两种新的HCC抗原的特异性

目的：检测两种新的人肝细胞癌(HCC)抗原(编号为HCC-1-8a和HCC-3-13)对HCC的特异性。方法：应用重组克隆表达抗原的血清学技术(SEREX),用异体HCC血清和非HCC血清检测两种新的HCC抗原的特异性。结果：相应的抗体主要见于HCC患者,检测10例HCC血清,阳性反应例数分别为8例及9例;胃癌5例,阳性反应分别为0例及1例;正常人28例各有阳性2例;乳癌10例,无阳性例数。结论：两种新的HCC抗原对HCC有高度特异性,可考虑作为HCC血清学诊断的指标之一。     

链脲佐菌素诱导急性非糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡模型的建立

目的：以非致糖尿病的小剂量链脲佐菌素（STZ）诱导 BABL/ C 小鼠胰岛β细胞发生凋亡,建立小鼠急性损伤胰岛细胞凋亡的模型,明确其诱导胰岛β细胞凋亡的发生规律,为胰岛β细胞凋亡相关研究提供在体模型。方法选取 BABL/ C 小鼠,分别予生理盐水（对照组）及60、80、100 mg/ kg 小剂量 STZ 一次性腹腔注射（实验组）,观察时点分别为干预后6、12和24 h,动态观察指标为血糖、胰腺 HE 染色观察病理改变以及末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP 缺口标记技术（ TUNEL）检测胰岛β细胞凋亡。结果在所有测试时点血糖均在6～11 mmol/ L 范围内波动,未达到糖尿病模型范畴,TUNEL 凋亡检测发现：与对照组相比,实验组各时点的胰岛β细胞凋亡率均明显升高（P ＜0.05）;各实验组均在12 h 时点凋亡率达到最高峰,并且80 mg/ kg 组与60 mg/ kg、100 mg/kg 组相比明显升高（P ＜0.05）。结论非致糖尿病的小剂量 STZ 可成功构建急性非糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡模型,凋亡高峰期在注射后12 h 时点。     

基于耐药特性联合单细胞培养识别肝癌干细胞克隆亚群

目的:基于癌干细胞的耐药特性联合单细胞培养方法识别肝癌干细胞所在的克隆亚群.方法:以BEL-7404细胞系为研究对象,裸鼠体内移植瘤形成实验,并予阿霉素(adriamycin,ADM)8 mg/kg干预,待肿瘤直径为1.5 cm时取移植瘤细胞做原代培养,并在裸鼠体内连续传代4代,并将第4代移植瘤细胞命名为"BEL-7404-ADM-P4",根据成瘤时间检测肝癌干细胞富集情况.联合单细胞培养,取BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4所形成的克隆根据克隆形态分为全克隆、部分克隆、旁克隆,检测BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆的癌干特性,即增殖能力、克隆形成率及悬浮球形成率;取其全克隆、部分克隆、旁克隆做hoechst33342染色,并在共聚焦显微镜下观察其染色情况;根据BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆的增殖能力、克隆形成率及悬浮球形成率以及hoechst33342染色情况识别癌干细胞所在的克隆亚群.结果:裸鼠体内低剂量阿霉素干预,在体内连续成瘤传代过程中,裸鼠皮下移植瘤成瘤率均为100%,且成瘤时间从第一代到第四代均有所缩短,以此达到了肝癌干细胞的初步富集;增殖能力:全克隆增殖速度最快,细胞量最大,部分克隆次之,旁克隆增殖速度最慢,并于第10天开始出现细胞皱缩死亡;克隆形成率:BEL-7404-ADM-P4-H高于BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4-M,差异有统计学意义(P<0.05);悬浮球形成率:仅BEL-7404-H及BEL-7404-ADM-P4-H可形成悬浮球,其余细胞系不形成悬浮球,而BEL-7404-H及BEL-7404-ADM-P4-H悬浮球形成率比较,无统计学意义(P>0.05);BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆hoechst33342染色情况:BEL-7404及BEL-7404-A D M-P4单克隆中全克隆都有极少数不染和低染的细胞存在,但部分克隆、旁克隆全染,且BEL-7404单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆hoechst33342荧光强度均强于BEL-7404-ADM-P4单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆.结论:基于癌干细胞的耐药特性联合单细胞培养方法所形成的克隆亚群中,全克隆含有更高比例的肝癌干细胞.     

人参皂苷Re拮抗肠缺血/再灌注致肺损伤机制中抗炎抗氧化作用研究

目的建立大鼠肠缺血/再灌注(Ⅱ/R)致肺损伤模型,观察人参皂苷Re的抗炎抗氧化作用。方法 32只SPF级雄性SD大鼠(240²60 g)随机分为4组(n=8),假手术组(S组)、肠缺血/再灌注组(Ⅱ/R组,即M组)、Ⅱ/R+人参皂苷Re高剂量组(Re-H组)、Ⅱ/R+人参皂苷Re低剂量组(Re-L组)。建立肠缺血1 h再灌注2 h损伤模型。大鼠再灌注末取腹主动脉血,检测血清中TNF-α、IL-6、IL-10、SOD和MDA水平;取肺组织标本进行病理学检查和湿/干比测定。结果与S组相比,M组肺组织湿/干比明显增加(P<0.01),肺脏损伤明显,血清中IL-6、TNF-α、IL-10和MDA含量显著升高,同时SOD活力下降(P<0.05或P<0.01);与M组比较,Re-H组和Re-L组可显著改善上述变化(P<0.05或P<0.01),肺组织损伤程度减轻。结论人参皂苷Re预处理可通过提高机体抗氧化、抗炎能力对肠缺血/再灌注所致肺损伤起到保护作用。     

牛磺酸拮抗锰诱导体外培养的皮层神经细胞凋亡

目的观察牛磺酸对锰诱导体外培养的皮层神经细胞凋亡的拮抗作用。方法体外皮层神经细胞至最佳生长状态时进行实验。细胞随机分7组,即对照组、染锰组(低、中、高剂量0.2,0.6,1.0mmol/L)、干预组(染低、中、高浓度锰同时分别给予1.5mmol/L牛磺酸干预)。各组处理24h后终止培养,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)及流式细胞术(FCM)定性、定量检测神经细胞凋亡的变化。结果1.TUNEL显示染锰后神经细胞呈现典型的凋亡形态学变化,牛磺酸对中浓度锰有一定的拮抗作用;2.FCM结果表明牛磺酸能拮抗锰诱导的神经细胞凋亡。结论牛磺酸对锰所致体外培养的皮层神经细胞的凋亡有保护作用。     

大鼠急性肾功能衰竭中细胞凋亡的实验观察及其意义

目的:观察在甘油致急性肾功能衰竭大鼠中,肾小管上皮细胞凋亡的变化与发生途径.方法:采用肌注甘油法建立急性肾功能衰竭大鼠模型,分24h与5d两个时点取材检测血浆尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、肾组织脂质过氧化物(LPO),并进行肾组织凋亡细胞流式细胞术检测以及彗星实验.结果:在24h时点,急性肾功能衰竭大鼠BUN、Scr水平均明显升高,彗星实验阳性细胞较正常水平明显升高,第5天,BUN、Scr、肾组织LPO水平基本趋于正常,但肾小管上皮细胞凋亡持续存在,彗星实验阳性细胞依然有维持较高水平的趋势.结论:急性肾衰的损伤功能障碍与修复各阶段细胞凋亡充当不同的角色,其诱导细胞凋亡的机制也可能不同.     

肿瘤干细胞与肿瘤转移

肿瘤干细胞（TSCs）在肿瘤启动作用中的重要性已在造血系统肿瘤中得到证实，最近亦有在实体瘤中的相关报道。TSCs与正常干细胞具相似的生物学特性，这对研究TSCs与肿瘤转移的关系有非常重要意义？文章简要论述TSCs研究现状及TSCs与肿瘤转移两者可能存在的相关性。     

超声监测大鼠失血性休克及再灌注过程肾血流动力学的研究

目的：探讨超声监测大鼠失血性休克及再灌注过程肾血流动力学改变的可行性及可靠性。方法：大鼠失血性休克前、后及再灌注24小时内分别行2DUS、彩色血流速度图(CVl)检查，脉冲多普勒(PW)测量肾动脉收缩期峰值血流速度(Vmax)、舒张末期血流速度(Vmin)、阻力指数(RI)、搏动指数(N)；肾静脉流速。结果：休克后肾皮质回声增强，肾内血流分布减少，皮质血流消失；肾动静脉流速降低，肾动脉RI、PI升高。再灌注后肾内血流增多，皮质出现血流信号，肾血流速度升高，RI、PI下降。结论：超声监测能准确反映大鼠休克过程肾血流动力学改变，可作为无创性监测工具。     

甘油致大鼠急性肾功能衰竭肾小管细胞凋亡的动态实验观察

目的：观察肾小管上皮细胞凋亡在甘油致急性肾功能衰竭大鼠中的变化。方法：采用肌注甘油法复制急性肾功能衰竭大鼠模型，分12、72h与8d时点取材检测检测血浆BUN、SCr、肾组织脂质过氧化物（LPO）以及进行肾组织凋亡细胞TUNEL染色。结果：急性肾功能衰竭大鼠12、72h两时点BUN、SCr、肾组织LPO水平均明显升高，第8d基本恢复正常，但肾小管上皮细胞凋亡持续存在。结论：细胞凋亡以角色转换的方式存在于急性肾衰的损伤功能障碍与修复各个阶段，发挥不同意义的生物学作用。     

血清培养基辅以碱性成纤维细胞生长因子培养扩增小鼠神经干细胞

背景：神经干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞，是研究神经系统的发生、发育、发展规律及其内在的分子生物学、细胞学调控机制的理想载体，在神经系统疾病及损伤的治疗中具有广阔的应用前景。探讨一套较为简便、有效和实用的神经干细胞体外培养体系是其应用的前提和基础。 目的：观察血清培养基并辅以碱性成纤维细胞生长因子对小鼠神经干细胞体外培养的影响。设计：单一样本观察。 单位：右江民族医学院组织学与胚胎学教研室。 材料：2个月龄昆明种小白鼠5只，雌雄不拘。方法：实验于2003-06／2005-05在广西医科大学组织学与胚胎学试验室完成。①采用贴壁培养法，从成年小鼠大脑皮层分离并体外培养成年小鼠大脑皮层细胞，制成细胞悬液后将其置人DMEM／T12（1：1）液（包括体积分数为0．15的胎牛血清，碱性成纤维细胞生长因子20帆，青霉素100u／mL和链霉素100u／mL）培养，获得细胞克隆。②应用免疫组织化学技术检测克隆细胞巢蛋白的表达。 主要观察指标：①培养细胞形态学观察。②培养细胞苏木精-伊红染色观察结果。㈣神经干细胞鉴定。 结果：④培养细胞形态学观察：细胞接种后，绝大多数细胞在12h内附壁，细胞变扁平，接种后第3天，细胞开始生长，细胞数量增多，接种后第5天时生长成为数10个细胞到数百个细胞克隆，到第七八天，细胞占据瓶底80％～90％。经传代后仍成黏附生长，细胞形态规则，边界清楚。②培养细胞苏木精-伊红染色观察结果：可见细胞圆形或椭圆形，胞质少呈嗜酸性，细胞核大而圆，单个居中，着色深。③神经干细胞鉴定：免疫荧光检测显示，细胞巢蛋白抗原呈阳性。 结论：分离的小鼠大脑皮层细胞在血清培养基并辅以碱性成纤维细胞生长因子的培养条件下，具有很强的增殖能力，传代后表达巢蛋白，依然具有神经干细胞的特征。