PAI－1糖基化位点突变体的构建及其在哺乳动物细胞中表达

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡＩ－１）是一种Ｍｒ为５０×１０３的单链糖蛋白，有３７９个氨基酸残基，３个Ｎ型糖基化位点。构建ＰＡＩ－１糖基化突变体，以便研究糖链的功能。用寡核苷酸定位突变技术将３个糖基化位点２０９，２６５，３２９位进行突变，把３个糖基化位点都发生了突变的ＰＡＩ－１ｃＤＮＡ组装到真核表达载体ｐＳＶ２中，得到真核表达质粒ｐＺＨ－ｐ１－Ｍ３Ｅ；在二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯｄｈｆｒ－）中进行短暂表达，用发色底物法和夹心ＥＬＩＳＡ方法检测培养液中ＰＡＩ－１的活性和含量。结果：糖基化位点突变的ＰＡＩ－１能在ＣＨＯ细胞中表达，但表达水平及活性较低。非糖基化ＰＡＩ－１的活性和抗原分别为４．３４ＩＵ／ｍｌ和３．１５μｇ／Ｌ结论：用寡核苷酸定位突变方法获得了ＰＡＩ－１糖基化突变体，并且在ＣＨＯ细胞中得到表达。     

影像学与病理学在非小细胞肺癌靶区勾画的相关性研究

肺癌是常见的最恶性肿瘤之一,其发病率及死亡率在我国已居首位,但其5年生存率一直徘徊在10%左右.常规放疗治疗肺癌特别是非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效并不显著,5年生存率只有5%～10%.根据Fletcher的理论要杀灭NSCLC肿瘤的剂量可能要100Gy左右,不但正常组织不能耐受,而且常规放疗技术是不可能实现的.随着三维适形放疗(3D-CRT)、调强适形放疗(IMRT)等技术得到广泛运用,靶区勾画是适形放疗的"精确诊断"、"精确定位"、"精确计划"、"精确治疗"中最重要和最基础的步骤之一.     

热疗联合放化疗治疗晚期胰腺癌临床观察

目的 评价聚焦热疗联合调强放疗(IMRT)和经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗晚期胰腺癌的临床效果.方法 52例患者按信封法随机分为2组,观察组27例患者采用BSD2000相控阵聚焦热疗联合IMRT和TACE,对照组25例患者采用IMRT和TACE.结果 观察组总有效率66.7％、临床受益率92.6％,高于对照组的32.0％和68.0％ (P ＜0.05).观察组生存状况优于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05).2组毒副反应发生情况比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 聚焦热疗联合IMRT和TACE治疗晚期胰腺癌安全有效,能够改善患者生存情况.     

聚焦热疗联合动脉灌注化疗治疗晚期胰腺癌的临床观察

目的观察聚焦热疗联合动脉灌注化疗治疗晚期胰腺癌的临床疗效。方法将25例晚期胰腺癌患者随机分为治疗组13例和对照组12例。治疗组采用BSD2000相控阵聚焦热疗联合动脉灌注化疗治疗,对照组予单纯动脉灌注化疗治疗。观察2组病灶变化情况,临床受益反应（CBR）、生存率及不良反应情况。结果治疗组肿瘤灶变化总有效率为30．8％高于对照组的16．1％,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组CBR有效率为53．8％高于对照组的33．3％,差异有统计学意义（P〈0．05）。2组生存率及不良反应差异无统计学意义（P〉0．05）。结论热疗联合动脉灌注化疗治疗晚期胰腺癌能提高近期有效率及患者生活质量,值得临床推广应用。     

LEF1在胃癌中的表达及意义

目的:运用生物信息学技术分析淋巴增强因子-1(Lymphoid enhancer factor-1,LEF1)在胃癌中的表达及意义.方法:通过Oncomine、Ualcan、肿瘤免疫评估资源(TIMER)数据库检索并分析LEF1基因在胃癌中的表达.TIMER数据库分析LEF1在免疫浸润物中的表达;Ualcan数据库、K...     

卡培他滨联合放疗治疗消化道肿瘤的临床观察

目的：观察卡培他滨联合放疗与单纯放疗治疗消化道恶性肿瘤的疗效。方法：52例有腹腔内可评价病灶的消化道恶性肿瘤病例,分为放疗与卡培他滨联合组（治疗组）26例和单纯放疗组（对照组）26例,治疗组接受腹腔病灶三维适形放疗DT=60-65Gy,同时口服卡培他滨1.5bid共14天,每21天为1周期,共6个周期,对照组只接受腹腔病灶三维适形放疗,DT=60-65Gy,治疗过程中观察毒性反应,放疗结束后2个月评价疗效,观察疾病进展时间（TTP）、1年及2年生存率。结果：治疗组退出试验者3例,可评价病例23例,有效率78.3%（18/23）,对照组有效率61.5%（16/26）,治疗组TTP10个月,对照组5.5个月,P〈0.05,治疗组1年及2年生存率为60.1%和47.8%,对照组为46.2%和19.2%,1年生存率无差异（P〉0.05）,2年生存率有差异（P〈0.05）。结论：卡培他滨同步放疗治疗消化道恶性肿瘤,较单纯放疗能延长疾病进展时间,提高2年生存率,但对有效率、1年生存率无影响。     

放射治疗食管癌术后纵隔淋巴转移的疗效分析

【摘要】 目的 探讨放射治疗食管癌术后纵隔淋巴结转移的临床疗效。方法 回顾性分析2010年～2014年收治食管癌术后纵膈淋巴结转移47例, 其中男性37例,女性10例,年龄38～80岁,中位年龄在604岁。病变位于胸上段5例,胸中段40例,胸下段2例。术后分期Ⅱ期29例,Ⅲ期18例,术后病理诊断47例均为鳞癌。单纯放疗31例,放化疗16例。结果 纵隔淋巴结转移治疗后中位生存期为19个月,1、2、3 年生存率分别为58.1%、36%、19.4 %; 单因素分析显示术前肿瘤病变部位、放疗剂量及术后分期对预后具有显著影响（P＜0.05 ）。而患者的性别、肿瘤病变长度、放疗方式及是否化疗对预后无关。COX回归分析显示术后分期及放疗剂量为独立预后影响因子（P＜0.05）。结论 术后分期及放疗剂量是食管癌术后纵隔淋巴结转移的主要预后影响因素。     

放疗联合卡培他滨治疗老年食管癌

目的观察调强放疗联合卡培他滨治疗老年食管癌的疗效和毒副反应。方法将69例不能手术或不同意手术的中晚期食管癌患者随机分为观察组35例和对照组34例。观察组采用调强放疗同步希罗达化疗：口服卡培他滨1000mg/m2,2次/天,连用14天后停药7天,21天为1周期,共2周期。对照组单纯调强放疗。两组放疗均采用常规分割,总剂量DT60～66GY/30～33/6～7W。治疗结束4周后比较两组的近期疗效及毒副反应,随访两组的1、2、3年生存率。结果观察组与对照组总有效率（CR＋PR）分别为85.7%和64.7%（P〈0.05）,1年生存率分别为80%和55.9%（P〈0.05）,2年生存率分别51.4%和37.1%（P＞0.05）,3年生存率分别为31.4%和23.5%（P＞0.05）,不良反应主要表现为放射性食管炎和骨髓抑制、放射性肺炎、消化道症状、手足综合征,多为Ⅰ、Ⅱ级,无统计学差异（P＞0.05）。结论调强放疗联合希罗达治疗中晚期食管癌可显著提高老年患者的局部控制率和近期疗效,副反应轻,但对2、3年生存率无影响。     

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA表达质粒的构建及其在哺乳动物细胞中的表达

建立Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡⅠ－１）ｃＤＮＡ哺乳动物细胞表达体系。用人工合成的６个寡核苷酸连接成编码ＰＡⅠ－１Ｎ－端１０个氨基酸和２３个氨基酸的信号肽顺序；将构成的完整ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ插入真核表达质粒ｐＳＶ２ｄｈｆｒ中，获得真核表达质粒ｐＺＹＳ－１；将ｐＭＡ２１２中的ｈＭＴ－ⅡＡ的起动子再插入ｐＺＹＳ－１，使ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ受ＳＶ４０和ｈＭＴ－ⅡＡ双启动子控制，得ｐＺＹＳ－２。２个表达质粒分别在ＣＯＳ－７细胞中进行表达。结果：获得两个真核表达质粒，在ＣＯＳ－７细胞中得到表达，在培养液中的ＰＡⅠ－１活性和抗原含量分别为２３４．７ＩＵ／ｍｌ和３０μｇ／Ｌ。结论：ｐＺＹＳ－１和ｐＺＹＳ－２两株ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ真核表达质粒在ＣＯＳ－７细胞中能有效表达和分泌。     

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA表达质粒的构建及其在哺乳动…

建立Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂ｃＤＮＡ哺乳动物细胞表达体系。用人工合成的６个寡核苷酸连接成编码ＰＡＩ－１Ｎ端１０个氨基酸和２３个氨基酸的信号肽顺序；将构成的完整ＰＡＩ－１ｃＤＮＡ插入真核表达质粒ｐＳＶ２ｄｈｆｒ中，获得真核表达质粒ｐＺＹＳ－１。