甲襞微循环检测在类风湿性关节炎中的应用

甲襞微循环检测是一种非侵入性的、便于操作的微循环形态学检查方法,可以直观显示微循环灌流状况以及微血管损伤情况,因而广泛应用于多种风湿性疾病如雷诺病、系统性硬化症、系统性红斑狼疮以及心脑血管病、糖尿病等的诊治过程.通过观察甲襞微循环形态、流态和袢周三个方面指标,可以对类风湿性关节炎进行早期预测以及疗效判断.本文就甲襞微循环检测在类风湿性关节炎中的应用进行综述.     

痛风患者痛风石形成现状及相关因素分析

目的 了解痛风患者痛风石检出现状,并探讨其形成的相关因素,为痛风患者个性化综合诊疗提供参考。 方法 收集四川省成都市某风湿专科医院2020年4月至2021年2月间的原发性痛风患者508例,调查其饮食行为情况和测量临床指标。痛风石形成相关因素分析采用logistic回归模型,检验水准α=0.05。 结果 508例痛风患者中合并皮下痛风石267例(52.56%),其中男性264例(98.88%),女性3例(1.12%)。单因素分析结果显示,年龄、婚姻状况、痛风病程、高血压、血尿酸、肾小球滤过率、非结合胆红素、总蛋白、血尿素氮、豆类及其制品摄入、坚果类摄入、动物内脏类食物摄入与痛风石形成有关(均P＜0.05)。多因素分析结果显示,乳类及其制品摄入(与＜1次/周相比,≥4次/周:OR=0.253,95%CI:0.065～0.986)、蛋类摄入(与≤2次/周相比,3～5次/周:OR=0.522,95%CI:0.313～0.871)为痛风石形成的保护因素; 痛风病程(与＜1年相比,5～9年:OR=11.106,95%CI:2.263～54.492; ≥10年:OR=40.476,95%CI:8.197～199.876)、血尿酸水平(与＜40.0 mg/L相比,≥100.0 mg/L:OR=5.512,95%CI:1.283～23.674)、豆类及其制品摄入(与≤1次/周相比,≥3次/周:OR=3.078,95%CI:1.260～7.522)、动物内脏类摄入(与＜1次/月相比, 1～3次/月:OR=2.301,95%CI:1.155～4.585; >6次/月:OR=3.364,95%CI:1.239～9.134)为痛风石形成的危险因素。 结论 痛风病程较长且血尿酸水平较高的痛风患者,豆类及其制品、动物内脏类食物摄入频率较高者易形成皮下痛风石。建议痛风患者尽早接受治疗,控制血尿酸水平; 减少动物内脏类、豆类食品摄入,适当增加蛋类、乳类及其制品摄入; 临床医师对痛风患者诊疗时关注其饮食行为情况,帮助患者预防或延缓痛风石形成。     

干细胞样中心记忆性T细胞的研究进展

干细胞样中心记忆性T细胞(Stem Memory T cells,TSCM)属于T细胞的早期分化阶段,是一种具有干细胞自我更新能力和多种分化功能的T细胞亚群,对免疫记忆的维持具有重要作用,也是进一步提高嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)治疗临床疗效的重要细胞亚群。利用TSCM细胞构建的CAR-TSCM细胞,其抗肿瘤作用明显优于CAR-T细胞。但是,TSCM细胞较难获得,且在刺激扩增中易分化为T细胞其他终末亚群,限制了TSCM在肿瘤淋巴细胞治疗中的临床运用。本文重点回顾对TSCM的免疫学特性及近年来的研究进展。     

环黄芪醇联合IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增的影响

目的探究环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)联合细胞因子IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增和CD8~+T细胞亚群中干细胞样中心记忆性T细胞(stem cell-like central memory T cells,T_(SCM))比例的影响,为基于T细胞的肿瘤细胞免疫治疗研究奠定实验基础。方法采集健康产妇脐带血,通过密度梯度离心法分离获得脐带血单个核细胞(umbilical cord blood mononuclear cells,UCBMC),利用CD3/CD28抗体偶联磁珠刺激活化后,采用不同浓度的CAG(0、0.04、0.2、1、5μmol/L)联合IL-7和IL-15连续培养,利用多色流式细胞术分别测定T细胞的增殖程度以及CD8~+T细胞中T_(SCM)比例的变化情况。结果 0.2μmol/L CAG与IL-7和IL-15细胞因子联用组促T细胞扩增作用显著高于其他浓度CAG与细胞因子IL-7和IL-15联用组或单独使用细胞因子IL-7和IL-15组。同时,0.2μmol/L CAG联用IL-7和IL-15组还可以促进CD8~+T中CD197~+CD45RA~+细胞表型的表达,即维持CD8~+T中高比例的T_(SCM)亚群。结论 0.2μmol/L CAG联合IL-7和IL-15可以显著提高活化T细胞扩增能力,并能保持CD8~+T细胞中高比例的T_(SCM)亚群。     

抗-CD3/CD28磁珠活化T细胞的实验研究

目的探究在不同磁珠比例条件下,抗-CD3/CD28磁珠刺激活化T淋巴细胞,对T细胞的增殖和CD8+T细胞亚群中干细胞样中心记忆性T细胞(Stem Central Memory T cells, TSCM)的影响,为T细胞相关奠定实验基础。方法采集健康成年人外周血及脐带血,通过密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC)和脐血单个核细胞(Umbilical Cord Blood Mononuclear Cell,UCBMC),采用不同比例(磁珠比细胞:1:2、1:1、2:1、3:1)的磁珠刺激活化PBMC及UCBMC,诱导培养7d,通过多色流式细胞术检测T细胞的增殖和CD8+细胞亚群中TSCM变化情况。结果 T淋巴细胞采用磁珠刺激活化后,实验组T细胞增殖倍数较空白对照组均明显升高,差异具有统计学意义(P0.05);活化PBMC的实验中,当磁珠与细胞比例为1:2刺激活化7d后,T细胞累积增殖倍数为(9.07±0.04,n=3)均高于1:1、2:1、3:1各组,差异具有统计学意义(P0.05);TSCM亚群比例为(86.74%±0.79,n=3)也均高于1:1、2:1、3:1各组,差异具有统计学意义(P0.05)。活化UCBMC的实验中,当磁珠与细胞比例为3:1刺激活化7d后,T细胞累积增殖倍数为(8.75±0.08,n=3)均高于2:1、1:1、1:2各组,差异具有统计学意义(P0.05);TSCM亚群比例为(95.46±0.16,n=3)亦均高于2:1、1:1、1:2各组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论在PBMC中,采用磁珠与细胞比例为1:2刺激活化时,T细胞增殖状态及细胞亚群中TSCM比例明显优于其他实验组;在UCBMC中,采用磁珠与细胞比例为3:1刺激活化时,T细胞增殖状态及细胞亚群中TSCM比例明显优于其他实验组。实验和临床研究可更根据不同的T淋巴细胞来源,选择最佳的磁珠活化比例。     

HSV-TK/CD20双自杀基因系统慢病毒载体的构建及应用

目的构建同时表达单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)和RQR8膜蛋白双自杀可控开关的Jurkat细胞,使之可通过更昔洛韦药物(GCV)或利妥昔单抗(RTX)实现可控性细胞消除。方法 RQR8膜蛋白小分子含利妥昔单抗识别的模拟表位和抗CD34单抗表位。合成编码RQR8及HSV-TK的基因,构建慢病毒共表达载体pLV-RQR8-T2A-TK;脂质体Lipofectamine3000转染Jurkat细胞,流式荧光抗CD34单抗检测RQR8的表达,通过磁珠筛选获得RQR8~+TK~+Jurkat细胞;分别加入GCV或RTX检测自杀可控开关功能:CCK8法检测加药后细胞增殖情况,Annexin-V/PI检测细胞凋亡情况。结果慢病毒载体pLV-RQR8-T2A-TK酶切片段大约1 670 bp,测序进一步证实外源片段插入正确。慢病毒感染Jurkat细胞,感染率为45.21%,磁珠纯化得到99.4%纯度的RQR8~+TK~+Jurkat。GCV对RQR8~+TK~+Jurkat具有细胞毒性作用,GCV浓度为40μmol/L时,其存活率为(52.11±7.04)%,IC_(50)为20.66μmol/L。80μmol/L GCV作用RQR8~+TK~+Jurkat细胞72 h后凋亡率达(41.28±2.78)%。在血清(含补体)存在情况下,320μg/ml RTX可通过补体介导的细胞杀伤作用杀伤RQR8~+TK~+Jurkat,其存活率为(29.64±4.52)%。结论双自杀可控开关慢病毒载体pLV-RQR8-T2A-TK构建成功,加入GCV或RTX可通过2种不同路径成功杀伤细胞,达到细胞清除目的,提高了安全性,为临床治疗过继免疫不良反应提供多种选择。     

高频联合三维超声对半月板损伤的诊断价值

目的 回顾性分析膝关节半月板损伤患者的高频及三维超声声像图特点,探讨高频联合三维超声对于半月板损伤的诊断价值.方法 本研究回顾性分析2019年1月至2019年11月本院行膝关节高频及三维重建超声检查并经关节镜或手术确诊的46例半月板损伤患者的临床资料,行高频及三维超声检查,包括病变区域位置、范围及损伤程度,比较高频及三维超声的诊断效能.结果 高频联合三维超声诊断半月板损伤46例,诊断准确率为88.5％;高频频联合三维超声诊断半月板撕裂的敏感度为95.8％,特异度为75.0％,准确度为92.3％.结论 高频联合三维超声检查可明显提高超声诊断准确率,更直观了解半月板损伤的部位和程度,能为临床治疗方案的选择和疗效评估提供重要的参考依据.     

针灸疗法治疗类风湿关节炎的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoicl arthritis,RA)是以慢性对称性多关节炎为主要表现的一种全身性疾病.临床针对RA不局限传统的药物治疗,常配合外科手术、中医汤剂、针灸、传统藏药等综合治疗.其中,针灸治疗属于传统中医疗法,临床结合患者的中医体质,选择合适针灸方式和配穴,可缓解RA患者的临床症状.本文就目前研究...