nm23-H1基因转染对人胆管癌细胞系QBC939体外浸润能力的影响

目的：探讨nm23-H1基因转染对人胆管癌细胞系QBC939体外浸润能力的影响。方法：将含有全长nm23-H1 cDNA的真核表达载体通过脂腩体法转染人胆管癌细胞系。结果：转染成功的QBC939细胞，其nm23-Hl基因的mRNA、蛋白表达明显增加，转染nm23-H1基因的胆管癌细胞体外浸润能力下降，穿越matrigel的细胞数明显低于亲本QBC939细胞，代表浸润能力的IV型胶原酶（MMP-9）分泌量下降。结论：nm23-Hl基因可以抑制胆管癌细胞的体外浸润能力。     

胆管癌组织nm23-H1和层粘素受体表达与淋巴结转移的关系

肿瘤抑制基因nm23-H1的低表达和层粘素受体（Laminin receptor,LN-R)高表达在肿瘤中的作用日益受重视。我们应用SP免疫组织化学方法探讨nm23-H1和LN-R的表达变化与胆管癌组织学类型、分化程度及淋巴结转移之间的关系,报告如下。     

肿瘤转移抑制基因nm23-H1转染对人胆管癌细胞系增殖能力的影响

目的 探讨nm23-H1基因转染对人胆管癌细胞系增殖能力的影响。方法 通过脂质体法将含有全长nm23-H1 cDNA的真核表达载体转染人胆管癌细胞系QBC939,Northern blotring及免疫组织化学观察转染前后细胞内nm23-H1基因的mRNA及蛋白表达情况,噻唑蓝(MTT)比色法检测转染前后细胞体外增殖能力变化,流式细胞仪分析转染前后细胞周期及凋亡改变。结果 转染成功的QBC_(939)-nm23细胞nm23-H1基因的mRNA及蛋白表达明显上升,体外增殖能力下降,G_0/G_1期、G_2/M期、S期比例及凋亡率(％)分别为(70.24±2.05、12.37±0.91、17.39±2.95、9.54±0.78),与亲本QBC_(939)细胞(56.57±0.99、16.00±1.39、27.44±2.09、4.23±1.05)及对照组QBC_(939)-C细胞(56.17±0.82、17.23±0.77、26.60±0.53、3.67±0.49)相比,G_0/G_1期细胞比例明显增加,G_2/M期及S期细胞比例明显下降,凋亡细胞增加(P<0.05)。结论 nm23-H1基因可以抑制体外胆管癌细胞的增殖能力及诱导凋亡。     

腹膜浸润筛选模型体外筛选胆管癌细胞不同转移性亚群

目的　探讨以腹膜为载体用于体外细胞筛选的可行性。方法　利用经处理后的脏层腹膜 ,分离筛选胆管癌细胞不同转移性亚群 ,并以体外侵袭实验验证所筛选出的不同转移性亚群细胞间侵袭能力的差别。结果　以腹膜为筛选介质 ,成功地筛选出胆管癌细胞高、低转移性亚群 ,两亚群细胞间在粘附、迁移能力上均存在着显著的差别 (P <0 0 5 )。结论　腹膜浸润筛选模型用于细胞筛选可行、有效。     

胆管癌细胞层粘连蛋白受体表达下调对蛋白水解酶MMP-2、MMP-9 mRNA表达的影响

研究层粘连蛋白受体（laminin receptor,LNR)反义寡核苷酸硫代修饰片段（AS－OD）对人胆管癌QBC939细胞MMP－2，MMP－9基因表达的调节，应用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法分析12μmol/L浓度的LNR AS－OD在作用72h后对QBC939细胞MMP－2，MMP－9，mRNA表达水平的影响，结果显示，LNR AS－OD能明显抑制人胆管癌细胞表达MMP－2，MMP－9的作用，与正常对照组相比，其MMP－2，MMP－9 mRNA相对丰度分别下降了33．2％，和23．9％（P＜0．05），研究表明，LNR AS－OD是胆管癌细胞表达MMP－2和MMP－9基因的调节剂，能抑制胆管癌细胞MMP－2，MMP－9基因的表达，本研究为预防和治疗胆管癌的侵袭和转移提供了新的途径和方法。     

CD147分子及基质金属蛋白酶-2在胆管癌细胞株中的表达

目的了解CD147及MMP-2在胆管癌细胞株中的表达。方法通过PT-PCR及免疫荧光法分别检测CD147及MMP-2在胆管癌细胞株中的表达。结果在胆管癌细胞株QSC939检测到CD147及MMP-2表达呈阳性。结论CD147及MMP-2在胆管癌细胞株中有丰富的表达。     

拉米夫定预防肝移植术后乙型肝炎病毒再感染的研究

为探讨拉米夫定对预防原位肝移植术后乙型肝炎病毒再感染的作用。对7例乙型肝炎病毒感染相关终末期肝病患者行同种肝移植,5例于肝移植前后予拉米夫定预防乙型肝炎病毒再感染,2例予普通抗病毒药物阿昔洛韦治疗。结果显示：应用拉米夫定组术后均无乙型肝炎病毒再感染,其中3例随访超过6个月,亦未发现有YMDD变异发生;2例未予拉米夫定治疗术后均发生乙型肝炎病毒再感染,提示拉米夫定能有效地预防肝移植术后乙型肝炎病毒再感染。     

层黏素受体下调对蛋白水解酶MMP-2、MMP-9、u-PA蛋白表达的影响

目的研究层黏素受体（LNR）反义硫代磷酸寡核苷酸片段（AsODN）对人胆管癌QBC939细胞基质蛋白水解酶-2（MMP-2）、基质蛋白水解酶-9（MMP-9）以及尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激酶（u—PA）蛋白表达的影响。方法应用Western blotting分析浓度12／μmol／L的LNR AsODN作用48h后，QBC939细胞MMP-2、MMP-9以及u—PA蛋白表达水平。结果LNR AsODN能明显抑制人胆管癌细胞表达MMP-2、MMP-9以及u-PA，与对照组相比，MMP-2、MMP-9、u—PA蛋白表达下降分别为21．8％、16．5％和9．0％（P〈0．05）。结论胆管癌细胞QBC939蛋白水解酶MMP-2、MMP-9以及u—PA基因表达水平与层黏素受体的表达水平明显相关，LNRAsODN表达能够使胆管癌细胞蛋白水解酶基因表达下降，提示层黏素受体在介导胆管癌转移中发挥重要作用。     

拉米夫定在肝移植中应用现况

乙型肝炎病毒 (HBV)相关肝病肝移植围手术期存活率与其他肝病相差无几 ,但复发或再感染后病情进展迅速 ,病死率高[1 ,3 ] 。近年发现有效的预防及治疗复发或再感染可改善肝移植的预后。其中认为拉米夫定(lamivudine,heptodin ,贺普丁 )防治疗效较好[1～ 1 0 ] 。在HBV相关肝病肝移植中 ,移植肝的复发或再感染是面临的重要问题。第三军医大学西南医院 1 999年 5月～2 0 0 2年 4月实施肝移植 56例 ,其中 50例为HBV相关肝病 ,在围手术期及肝移植后均常规长期用拉米夫定 ,迄今尚未发现HBV肝炎复发或再感染病例。今结合实践和近年文献 ,对H…     

层黏素受体下调对蛋白水解酶MMP-2、MMP-9、u-PA蛋白表达的影响

目的研究层黏素受体(LNR)反义硫代磷酸寡核苷酸片段(AsODN)对人胆管癌QBC939细胞基质蛋白水解酶-2(MMP-2)、基质蛋白水解酶-9(MMP-9)以及尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激酶(u-PA)蛋白表达的影响。方法应用Western blotting分析浓度12μmol/L的LNR AsODN作用48h后,QBC939细胞MMP-2、MMP-9以及u-PA蛋白表达水平。结果LNR AsODN能明显抑制人胆管癌细胞表达MMP-2、MMP-9以及u-PA,与对照组相比,MMP-2、MMP-9、u-PA蛋白表达下降分别为21.8%、16.5%和9.0%(P<0.05)。结论胆管癌细胞QBC939蛋白水解酶MMP-2、MMP-9以及u-PA基因表达水平与层黏素受体的表达水平明显相关,LNR AsODN表达能够使胆管癌细胞蛋白水解酶基因表达下降,提示层黏素受体在介导胆管癌转移中发挥重要作用。