银染法和鬼笔环肽染色观察不同发育阶段小鼠骨细胞突触

目的 采用银染法和鬼笔环肽染色方法探究骨细胞突触在不同发育阶段的组织形态并探讨两种染色方法在观察小鼠骨细胞不同发育阶段形态中应用价值。方法 取出生后0 d（P0）、5 d（P5）、15 d（P15）、21 d（P21）、28 d（P28）、35 d（P35）野生型小鼠的肱骨、股骨，制备冰冻切片及石蜡切片。对P35小鼠的股骨切片进行H&E染色，作为观察骨小梁和皮质骨中骨细胞的参照。对其他时期的肱骨组织切片采用银染法染色观察骨细胞和骨小管的形态，并记录各时期小鼠肱骨骨皮质和骨小梁中骨小管的长度。选取P10、P15两个时期小鼠肱骨的冰冻切片进行鬼笔环肽 iFlour-488染色，观察骨细胞的形态，并记录骨皮质中骨细胞突触的长度。结果 通过银染法染色，在P0~P15时期的小鼠肱骨骨小梁中，我们仅能观察到骨细胞轮廓，无法观察到骨小管的形态。在P21后，通过银染法可以观察到骨小梁骨细胞及骨小管的形态，且骨细胞周围骨小管的长度随年龄逐渐变长，P21 vs P28（P<0.05），P21 vs P35（P<0.05），排列整齐。在P15时期的小鼠肱骨骨皮质中，通过银染法即可以观察到骨细胞及骨小管的形态，且骨细胞周围骨小管的长度随年龄逐渐变长，P15 vs P21（P<0.005），P15 vs P28（P<0.0001），P15 vs P35（P<0.0001），排列整齐。采用鬼笔环肽iFlour-488染色，可以观察到P10和P15时期骨细胞的完整形态，骨细胞突触随着年龄增加逐渐变长，P10 vs P15（P<0.01），与周围骨细胞连接。结论 小鼠骨细胞突触随骨骼发育长度逐渐加长、排列逐渐整齐。银染法可以观察成年后骨细胞及骨小管的形态，对生长发育早期的骨小管形态显像不足。鬼笔环肽染色标记细胞骨架的方法适用于生长发育各时期的骨细胞染色，可以实现在发育早期对骨细胞的形态的检测。     

营养支持小组对于食管癌同步放化疗患者作用的研究

  目的  研究营养支持小组(NST)的参与是否对接受同步放化疗食管癌患者有益。   方法  2012年6月至2013年12月因食管癌拟行放化疗患者40例入组, 随机分为NST组和常规治疗组进行营养干预, 观察放疗结束时患者营养状况、并发症发生率、治疗完成率、住院时间及住院费用。   结果  NST组患者放疗结束时各项营养及血液指标均优于常规治疗组(P < 0.05), 并发症发生率低于常规治疗组(P < 0.05), NST组全部按计划完成治疗, 常规治疗组5例出现中断或延迟(P < 0.05), NST组住院时间平均缩短3.8d(P < 0.05), 住院费用减少了6 300元/人次(P＞0.05)。   结论  对于食管肿瘤放化疗患者, 营养支持小组的参与有利于维持患者的营养状况, 提高患者的治疗顺应性, 缩短住院时间, 降低住院费用。      

中西药合用治疗多发性跖疣临床观察

目的：观察中西药合用治疗多发性跖疣的疗效。方法：68例随机分为对照组和治疗组各34例。对照组用温水泡洗患足后疣体处用咪喹莫特乳膏外搽,治疗组中药煎水泡洗患足后疣体处用咪喹莫特乳膏外搽。结果：愈显率治疗组高于对照组（P<0.05）。治疗后两组疣体数量评分和疣体大小评分、疼痛程度评分及症状积分均降低,治疗组更低（P<0.05）。两组不良反应比较无明显差异（P<0.05）。治疗组复发率低于对照组（P<0.05）。结论：中药联合咪喹莫特乳膏治疗多发性跖疣疗效较好且复发率低。     

甲状旁腺激素相关蛋白对骨关节炎软骨细胞修复的作用机制及应用进展

甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related peptide,PTHrP)与关节软骨细胞有关的作用机制,包括在生长发育过程中与调节软骨内成骨过程相关的作用机制,在生理状态下与维持关节软骨正常形态相关的作用机制,及其与骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨发病过程中的相关的作用机制。探究PTHrP在OA治疗中的应用,包括其中央区及C端肽段的独特作用及影响其效果的不同因素,如施加时间的间隔、每次施加的时间长度及施加的时间点。     

适用于单细胞RNA测序的半月板细胞提取方法的优化

目的 优化半月板细胞提取的方法,缩短细胞提取时间,稳定地获取细胞数量多和细胞活率高的细胞悬液,使获得的细胞悬液悬液适用于单细胞RNA测序。方法 比较细胞悬液的细胞数量及细胞活率评价不同细胞提取方法的有效性,细胞提取方法包括传统半月板细胞提取法（短时间消化和长时间消化）和优化提取法;通过分析单细胞RNA测序数据集评价优化提取法获取的细胞悬液的稳定性;通过比较优化提取法获得的单细胞RNA测序数据集与公开的半月板单细胞RNA测序数据集,分析优化提取法的可靠性。结果 在3次重复实验中,优化提取法获得细胞数量最多的细胞悬液,细胞数量超过105,且细胞活率最高,平均达80%。通过分析单细胞RNA测序数据发现每个样本中80%以上细胞的线粒体基因含量少于20%。CD34+,MCAM+细胞以及COL1A1+胞均存在每个单细胞RNA测序数据集中。在比较基于优化提取法单细胞RNA测序数据集与公开的半月板单细胞RNA测序数据集时发现,优化提取法也能捕获COL3A1+细胞,COL1A1+细胞,MYLK+细胞,BMP2+细胞,CD93+细胞和CDK1+细胞。结论 优化细胞提取方法能稳定地获得适用于10×Genomics平台的单细胞RNA测序技术的单细胞悬液。