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目的:制备酪氨酸激酶样孤儿受体1(tyrosine?kinase?like orphan receptor1,ROR1)的全分子抗体(ROR1?IgG1)及其与东亚钳蝎镇痛抗肿瘤多肽的融合蛋白的全分子抗体(fusion protein of ROR1 and Buthus martensii Karsch analgesic anti?tumor polypeptide IgG1,IgG1?AGAP),检测ROR1?IgG1和IgG1?AGAP对卵巢癌细胞生物学特性的影响,探讨ROR1在卵巢癌中的作用机制。方法:以本实验室筛选并保存的ROR1Fab载体为模板,构建ROR1?IgG1和IgG1?AGAP真核表达载体,并转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO?S),收集上清并纯化。利用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、Biacore X100、免疫荧光、流式细胞术(fluorescence?activated cell sorting,FACS)等评估IgG1?AGAP和 ROR1? IgG1的免疫学活性。通过CCK?8法、划痕实验、Transwell侵袭实验等比较两者对卵巢癌细胞HO8910生物学特性的影响。用蛋白质印迹法(Western blot)检测上皮细胞?间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关标志物的表达,评估ROR1?IgG1和IgG1?AGAP对卵巢癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:成功制备出ROR1?IgG1和IgG1?AGAP,且能够与ROR1蛋白特异性结合;IgG1?AGAP与ROR1?IgG1均可抑制ROR1阳性卵巢癌细胞HO8910的增殖、迁移、侵袭,且IgG1?AGAP组的抑制作用显著高于ROR1?IgG1组,而未观察到对ROR1阴性人正常卵巢上皮细胞IOSE386的抑制作用。Western blot结果表明,在空白对照组、ROR1?IgG1组和IgG1?AGAP组中,Snail的表达量呈现递减趋势,而E?cadherin表达量递增,提示 ROR1?IgG1和IgG1?AGAP可通过调控 Snail和E?cadherin而抑制HO8910细胞发生 EMT,进而抑制其迁移和侵袭能力。结论:IgG1?AGAP可有效靶向表达ROR1的卵巢癌细胞,并具有显著的抗肿瘤活性,IgG1?AGAP可作为ROR1阳性肿瘤患者的潜在候选药物。 相似文献
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目的:根据妇产科学专业的临床教学特点及其在高等医学教育中的重要地位,对翻转课堂和临床思维训练相互渗透这种新型医学教学模式进行初步探索和实践。方法:在本院的妇产科教学中构建并实施这种基于“翻转课堂”的医学教学模式,同时在教学过程中对授课教师和学生进行评价、分析和总结。结果:在这种新型医学教学模式实施过程中,充分利用网络教学资源,在课堂上组织引导学生积极有效地思考、讨论并解答问题,拓展了学生临床诊疗思维并深化了临床理论知识。结论:这种新型的教学模式不仅为学生提供临床实践训练的机会,也锻炼了学生的临床整体思维能力,为今后的临床工作和科研打下良好的基础。 相似文献
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目的:制备人源抗c?Met的全分子抗体(c?Met?IgG1)及其与重组东亚钳蝎镇痛抗肿瘤多肽(recombinant analgesic?antitumor peptide,rAGAP)偶联的新型抗体(c?Met?IgG1?rAGAP),分析它们的生物学特性,检测其对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法:以本实验室保存的人源抗c?Met抗体基因为模板,构建c?Met?IgG1?rAGAP真核表达载体并转染真核细胞,表达并纯化抗体偶联物。通过亲和力检测、免疫荧光、流式细胞术等方法,评估c?Met? IgG1和c?Met?IgG1?rAGAP的生物学特性。通过CCK?8、划痕实验、Transwell侵袭实验检测抗体对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果:成功制备出能够与c?Met蛋白特异性结合的c?Met?IgG1和c?Met?IgG1?rAGAP两种抗体;一系列实验证明了c?Met?IgG1和c?Met?IgG1?rAGAP均可抑制c?Met阳性的卵巢癌细胞HO8910的增殖、迁移、侵袭,且c?Met?IgG1?rAGAP对卵巢癌细胞的抑制作用要强于c?Met?IgG1,而在c?Met阴性的IOSE386细胞中并未观察到这些作用。结论:研究结果表明c?Met?IgG1?rAGAP可靶向作用于c?Met阳性的卵巢癌细胞并具有抗肿瘤活性,可为探索卵巢癌的分子靶向治疗奠定研究基础。 相似文献
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