现,当细胞总数中转染细胞数超过20％时,其生长明显被5FC抑制。将AdexCMV.CD直接注射入裸鼠接种SMMC-7721细胞形成的皮下肿瘤中,并全身应用5FC后,与对照组相比,肿瘤大小在开始治疗后第8天约缩小3倍,第18天约缩小4倍,以上结果表明,腺病毒介导的CD/5FC自杀基因系统能在体内、外有效地抑制肝癌的生长。以AFP上游调控序列驱动CD基因的腺病毒载体介导的基因转染能在AFP阳性的肝癌细胞中特异表达。     

醒脑静注射液在脑损伤后综合症治疗中的应用

目的：观察中成药醒脑静注射液对脑损伤后综合症的治疗效果。方法：采用Ｒｉｄｉｔ检验对比醒脑静治疗组与对照组病人在治疗前后的临床症状。结果：醒脑静能改善病人的临床症状，使ＣＴ或ＭＲＩ上轻度扩大的脑池、脑室形态恢复正常，脑实质内低密度信号减少或消失，并使脑电地形图上病理波减少，纠正失同步化现象。结论：临床应用醒脑静治疗脑损伤后综合症有明显疗效，可能与其修复重建血脑屏障，提高脑血流灌注，改善脑细胞代谢有关     

IL—2,IL—4基因转染后肿瘤细胞表面ICAM—1分子的表达及其作用

为了进一步研究细胞因子基因转染后肿瘤细胞体内致瘤原性、免疫原性变化的分子机制，将ＩＬ－２、ＩＬ－４基因转染入Ｂ１６黑色素瘤细胞，观察了其体内接种后致瘤原性变化，通过ＦＡＣＳ法检测了其细胞表面粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的表达水平，分析了其细胞表面ＩＣＡＭ－１表达水平以及它们与肿瘤细胞对ＬＡＫ、ＣＴＬ等免疫效应细胞杀伤敏感性变化的关系。结果表明，ＩＬ－２、ＩＬ－４基因转染后Ｂ１６细胞体内致瘤原性明显     

IL－2基因转移的瘤苗与IL－1、低剂量环磷酰胺合用后的肿瘤治疗作用及其免疫学机理

经ＩＬ－２基因转移瘤苗治疗后荷瘤小鼠肺转移结节明显减少、存活期明显延长，与ＩＬ－１或低剂量Ｃｙ合用后，可使荷瘤小鼠的肺转移结节更少，存活期更长，特别是当ＩＬ－２基因转移的瘤苗、ＩＬ－１、低剂量Ｃｙ三者合用时抗肿瘤转移效果最强。对瘤苗治疗后荷瘤小鼠体内免疫功能的研究表明，小鼠脾脏ＣＴＬ活性、ＮＫ活性、ＩＬ－２导的ＬＡＫ活性均显著增强，脾脏细胞分泌ＩＬ－２和ＴＮＦ水平也显著升高，当与ＩＬ－１、低剂量Ｃｙ合用时，上述抗肿瘤免疫功能升高得更加明显，可见ＩＬ－２基因转移的瘤苗能通过有效地激活体内抗肿瘤免疫功能而具有显著的抗肿瘤转移效果，将其与ＩＬ－１或低剂量Ｃｙ联合应用时抗肿瘤效果更佳，当三者同时合用时抗肿瘤效果最佳。