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目的利用液质联用技术研究温度和pH对重组人血管内皮抑制素中天冬酰胺(Asn)脱酰胺过程的影响。方法在不同的温度和pH值条件下,对重组人血管内皮抑制素样品溶液进行孵化,酶解处理后利用液质联用技术识别发生脱酰胺的多肽并测定其含量随样品放置温度和pH条件的变化。结果质谱分析结果表明酶解产物中多肽SVWHGSDPNGR序列中的Asn发生了脱酰胺化,Asn残基生成了天冬氨酸和异天冬氨酸残基,其他位置的Asn均未检测出明显的脱酰胺化;实验获得了不同温度和pH条件下重组人血管内皮抑制素中Asn脱酰胺化的速率及动力学常数;Asn脱酰胺过程随着温度和溶液pH值的升高,Asn脱酰胺速率上升。结论重组人血管内皮抑制素中天冬酰胺的脱酰胺过程受储存温度和pH值影响,研究药用蛋白质在不同条件下的脱酰胺过程对于筛选合适的储存条件、减少活性损失具有重要意义。 相似文献
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碱提山茱萸多糖的理化性质及抗氧化活性研究 总被引:25,自引:0,他引:25
目的 研究碱提山茱萸多糖的单糖组成及抗氧化活性。方法 经热水抽提后的山茱萸残渣用碱提取、盐酸中和、浓缩、透析、乙醇沉淀、DEAE-纤维素柱色谱分离 ,再通过 Sephadex G- 2 0 0柱色谱进一步纯化 ,得到白色粉末状多糖 PFCC 。结果 该多糖经过完全酸水解、薄层色谱、红外光谱分析 ,证明 PFCC 由木糖和葡萄糖以 18.8∶ 81.2摩尔比组成 ,平均相对分子质量为 7.5 7× 10 4。以羟基自由基 (· OH)清除剂苯甲酸和甘露醇为对照 ,用Fenton反应检测 PFCC 对· OH的清除作用 ,三者对· OH的清除率达 5 0 %所需浓度为 18,330 ,80μg/ m L。PFCC 可以有效抑制猪油和芝麻油的氧化 ,对 O÷2 的清除率达 5 0 %所需浓度为 35 .0 μg/ m L。结论 该多糖为首次提取制得 ,具有良好的抗油脂氧化及清除自由基能力 相似文献
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肝素降解和低分子量肝素的制备 总被引:22,自引:1,他引:21
综述了化学法和酶法制备低分子量肝素的研究进展。化学法包括亚硝酸降解法、β 消去降解法、过氧化氢降解法、高碘酸降解法、硫酸 氯磺酸降解法、次氯酸降解法。酶法主要是肝素酶降解法。对各种制备低分子量肝素方法的特点进行比较 ,并对分子量测定方法和特点进行了讨论。 相似文献
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目的 研究碱提山茱萸多糖的单糖组成及抗氧化活性。方法 经热水抽提后的山茱萸残渣用碱提取、盐酸中和、浓缩、透析、乙醇沉淀、DEAE-纤维素柱色谱分离 ,再通过 Sephadex G- 2 0 0柱色谱进一步纯化 ,得到白色粉末状多糖 PFCC 。结果 该多糖经过完全酸水解、薄层色谱、红外光谱分析 ,证明 PFCC 由木糖和葡萄糖以 18.8∶ 81.2摩尔比组成 ,平均相对分子质量为 7.5 7× 10 4。以羟基自由基 (· OH)清除剂苯甲酸和甘露醇为对照 ,用Fenton反应检测 PFCC 对· OH的清除作用 ,三者对· OH的清除率达 5 0 %所需浓度为 18,330 ,80μg/ m L。PFCC 可以有效抑制猪油和芝麻油的氧化 ,对 O÷2 的清除率达 5 0 %所需浓度为 35 .0 μg/ m L。结论 该多糖为首次提取制得 ,具有良好的抗油脂氧化及清除自由基能力 相似文献
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中药复方对顺铂肾形态学损害的保护作用 总被引:3,自引:0,他引:3
顺铂(cis-diaminodichloroplatin,CDDP,简称DDP),是一种广泛应用的抗癌药物。临床研究表明,DDP抗癌作用强,与其他抗肿瘤药无交叉抗药性,对多种恶性肿瘤的治疗有显著的疗效,但DDP有广泛的毒性,特别是严重的肾毒性,限制了它在临床上的应用。中医药防治其化疗毒副反应有独特的优势,我们拟益气补肾中药,从形态学观察该复方对DDP的肾毒性的保护作用。 相似文献
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目的从中华眼镜蛇毒中分离纯化核糖核酸酶,并研究其生物学活性。方法以中华眼镜蛇毒为原料,采用SP-Trisacryl阳离子交换色谱、Sephadex G-75凝胶色谱、C8反相色谱等纯化方法,分离纯化具有核糖核酸酶活性的蛋白质,表征其酶学性质,检测其抑菌性、抗肿瘤细胞作用及抗氧化作用。结果 SDS-PAGE电泳显示纯化的中华眼镜蛇毒核糖核酸酶(Na-RNase)为相对分子质量为13 000的单一成分。该酶最适反应温度为40℃,最适pH值为6.5,米氏常数为3.67μmol/L,最大反应速率为3.52 pmol/s。在体外抑菌实验中,在8μmol/L的浓度下对大肠艾希菌和金黄葡萄球菌均未显示出显著抑制作用;在体外细胞毒性实验中,对于Hela肿瘤细胞和正常的人成纤维细胞在8μmol/L的浓度下无明显抑制作用;在抗氧化实验中,浓度达到71.5μmol/mL时,对小鼠肝微粒体脂质过氧化反应的抑制率为41.30%。结论中华眼镜蛇毒中的核糖核酸酶具有抗氧化作用,可能作为氧化还原的调节剂,在有关的疾病治疗方面具有应用的潜能。 相似文献
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