异黄酮对PC-3细胞凋亡的诱导作用

目的 :　通过观察染料木素 (genistein,GS)、大豆甙元 (daidzein,DA)和黄豆黄素(glycitein,GL)对前列腺癌细胞 (PC- 3 )凋亡的影响 ,探讨通过膳食途径预防前列腺癌发生危险性的可行性。方法 :　将 PC- 3细胞在 RPMI1 6 4 0培养液 (含 1 0 %小牛血清 )中采用开放式单层贴壁培养。实验设溶剂对照及三种受试物各三个剂量组 ,采用流式细胞术 ,DNA凋亡片段凝胶电泳和细胞 HE染色法分析三种常见异黄酮类物质对 PC- 3细胞凋亡的影响。结果 :　与对照组相比 ,流式细胞仪分析结果表明 ,5 0μ mol/L GS、75μ mol/L DA和 75μ mol/L GL对 PC- 3细胞处理 72 h,二倍体细胞 (G1期细胞 )相对减少 ,亚二倍体细胞峰 (即细胞凋亡率 )逐渐增多 ,即凋亡细胞比例逐渐增多 ;DNA凋亡片段凝胶电泳和细胞苏木素染色结果也显示 ,三种受试物能够诱导 PC- 3细胞凋亡 ,且这种作用存在剂量 -效应关系。结论 :　异黄酮类化合物染料木素、大豆甙元和黄豆黄素均具有诱导 PC- 3细胞凋亡的作用 ,这一结果提示 ,该类物质是可通过诱导细胞凋亡而发挥其抗肿瘤作用的。     

环境雌激素对卵巢癌细胞PEO-4凋亡的影响

环境中天然存在的或污染的能够模拟或干扰人和动物的内分泌机能的各类化学物统称为环境内分泌干扰物 ,环境雌激素是其中的一大类。已有研究资料表明 ,环境雌激素进入人体后可通过多种途径影响机体内分泌系统的正常功能并导致人体生殖功能障碍、发育行为、生殖障碍及其他与雌激素调节失衡而引发的恶性肿瘤。对动物界来说 ,这类化合物可致动物双性化 ,使雄性动物减少 ,破坏生态平衡。环境雌激素对人类健康和环境生态平衡的影响引起了学术界和公众的极大关注[1,2 ] 。本实验室目前的工作主要是探讨环境雌激素对女性生殖肿瘤的影响 ,以往的研究…     

玉米赤霉烯酮对MCF-7和T47D细胞凋亡的抑制作用

玉米赤霉烯酮(ZEA)是一种霉菌毒素，在奶制品及霉变谷类食物中含量较高。据报道，ZEA在结构上与内源性雌激素有相似之处，通过与雌激素受体结合而模拟雌激素效应，增加女性体内雌激素负荷，与乳腺癌发病率的升高有关。本实验室前一阶段的研究表明，ZEA可模拟雌激素作用，促进雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF-7及T47D细胞增殖，     

视黄酸对胎鼠腭间质细胞周期分布的影响及其作用

目的 探讨全反式视黄酸（atRA）对小鼠胚胎腭间质细胞（MFPM）细胞增殖和细胞周期的影响及其分子生物学作用机制。     

金雀异黄酮对成骨细胞增殖的影响及其可能的分子生物学机制

目的观察金雀异黄酮（GS）对绝经期骨质疏松患者骨膜成骨细胞增殖的影响及其分子生物学机制。方法用噻唑蓝比色法和流式细胞术分别检测GS对成骨细胞增殖活力和细胞周期分布的影响；Western—blot技术分析GS对细胞周期蛋白D和E表达的影响。结果GS可显著提高成骨细胞增殖活力，与溶剂对照组比较，10^-8mol／L、10^-7mol／L和10^-6mol／L GS时，细胞增殖率分别为137％、155％和161％；提高S期和M／G2期细胞分布比例，并伴有G0／G1期细胞比例降低；它莫西芬可抑制10^-7mol／L和10^-6mol／L GS促成骨细胞增殖效应。Western—blot的检测结果显示，10^-8mol／L和10^-7mol／L GS对成骨细胞处理24h，提高细胞周期蛋白D和E蛋白质的表达（P〈0．05）。结论由于雌激素受体拮抗剂它莫西芬可抑制GS对成骨细胞的促增殖作用，表明金雀异黄酮可通过激活雌激素受体途径，表现出雌激素效应，并促进骨组织代谢中的骨形成作用。     

染料木黄酮对骨形成的促进作用研究

目的:用成年人成骨细胞体外培养的方法,观察染料木黄酮(genistein,GS)对骨形成的影响。方法:将生长状态良好的第三代成骨细胞用PBS洗涤后接种于无酚红高糖DMEM培养液中(含5%经活性碳-葡聚糖苷处理的胎牛血清),实验设二甲基亚砜溶剂对照、雌二醇对照(E2)、抗雌激素它莫西芬对照(TAM)及三个GS剂量组,观察指标包括细胞增殖,碱性磷酸酶活性及细胞骨钙蛋白合成量。结果:与溶剂对照组相比,10-8mol/L E2、10-7mol/L GS和10-6mol/L GS对人成骨细胞处理48h,能够明显促进成骨细胞的增殖作用,使细胞骨钙蛋白合成量显著增加,细胞内碱性磷酸酶活性明显提高;同时,GS可保护因雌激素耗尽所造成的成骨细胞内Ⅰ型胶原蛋白降低。10-7mol/L TAM可拮抗GS对成骨细胞所产生的这些生物学效应。结论:GS具有雌激素效应,可模拟E2而刺激骨形成并保护成骨细胞因雌激素缺乏所造成的细胞内Ⅰ型胶原蛋白降低。由于这一效应可被TAM拮抗,此结果提示,GS的促进骨形成作用是通过与雌激素受体结合产生的。     

叶酸和维生素B_(12)联合抗酒精发育毒性的实验研究

目的:研究叶酸(FA)和维生素B12(VB12)联合抗酒精发育毒性的效果。方法:以5g/kg乙醇灌胃孕D6～D15的ICR小鼠建立酒精发育毒性动物模型,于孕D1～D16每天按三个组别分别灌胃FA60mg/kgbw、VB121mg/kg、FA60mg/kgbw+VB121mg/kgbw,设酒精模型组和阴性对照组,所有动物于孕D18剖杀观察。结果:与酒精模型组比较,FA和VB12联合干预组孕期母鼠增重下降现象明显改善,活胎率显著增加,活胎体重、身长、尾长均显著增加,胸骨、枕骨、四肢骨骨化异常发生率显著下降(P<0.01),尾椎骨骨化点数显著增加(P<0.01);FA单独干预组上述发育毒性表现也有一定程度的改善,但不如联合组;VB12单独干预组的预防作用不明显。结论:FA和VB12联合干预对酒精的发育毒性具有预防控制作用。     

基因芯片技术在卫生毒理学中的应用

基因芯片也称之为DNA阵列，或寡核苷酸阵列。基因芯片技术是同时将大量探针分子固定于支持物上后与标记的分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。本就这项技术在毒理学研究和危险评价中的应用作一探讨。     

全反式视黄酸诱发胎鼠腭裂及抑制Smad2磷酸化的作用

目的观察过量全反式视黄酸(atRA)对胎鼠腭发育的影响及其对Smad2磷酸化的调节作用。方法将ICR孕鼠随机分为atRA实验组和溶剂对照组,在11天(查见阴栓为孕0天),分别灌胃给予80mg/(kg·d)atRA或等体积的玉米油溶剂。常规HE组织学染色观察胎鼠上腭发育情况;免疫组化和Western Blot检测突中嵴上皮内pSmad2的表达。结果80mg/(kg·d)atRA可导致90%胎鼠发生腭裂;在腭突融合过程中,中嵴上皮细胞内Smad2被内源性的激活,出现明显磷酸化,在80mg/(kg·d)atRA组,可检测到总Smad,但是不能检测到磷酸化pSmad2的表达。结论孕期过量atRA可导致胎鼠发生腭裂,其致畸作用机制可能与中嵴上皮细胞内Smad2磷酸化被抑制有关。     

铅对仔鼠学习记忆及海马中CTGF表达影响

目的 探讨母体铅染毒对其仔鼠学习记忆海马组织中结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达的影响,为进一步研究铅的神经毒作用机制提供科学依据.方法 采用自由饮水的方式于母鼠孕哺期染毒,染毒剂量为0.3,1,3 g/L,每组10只,用石墨炉原子吸收光谱仪测定仔鼠出生后7,14,21 d时血液和海马组织中铅含量.用RT-PCR和免疫组化方法 分别测定21 d不同剂量组仔鼠海马组织中CTGF mRNA和蛋白的表达.结果 各剂量染铅组血染、海马组织中铅含量与对照组比较,明显升高(P均<0.05),血液和海马组织的铅含量随着日龄的变化有一定的规律性;迷宫实验中,对照组、0.3,1,3 g/L组平均潜伏期分别为(39.13±6.12)(43.22±9.86),(50.85±12.35),(50.85±12.35)s,与对照组比较,0.3 g/L组差异无统计学意义(P>0.05),与1,3 g/L剂量组比较差异有统计学意义(P<0.05);在对照组、0.3,1,3 g/L组仔鼠海马组织中,CTGF mRNA的相对表达量分别为(0.354±0.603),(0.945±0.522),(1.223±0.279),(1.612±0.136);CTGF蛋白表达的灰度值分别为(126.10±32.11),(186.31±36.17),(220.94±31.27),(286.21±31.24);与对照组比,0.3,1,3 g/L组海马中(CTGFmRNA和蛋白表达明显升高(P均>0.05).结论 孕哺期母体铅暴露可使铅在仔鼠体内人蓄积,引起仔鼠学习记忆力功能损害;铅所引起的神经毒性可能通过铅诱导CTGF mRNA和蛋白的高表达,造成神经系统的损害.