CDK4和cyclin D1蛋白在胃癌组织中的表达

目的 探讨胃癌组织中CDK4和cyclin D1蛋白的表达及意义.方法 收集胃癌石蜡标本40例,运用免疫组化法检测CDK4和cyclin D1蛋白的表达情况,分析其与胃癌的组织学类型、TNM分期和淋巴结转移的关系.结果 40例胃癌标本中CDK4和cyclin D1蛋白表达的阳性率分别为65%和55%.CDK4与cyclin D1的表达呈正相关(P＜0.05).CDK4和cyclin D1蛋白的表达与胃癌的病理类型、TNM分期和淋巴结转移均无显著相关性(P＞0.05).结论 CDK4和cyclin D1蛋白在胃癌组织中有较高的表达阳性率,两者具有协同作用,提示可能与胃癌的发生有密切关系.     

SD大鼠MSX-2基因真核表达载体的构建与功能鉴定

目的 构建SD大鼠颅颌面发育相关基因MSX-2与PcDNA 3.1融合的高效真核表达载体,为研究MSX-2基因的功能奠定基础.方法 根据SD大鼠MSX-2基因的核苷酸序列,设计并合成引物,采用PCR技术,扩增编码MSX-2基因,TA克隆到PMD18-T载体上,再亚克隆到真核表达载体PcDNA 3.1的BamHI和Xhol位点.对该重组体进行酶切鉴定,以及测序验证.重组体转染HEK293细胞,RT-PCR和Western blot检测重组MSX-2基因的RNA和蛋白表达情况.结果 重组真核表达载体PcDNA3.1-MSX-2经PCR扩增、酶切鉴定均显示有476bp左右的特异性基因片断,证明MSX-2基因正向插入真核表达载体中;碱基序列的测定证明重组质粒中含有SD大鼠的MSX-2基因序列.重组体转染HEK293细胞,RT-PCR和Western blot可检测到重组MSX-2基因的mRNA和蛋白的特异表达.结论 成功构建SD大鼠MSX-2基因的高效真核表达载体,为进一步研究MSX-2基因的功能及基因治疗奠定了基础.     

同源异型盒基因MSX-2在SD大鼠颅缝闭合过程中的表达

目的研究同源异型盒基因Msx-2在SD大鼠颅缝闭合过程中的表达变化及意义。方法选择出生后1、2、5、8、12、15、18、22、30和45d的SD大鼠，采用免疫组化和Real—time PCR法分别检测颅缝不同位点的MSX-2表达。结果MSX-2表达于SD大鼠发育的颅骨成骨缘、颅缝间质及其下的硬脑膜组织。在后额缝和矢状缝均未闭合期（出生后1～8d），后额缝和矢状缝复合组织中均出现MSX-2少量表达；在活跃的后额缝闭合期（出生后12～22d），后额缝复合组织出现较多MSX-2表达，而矢状缝复合组织无明显的表达增加；在后额缝完全闭合期（出生后30～45d），MSX-2表达在后额缝减弱明显，并持续较低水平，此时矢状缝的表达略高于后额缝。结论同源异型盒基因MSX-2转录主要发生于颅缝闭合活跃阶段，在后额缝和矢状缝复合组织的表达有不同的时间趋势，提示可能参与颅骨发育和颅缝闭合的调控。     

同源异型盒基因MSX-2在SD大鼠颅缝闭合过程中的表达

目的 研究同源异型盒基因Msx-2在SD大鼠颅缝闭合过程中的表达变化及意义.方法 选择出生后1、2、5、8、12、15、18、22、30和45 d的SD大鼠,采用免疫组化和Real-time PCR法分别检测颅缝不同位点的MSX-2表达.结果 MSX-2表达于SD大鼠发育的颅骨成骨缘、颅缝间质及其下的硬脑膜组织.在后额缝和矢状缝均未闭合期(出生后1～8 d),后额缝和矢状缝复合组织中均出现MSX-2少量表达;在活跃的后额缝闭合期(出生后12～22 d),后额缝复合组织出现较多MSX-2表达,而矢状缝复合组织无明显的表达增加;在后额缝完全闭合期(出生后30～45 d),MSX-2表达在后额缝减弱明显,并持续较低水平,此时矢状缝的表达略高于后额缝.结论 同源异型盒基因MSX-2转录主要发生于颅缝闭合活跃阶段,在后额缝和矢状缝复合组织的表达有不同的时间趋势,提示可能参与颅骨发育和颅缝闭合的调控.     

食管鳞状细胞癌中p16基因甲基化及其表达

目的：探讨食管鳞状细胞癌p16／INK4基因启动子区高甲基化和p16、cyclinD1蛋白表达的意义。方法：用甲基化特异性PCR（MSP）法检测p16／INK4基因启动子区的高甲基化，用免疫组织化学方法检测p16、cyclind1蛋白的表达。结果：30例食管鳞状细胞癌中7例p16免疫组织化学阳性，15例cyclinD1阳性，组织学和统计学分析显示p16与cyclinD1的表达呈负相关。4例检出p16／INK4基因启动子区高甲基化，但与p16失表达无统计学意义。结论：（1）在食管鳞状细胞癌可检出p16／INK4基因启动子区的高甲基化，而甲基化不是引起p16失表达的主要原因。（2）p16与cyclinD1的表达呈负相关，提示细胞周期调控因子之间可能存在相互影响表达的反馈机制。     

CDK4和cyclin D1蛋白在胃癌组织中的表达

目的探讨胃癌组织中CDK4和cyclin D1蛋白的表达及意义。方法收集胃癌石蜡标本40例,运用免疫组化法检测CDK4和cyclin D1蛋白的表达情况,分析其与胃癌的组织学类型、TNM分期和淋巴结转移的关系。结果40例胃癌标本中CDK4和cyclin D1蛋白表达的阳性率分别为65%和55%。CDK4与cyclin D1的表达呈正相关（P〈0.05）。CDK4和cyclin D1蛋白的表达与胃癌的病理类型、TNM分期和淋巴结转移均无显著相关性（P〉0.05）。结论CDK4和cyclin D1蛋白在胃癌组织中有较高的表达阳性率,两者具有协同作用,提示可能与胃癌的发生有密切关系。     

超声内镜引导下Trucut肾活检的可行性评价

目的评估超声内镜引导下Trucut穿刺活检(EUS-TCB)对肾脏组织穿刺活检的有效性及安全性。方法将体重为25~30kg的食用猪,经静脉麻醉后行超声内镜检查及EUS-TCB,穿刺获取的组织标本通过大体及组织学检查,观察获取组织条块的状态,测量组织条块的长度,观察组织中完整肾小球的数量。检查结束后进行动物解剖并观察腹腔内出血状况。结果共对3头猪的肾脏穿刺16次,平均每头穿刺5·3次,13次(81%)穿刺成功获得了肾脏组织;所获得的组织条块中,最长达7mm,最短为0·95mm,平均(3·64±1·73)mm;完整的肾小球数共46个(范围0~10个/次),平均每次穿刺获得的肾小球数为(3·5±2·9)个;大体解剖观察腹腔内未见显著的出血现象。结论EUS-TCB可以安全、有效地对肾脏进行穿刺,并获得满意的肾组织用于组织病理学观察。     

石蜡包埋组织的p16基因甲基化特异性PCR技术

目的：以石蜡包埋组织为材料进行DNA甲基化特异性PCR(MSP)检测，研究其可行性。方法：40例食管组织以中性福尔马林固定、包埋、脱蜡、DNA样品制备和亚硫酸盐修饰后进行PCR测定。2例MSP阳性的冰冻甲状腺组织以70％酒精、丙酮和中性福尔马林分别固定及石蜡包埋后，非甲基化引物PCR扩增，比较不同固定剂的MSP效果。结果l石蜡包埋食管组织MSP检出率与文献报道的冰冻组织MSP检出率相同，三种常用方法固定的甲状腺组织均能获得理想的MSP效果。结论：MSP通过选择合适的实验条件，可应用于石蜡包埋组织。     

石蜡包埋组织的p16基因甲基化特异性PCR技术

目的以石蜡包埋组织为材料进行DNA甲基化特异性PCR(MSP)检测,研究其可行性.方法40例食管组织以中性福尔马林固定、包埋、脱蜡、DNA样品制备和亚硫酸盐修饰后进行PCR测定.2例MSP阳性的冰冻甲状腺组织以70%酒精、丙酮和中性福尔马林分别固定及石蜡包埋后,非甲基化引物PCR扩增,比较不同固定剂的MSP效果.结果石蜡包埋食管组织MSP检出率与文献报道的冰冻组织MSP检出率相同,三种常用方法固定的甲状腺组织均能获得理想的MSP效果.结论MSP通过选择合适的实验条件,可应用于石蜡包埋组织.     

子痫前期患者胎盘组织中Notchl、Jaggedl mRNA和蛋白的表达及其意义

子痈前期是妊娠期特有的疾病,严重危及母婴健康.目前,其发病原因和机制仍未阐明,有学者认为,子痫前期是滋养细胞浸润能力不足,导致胎盘血管发育不全、缺血缺氧所致[1].