超声聚焦刀对胰腺癌细胞的生长抑制作用及机理研究

目的应用免疫组织化学分析胰腺癌细胞中bcl-2蛋白，研究超声聚焦刀对bcl-2蛋白表达的关系。方法以对胰腺癌Capan-1细胞、胰腺癌患者超声聚焦刀治疗前后的穿刺组织（18例）为研究对象，采用免疫组织化学（SP法）检测bcl-2的表达。结果无转移、高分化的胰腺癌bcl-2蛋白明显高于有转移和低分化的胰腺癌。结论bcl-2蛋白可能作用于胰腺细胞的癌变阶段，超声聚焦刀治疗后对bcl-2蛋白表达有明显减低。     

新型酪氨酸激酶抑制剂HHGV678对Bcr-Abl野生型细胞株和伊马替尼耐药细胞株抑制作用的体外研究

本研究比较新型的酪氨酸激酶抑制剂HHGV678与伊马替尼(imatinib,IM)在体外对Bcr-Abl野生型和IM耐药细胞株的抑制作用,探索HHGV678替代IM治疗CML及IM耐药CML患者的可能性。以Bcr-Abl野生型细胞株(K562和32Dp210)及16种IM耐药细胞株(K562R和15种Bcr-Abl点突变细胞株)为研究对象,用MTT法检测HHGV678和IM对上述细胞的生长抑制作用;以DNA梯形条带法和Annexin-V/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡;应用Western blot检测HHGV678对上述细胞BCR-ABL融合蛋白及酪氨酸激酶磷酸化表达的影响。结果表明:HHGV678呈剂量依赖性显著抑制Bcr-Abl野生型细胞株和除T315I点突变细胞株以外的IM耐药细胞株生长。比较IC50发现,HHGV678在低剂量下(0.01-0.3μmol/L)抑制K562和32Dp210细胞生长的作用比IM分别强15.5和28倍;而对除T315I点突变细胞株以外的15种IM耐药细胞株细胞的生长抑制作用比IM强1.4-124.3倍。HHGV678抑制上述细胞酪氨酸激酶磷酸化的能力均强于IM。更重要的是HHGV678在10.0μmol/L剂量下诱导IM强耐药细胞株K562R和T315I点突变细胞株的凋亡率分别达到40.06%和33.32%,显著高于IM的19.77%和10.68%。结论:新型酪氨酸激酶抑制剂HHGV678对Bcr-Abl野生型细胞株和IM耐药细胞株,尤其是对IM强耐药细胞株的生长抑制作用明显强于IM,但HHGV678能否成为治疗CML和IM耐药CML患者新的靶向药物,仍有待进一步的研究。     

异基因造血干细胞移植治疗白血病

目的探讨异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)治疗白血病的疗效、造血重建及生存情况.方法白血病患者10例,其中同胞间HLA相合的异基因外周血干细胞移植(Allo-PBSCT)7例,无亲缘关系HLA不全相合脐血移植(UCBT)3例.结果9/10例受者获造血重建,UCBT患者造血重建速度较HLA相合的同胞PBSCT慢,1例UCBT移植后35天造血未重建,回输自体外周血干细胞后,仍未能重建造血,于72天死亡.其余至今均无病生存.结论Allo-HSCT是目前治愈白血病的有效方法,对于无同胞HLA相合的供者,选择细胞数量较高、HLA 1～2个位点不合的UCBT仍然有效可行.     

胃镜活检组织kiss-1基因检测与肿瘤分期及预后的关系

目的:研究kiss-1基因在胃癌中的表达水平及其临床意义.方法:30例患者依照PCR技术检测出的kiss-1表达中位数分为高表达和低表达2组,对比临床病理学特征.结果:kiss-1基因低表达者较高表达者均伴有低肿瘤分期(f=1.87,F=1.00,P=0.025)、频发肿瘤周围静脉侵袭(t=3.51,F=1.22,P=0.009)和远处淋巴结转移(t=2.26,F=2.17,P=0.009).结论:kiss-1基因表达可以成为反映胃癌分期和预后的重要生物学标志物.     

尿多酸肽对高危组骨髓增生异常综合征细胞株p15~(INK4B)基因的去甲基化作用

目的探讨尿多酸肽(CDA-2)对高危组骨髓增生异常综合征(MDS)细胞株p15INK4B基因的去甲基化作用。方法检测不同浓度CDA-2作用下,MDS-RAEB细胞株MuTz-1的细胞存活率(MTT法);p15INK4B基因、甲基转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA表达(RT-PCR);p15INK4B基因甲基化程度(甲基化特异PCR,MSP)。结果CDA-2呈剂量依赖性抑制MuTz-1细胞生长;伴随CDA-2剂量增加,p15INK4B基因甲基化程度逐渐减弱,其mRNA表达逐渐增加;且CDA-2可显著降低MuTz-1细胞中DNMT1和DNMT3BmRNA的表达。结论CDA-2可能通过下调DNMT1和DNMT3BmRNA表达使p15INK4B基因甲基化程度下降,恢复其在细胞周期中的调节作用,进而抑制MDS细胞的过度增殖。     

高强度聚焦超声对胰腺癌细胞株Capan-1生长抑制作用的体外研究

目的观察高强度聚焦超声对体外培养的胰腺癌细胞株Capan-1的生物学效应,分析高强度聚焦超声破坏肿瘤细胞的剂量与效应的关系。方法以高强度聚焦超声作用的胰腺癌Capan-1细胞株为研究对象,应用四甲基偶氮唑盐法测定细胞存活率,应用DNA梯度试验检测细胞凋亡,应用流式细胞术标记Annexin V&PI检测细胞凋亡。结果四甲基偶氮唑盐实验结果显示,随着高强度聚焦超声辐照强度和时间的增加,细胞存活率呈显著下降,其半致死量为269.8 W/cm2(7 s);DNA梯度试验与流式细胞术显示高强度聚焦超声具有诱导细胞凋亡的作用。结论高强度聚焦超声具有抑制胰腺癌Capan-1细胞生长的作用,同时具有诱导细胞凋亡的作用。     

三氧化二砷对伊马替尼耐药细胞株32Dp210T315I的体外抑制作用研究

目的 探讨三氧化二砷( ATO)对伊马替尼(IM)产生耐药性的慢性粒细胞性白血病(CML)细胞是否具有抑制细胞生长的作用.方法 小鼠髓系造血细胞株32D细胞经处理使其变为表达p210Bcr-Abl的32Dp210细胞,以此作为野生型细胞.32Dp210和伊马替尼耐药细胞株32Dp210T315I分别在含有10％ FBS,2％ L-glutamine和1％ Penicillin-Streptomycin的RPMI1640和IMDM培养体系中培养.细胞株分别在不同浓度的三氧化二砷、伊马替尼作为对照的没有药物作用的培养体系中培养.在24h和48 h后,MTT实验检测细胞增殖,Annexin-V staining实验检测细胞凋亡.结果 在体外试验中,我们发现三氧化二砷对32Dp210和32Dp210T315I具有剂量依赖的抑制作用,对32Dp210T315I细胞的抑制比对32Dp210细胞更为有效.三氧化二砷对32Dp210T315I细胞的50％抑制浓度(IC50)是1μmol/L,远低于32Dp210的IC50值(4μmol/L).2μmol/L三氧化二砷可以明显诱导约90％的32Dp210T315I细胞凋亡,比32Dp210的凋亡率(30％)高很多.结论 ATO具有作为一种生长抑制剂和诱导伊马替尼耐药细胞凋亡的特性,也使其成为一种新的治疗伊马替尼耐药CML患者的治疗途径.     

胃镜活检组织kiss-1基因与胃癌的关系

目的研究kiss-1基因在胃癌中的临床意义。方法30例患者依照PCR技术检测出的kiss-1表达中位数分为高表达和低表达2组,每组15例,对比临床病理学特征。结果kiss-1基因低表达者均伴有高肿瘤分期、肿瘤周围静脉侵袭和远处淋巴结转移（P〈0.05）。结论kiss-1基因高表达提示肿瘤分期较低且预后较好;低表达提示肿瘤分期较高且预后较差。     

改良BU/CY预处理异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病

异基因造血干细胞移植是治疗恶性血液病的有效方法,造血干细胞移植中预处理方案的选择和顺利进行是保证移植成功的重要部分。我们自2003年以来用改良BU/CY方案对39例恶性血液病患者进行了异基因造血干细胞移植,现报道如下。1资料与方法1.1临床资料39例均为2003年3月-2007年12月在我院住院患者,男22例,女17例;中位年龄30（6-55）岁。     

急性移植物抗宿主病患者白细胞介素21水平的变化

回顾性分析2003-03/2007-01哈尔滨市第一医院骨髓移植科行异基因造血干细胞移植治疗的白血病患者20例,男8例,女12例,年龄8~55岁。其中慢性粒细胞白血病4例,急性粒细胞白血病(M2)5例,急性粒单细胞白血病(M4)2例,急性单核细胞白血病(M5)3例,急性淋巴细胞白血病6例。15例外周血干细胞移植只有1例HLA-CW位点亚型不合,其余HLA全部相合,1例无关骨髓移植HLA全部相合。观察全部患者急性移植物抗宿主病的发病情况,移植前后定期采集20例患者外周血,采用双夹心酶联免疫吸附法检测其细胞因子白细胞介素21的水平。结果显示异基因造血干细胞移植后20例患者全部获得造血功能重建,中性粒细胞恢复到0.5×109L-1,血小板恢复到20×109L-1的中位时间分别为移植后13.5d及18d。发生急性移植物抗宿主病患者的白细胞介素21水平较移植前及未发生患者明显升高(P<0.01)。提示检测异基因造血干细胞移植后患者血清白细胞介素21水平有助于预测急性移植物抗宿主病的发生。