靶向表皮生长因子受体shRNA质粒表达载体的构建和鉴定

目的构建靶向表皮生长因子受体（EGFR）的短发卡状RNA（shRNA）质粒表达载体并进行鉴定。方法设计两个小分子干扰RNA（siRNA）序列，体外合成DNA模板引物，与Pgenesil-1质粒构建成编码shRNA的表达载体，进行酶切鉴定和测序，再转染人大肠癌LoVo细胞，进行荧光摄像和G418抗性筛选。结果构建的质粒表达载体完全符合设计要求，转染成功的细胞在荧光显微镜下显示为绿色，G418可以筛选出阳性克隆。结论成功构建了编码EGFR—shRNA的质粒表达载体，并可以进行稳定筛选。     

胃复春片联合复方丙谷胺西咪替丁慢性萎缩性胃炎的临床研究

目的观察胃复春片联合复方丙谷胺西咪替丁片治疗慢性萎缩性胃炎的临床疗效。方法选取2017年4月—2018年10月在三峡大学第二人民医院进行治疗的慢性萎缩性胃炎患者98例作为研究对象,将所有患者采用数字表法随机分为对照组和治疗组,每组各49例。对照组患者口服复方丙谷胺西咪替丁片,2片/次,3次/d。治疗组在对照组治疗的基础上口服胃复春片,4片/次,3次/d。所有患者均治疗4个月。观察两组患者的临床疗效,比较两组治疗前后的临床症状积分和血清学指标。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为81.63%、93.88%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组胃刺痛、口干口苦、胃脘胀满、倦怠乏力和嗳气反酸评分均显著降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05、0.01);且治疗后治疗组临床症状积分显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者胃泌素(GAS)明显下降,降钙素基因相关肽(CGRP)、血管内皮生长因子(VEGF)和一氧化氮(NO)水平均显著上升,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05、0.01);且治疗后治疗组血清学指标显著优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论胃复春片联合复方丙谷胺西咪替丁片治疗慢性萎缩性胃炎具有较好的临床疗效,可明显改善患者临床症状和血清学指标,具有一定的临床推广应用价值。     

腹股沟直疝突入阴囊12例报道

目的探讨腹股沟直疝突入阴囊的可能原因及其手术修补方法。方法回顾性分析笔者所在医院2005年6月至2013年6月期间收治的35：3例次腹股沟直疝患者的临床资料。结果353例次腹股沟直疝患者,发生疝囊突入阴囊12例次,发生率为3．4％。与未突入阴囊组比较,突入阴囊组患者的年龄大、病程长、疝环口及疝囊大,且多伴有慢性支气管炎、便秘等导致慢性腹内压增高的疾患。12例次中采用“疝环充填＋平片”修补术1例次,其余11例次均采用腹膜前修补术。术后随访6～60个月,平均37个月,无复发病例。结论腹股沟直疝在少数情况下可以突入阴囊,宜选择腹膜前间隙疝无张力修补术。     

肠道菌群移植在结直肠癌治疗中的应用进展

结直肠癌（colorectal cancer，CRC）是最常见的消化系统肿瘤之一，常见治疗方法包括外科手术、放疗、化疗、免疫治疗及靶向治疗等。经上述方法治疗的CRC患者，肠道菌群会发生变化，同时也会出现骨髓抑制、消化道反应等不良反应。近年来，肠道菌群移植（faecal microbiota transplantation，FMT）逐步应用于CRC治疗中。本文对FMT在CRC治疗中的应用进展进行综述。     

RNA干扰靶向抑制表皮生长因子受体表达对大肠癌细胞增殖的影响

目的观察RNA干扰（RN加）技术能否有效抑制大肠癌LoVo细胞株表皮生长因子受体（EGFR）的表达以及对细胞增殖的影响。方法构建质粒表达载体pU6-EGFR-shRNA-1和pU6-EGFR-shRNA-2；脂质体瞬时转染后24、48、72、96、144h实时荧光定量PCR（Real Time PCR）和Western blot检测EGFR表达，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡，并绘制细胞生长曲线；分5组：A组：Lov0细胞组；B组：Lipofectamine2000组；C组：对照载体HK组；D组：pU6-EGFR-shRNA-1组；E组：pU6-EGFR-shRNA-2组。结果D组E组细胞转染shRNA后mRNA和蛋白表达降低，G0～G1期细胞增加，S期细胞减少，细胞凋亡率增加，对数生长期延迟，以48h效果最显著，和A组B组C组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；但随着时间的推移其干扰作用降低。结论两条EGFR-shRNA均可有效抑制大肠癌LoVo细胞EGFR表达，阻滞更多的细胞位于Go～G1期，促进细胞凋亡而抑制细胞增殖。     

全程护理干预应用于电子肠镜检查中的效果评价

目的 通过电子肠镜在健康体检中的应用情况,探讨全程护理干预在电子肠镜检查中的应用效果.方法 将2010年8月至2011年8月来我院初次接受肛肠体检的2000名单位职工及离退休人员随机分为A、B2组各10000人.A组接受电子肠镜检查,不接受护理干预,B组在接受电子肠镜检查全程中有针对性地给予适当的护理干预.对2组受检人员的生理指标、术中不适程度和护理干预前后SAS评分进行比较,评价电子肠镜检查过程中护理干预对检查效果的影响.结果 B组生理指标、心理指标、插入电子肠镜时间以及术中不适程度等指标均明显优于A组.结论 电子肠镜检查是一种简便、准确的方法,全程护理干预可有效减轻肠镜检查者的痛苦,保证检查顺利完成.     

腹腔镜TME联合ISR对低位直肠癌的疗效及对患者控便功能的影响

目的探讨腹腔镜下全直肠系膜切除术（TME）联合经肛门内括约肌间切除术（ISR）对低位直肠癌的治疗效果及肛门控便功能的影响。 方法选取宜昌市第二人民医院手术治疗的低位直肠癌患者159例,收集时间为2014年1月至2017年1月,根据手术方式不同分为腹腔镜组69例（腹腔镜下TME＋ISR手术）、开腹组90例（采用传统开腹手术实施TME＋ISR手术治疗）,对比两组的手术相关指标及术后肛门控便功能。 结果腹腔镜组的手术时间、清扫淋巴结数目与开腹组比较差异均无统计学意义（t=1.209,1.585;P<0.05）;腹腔镜组患者的手术出血量、肛门排气时间及住院时间均小于开腹组,差异均有统计学意义（t=13.834,5.930,6.556;P<0.05）;腹腔镜组术后肛门控便功能显著的优于开腹组,差异具有统计学意义（Z=-2.183,P=0.029）;术前,两组患者的肛管收缩压（t=1.381,P=0.397）、肛管最大收缩时间（t=1.047,P=0.297）及肛管静息压（t=0.483,P=0.495）差异均无统计学意义;术后3个月,腹腔镜组患者的肛管收缩压、肛管最大收缩时间及肛管静息压显著高于开腹组,差异均有统计学意义（t=3.571,5.188,3.448;P<0.05）。腹腔镜组患者手术并发症率为7.25%,显著低于开腹组患者的17.78%（χ²=4.003,P=0.045）。 结论腹腔镜下TME联合ISR对低位直肠癌的治疗效果良好,并且具有创伤小、术后患者肛门功能恢复好的优点。     

腹膜后肝脏下阑尾炎并Meckel憩室炎1例报告

正临床上时有阑尾解剖位置变异,其中肝下阑尾异位较常见,目前认为其原因为肠旋转过程中盲肠下降不够而停留于右上腹肝下。如果盲肠与阑尾关系出现变异,可有腹膜后或壁内阑尾。由于此类阑尾变异常提示胚胎发育异常,有时可合并Meckel憩室等其他先天畸形。宜昌市第二人民医院收治1例腹膜后肝脏下阑尾炎并Meckel憩室炎病例。现报告如下。     

功能性便秘的诊治进展

功能性便秘（FC）是临床常见病、多发病,严重影响人类身心健康。本文针对FC的最新诊治进展进行了综述,主要包括FC的确切病因及发病机制尚未明确,其诊断主要依赖于患者的症状,同时还需排除肠道及全身器质性疾病所导致的便秘;FC的临床检查方法主要有结肠传输试验、肛门直肠测压、球囊逼出试验、排粪造影、动态磁共振排粪造影等;FC的主要治疗手段有一般治疗、药物治疗、生物反馈治疗、中医治疗、心理治疗、手术治疗等,但目前仍依赖于药物治疗,外科手术仅适用于少数症状非常严重、内科治疗无效的患者,且外科手术治疗需严格把握适应证,根据病因采用个体化手术方式,术后并发症多,远期效果不确切;同时介绍了近年来一些新兴的FC治疗手段逐渐应用于临床,如骶神经调节术、粪菌移植术等,亦取得一定的临床效果。旨在为FC今后的治疗提供新思路。     

双位点小干扰RNA靶向抑制表皮生长因子受体促大肠癌细胞凋亡和5-氟尿嘧啶化疗增效的实验研究

为观察针对单位点与双位点的RNA干扰技术抑制大肠癌LoVo细胞表皮生长因子受体（EGFR）的表达，诱导细胞凋亡以及对5-氟尿嘧啶（5-Fu）敏感性的差异。构建质粒表达载体pU6-EGFR-shRNA-1和pU6-EGFR-shRNA-2，脂质体转染人大肠癌LoVo细胞，G418筛选4周，分5组：1组为LoVo细胞，2组为对照质粒载体HK，3组为pU6-EGFR-shRNA-1，4组为pU6-EGFR-shRNA-2，5组为pU6-EGFR-shRNA-1和pU6-EGFR-shRNA-2各半量，实时荧光定量PCR和Western blot检测mRNA和蛋白的表达，流式细胞仪检测细胞凋亡率，细胞增殖分析试剂CCK-8（Cell CountingKit-8）测定5-FU不同浓度和时间对LoVo细胞的抑制率和半数抑制浓度（IC50）。