2-脱氧葡萄糖联合二甲双胍抗人肝癌HepG2细胞作用及与AMPK、mTOR相关性研究

目的 考察2-脱氧葡萄糖（2-DG）联合二甲双胍（Met）协同抗人肝癌HepG2细胞作用并探索其机制。方法 刃天青法测定2-DG及Met单独及联合应用对HepG2细胞的生长抑制作用,利用金氏公式计算联合用药Q值;利用高内涵细胞成像系统考察单独及联合用药对细胞线粒体膜电位及活性氧产生的影响;Western blotting检测Cleave-Caspase 3、p-AMPK及p-mTOR的蛋白变化;考察AMPK及mTOR抑制剂对联合用药后细胞生长抑制作用的影响。结果 2-DG、Met单独应用的IC₅₀值分别为2.45及16.35 mmol/L,联合用药对细胞生长抑制具有协同作用,Q值均大于1.15;联合用药能显著降低细胞内线粒体膜电位及p-mTOR蛋白表达,显著增加细胞内活性氧产生及Cleave-Caspase3、p-AMPK蛋白表达;抑制AMPK或mTOR能显著增加联合用药对细胞的生长抑制作用（P<0.05、0.01）。结论 2-DG联合Met具有协同抑制HepG2细胞增殖作用,其机制与降低细胞线粒体膜电位,促进活性氧产生、细胞凋亡,以及非AMPK依赖性的抑制mTOR活化有关。     

阿哌沙班在大鼠体内药动学/药效学研究

目的 考察阿哌沙班大鼠体内药动学并评价其与药效学的相关性。方法 采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定不同时间阿哌沙班血药浓度并绘制血药浓度-时间曲线,同时测定各时间点凝血酶原时间（PT）延长倍数并绘制药效-时间曲线,对药动及药效进行相关性分析。结果 阿哌沙班以2 mg/kg剂量iv给予大鼠,血药浓度时间曲线下面积（AUC_0-∞）、半衰期（t_1/2z）分别为（4 016.07±1 160.46）μg·h/L、（2.95±1.59）h;以10 mg/kg剂量ig给药,AUC_0-∞、t_1/2z、峰浓度（C_max）、达峰时间（t_max）、生物利用度（F）分别为（17 973.48±3 145.30）μg·h/L、（1.52±0.36）h、（4 949.12±615.38）μg/L、（1.00±0.71）h、89.5%。阿哌沙班以10 mg/kg剂量ig给药后0.5~2.0 h可显著延长PT,以各时间点PT延长倍数对血药浓度作图呈良好的线性关系。结论 阿哌沙班大鼠ig给药F高,吸收迅速,延长PT的效应与血药浓度呈现良好的相关性。     

转基因植物致敏性评价方法研究现状

过敏反应又称变态反应 (ａｌｌｅｒｇｙ) ,是指人体接触特异性抗原后由于过度的免疫保护而导致生理功能紊乱和组织损伤的反应。流行病学调查显示 ,随着工业化的发展过敏性疾病在全球范围内有明显的增加趋势 ,并成为发达国家和发展中国家面临的一项重要的健康问题[1,2 ] 。食物变态反应是在各种外源性过敏性中最为常见的一种。许多天然的植物含有的致敏原是影响人类食用的重要因素 ,而转基因植物的基因来源更为广泛 ,所以是否会引入致敏基因增强植物的致敏性问题受到社会的普遍关注[3 ] 。目前 ,转基因植物的应用刚刚开始 ,还未发现转基因植…     

柴胡对大鼠实验性肝纤维化的预防作用

目的研究中药柴胡对肝纤维化的预防作用。方法采用四氯化碳(CCL4)诱发大鼠肝损伤,辅以高脂、低蛋白饲料和一定浓度乙醇饮料,复制肝纤维化模型,柴胡预防给药,观察其对大鼠血清及肝组织生化指标的影响。结果柴胡预防给药可显著降低四氯化碳所致慢性肝损伤大鼠血清ALT、AST和肝组织MDA、HyP,提高肝组织SOD活性。病理组织学观察显示,柴胡可使肝组织变性、坏死程度减轻。结论柴胡能预防四氯化碳致大鼠肝纤维化的发生与发展。     

柴胡对小鼠肝再生及胆汁分泌作用的研究

目的:研究中药柴胡对小鼠肝再生及胆汁分泌作用的影响.方法:小鼠部分肝切除术后给药,3天后摘取肝、脾称重,计算相对肝重表示肝再生能力.正常小鼠给药7天后,结扎总胆管,6h后摘除胆囊前、后两次称重,计算小鼠胆汁分泌量.结果:柴胡大剂量组对部分肝切除小鼠肝再生有显著促进作用(P＜0.01),柴胡大、中剂量组可显著增加小鼠胆汁分泌量(P＜0.01).结论:柴胡具有一定保肝利胆作用.     

柴胡乳剂对小鼠免疫功能的影响

目的研究中药柴胡乳剂对小鼠免疫功能的影响。方法分别用碳粒廓清法、溶血素测定法和2,4二硝基氯苯诱导DTH反应法测定柴胡乳剂对正常小鼠非特异性免疫及环磷酰胺免疫功能低下小鼠体液免疫、细胞免疫的影响。结果与正常对照组比,柴胡乳剂组小鼠的碳粒廓清指数明显提高;柴胡乳剂能明显提高环磷酰胺免疫功能低下小鼠血清溶血素含量,增加DTH反应小鼠的耳肿胀度。结论柴胡乳剂可以增强正常小鼠及Cy所致免疫功能低下小鼠的免疫功能。     

培养板悬滴法三维细胞培养模型建立及细胞活力检测方法比较

目的 采用普通48孔平底培养板结合悬滴培养法建立人结肠癌HT29细胞的三维培养模型,并通过比较选择适合三维培养的细胞活力检测方法。方法 以237.5、316.4、421.8、562.5、750.0、1 000.0/μL、每孔10 μL的接种量接种HT29细胞于48孔平底培养板底面形成液滴,倒置培养2 d形成细胞球,补充培养液后常规培养3 d,通过倒置显微镜测量细胞球体积;采用酸性磷酸酶法（APH）、MTT法及CCK-8法（直接测定及消化后测定）测定细胞活力,比较不同检测方法的优劣。结果 HT29细胞以237.5~1 000.0/μL、每孔10 μL悬滴培养能形成较为规则的细胞球,237.5~750.0/μL细胞球体积与接种量呈良好的线性关系;APH法A值随细胞接种量增加而增大;MTT及CCK-8未经消化直接测定组A值随细胞接种量增大增加缓慢,消化后测定的A值-细胞接种量曲线与APH法相似,但细胞球消化操作复杂,且对细胞活力造成损伤。结论 采用48孔培养板悬滴法建立三维细胞培养模型,并结合APH法进行细胞活力检测,经济、准确、便于操作。     

柴胡对小鼠肝再生及胆汁分泌作用的研究

目的：研究中药柴胡对小鼠肝再生及胆汁分泌作用的影响.方法：小鼠部分肝切除术后给药,3天后摘取肝、脾称重,计算相对肝重表示肝再生能力.正常小鼠给药7天后,结扎总胆管,6h后摘除胆囊前、后两次称重,计算小鼠胆汁分泌量.结果：柴胡大剂量组对部分肝切除小鼠肝再生有显著促进作用（P＜0.01）,柴胡大、中剂量组可显著增加小鼠胆汁分泌量（P＜0.01）.结论：柴胡具有一定保肝利胆作用.     

作用模式在化学品致癌性风险评估中的应用

致癌性是化学品健康效应风险评估的重要方面.化学品致癌性的人类外推的不确定性问题一直是争论的焦点,这也推动着致癌性风险评估方法的不断研究和探索,其中致癌的作用模式(Mode of Action,MOA)评价方法在近年发展较快,已被许多国家和组织所认可.