提高尿激酶原治疗急性心肌梗死疗效研究

尿激酶原是新一代特异性溶栓药。为进一步提高该药的安全性和有效性,本文从使用剂量、给药方案、与其他溶栓药伍用,及给药途径等方面提出了意见,供临床医生使用中参考。     

u-PA在细胞培养上清中的稳定性

尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u_PA)主要是由无酶催化活性的单链酶原 (scu_PA或pro_UK)和具有激活纤溶酶原 (plas minogen)活性的双链尿激酶 (tcu_PA或UK)组成。scu_PA只激活吸附在纤维蛋白表面的纤溶酶原 ,具有选择性溶栓作用[1] 。scu_PA由 411个氨基酸组成 ,可被体内纤溶酶或激肽释放酶催化在Lys15 8～Ile15 9之间的肽键水解断裂转换为双链尿激酶。我所已构建了表达水平为 5 μg/ (10 6细胞·d)的基因重组CHO工程细胞株用于生产u_PA[2 ] ,并已放大至30L培养规模 ,采用多孔微载体无血清连续培养工艺 ,培养上清中u_PA的最高浓度可达 …     

不同灭菌方法对脱乙酰几丁质性质的影响

实验表明，经１１５℃压力蒸汽灭菌后，脱乙酰几丁质的分子量、粘度及其与海藻酸钠交联形成的膜强度均变化较小；经γ射线照射或环氧乙烷灭菌者则变化较大。     

人β干扰素参考品的制备及其热稳定性的观察

在干扰素的研究中,由于测定方法不一,影响因素很多,给各实验室的理论研究和临床应用研究的结果的分析与比较带来了极大的困难。我们在人β干扰素(HuIFN-β)的研制过程中,也深感建立一种该类型的干扰素参考品的必要性。为满足本实验室研究工作及临床试用的需要,我们采用真空低温冷冻干燥的方法制备了一批人β干扰素参考品,现将其活性标化,无菌检查,以及热稳定性观察的结果报告如下。材料和方法粗制人β干扰素:采用新城鸡瘟病毒(NDV,B_1株)和人胚肌皮细胞(SM_2株)生产制备,经美国国立卫生研究院(NIH)提供的人α和β干扰素国际标准抗血清鉴定,其β     

用微载体高密度培养CHO工程细胞

rβ-13 CHO 工程细胞在 MC-1型微载体上可良好地附着和增殖,当载体浓度为10mg/ml 时,细胞密度可高达4.5×10~6细胞/ml。由于该细胞具有可自动从载体解离,并再附着和增殖于新载体表面的特性,故采用直接加入新鲜载体和培养基的方法,即可方便地扩大生产。这些结果表明用微载体悬浮培养系统生产 CHO 工程细胞产品将是可行的。     

重组人尿型纤溶酶原激活剂规模生产中纯化过程的质量控制

尿型纤溶酶原激活剂(u-PA)是一种高效、出血副作用和再阻率低的溶栓制剂,由于在溶液中不稳定,在纤溶酶、激肽释放酶、胰酶及理化因素影响下,容易从158Lye-159Ile处断裂成双链,故u-PA有包括单链和双链两种形态.u-PA的国外临床用量最大剂量可达80 mg,因此对产品的质量提出更高的要求.为了保证产品的最终质量,必须在生产过程中加以严格控制,以确保产品的安全有效.我们对u-PA中试生产中纯化阶段的质量控制进行了研究,包括:蛋白含量、活性测定、活性回收率及比活计算、单双链比例测定、纯度分析几项指标的控制,以保证产品的质量.     

鼠干扰素微量板染色测定法

前文中我们已介绍了用试管染色法测定鼠干扰素(IFN)的方法,本文将进一步介绍在此基础上改进了的微量板染色测定法。该法与Rubinstein(1981)报道的方法大致相同,只是我们进一步用比色和计算器计算,使获得的结果更客观、确切。材料与方法细胞:测定用鼠L_(929)细胞(由中国医学科学院病毒研究所候云德教授赠给),一般均用培养两天后,用0.2％胰酶(1％胰酶1份     

提高转基因动物基因表达水平的途径

本文对转基因动物的研究特点以及近年来在转基因动物提高表达水平方面的研究做以综述。阐述了转基因的整合、MAR、共注射与同源重组、内台子以及RNA的剪接对转基因动物基因表达的影响。     

MTT比色法在微囊培养动物细胞计数中的应用

观察了3种已报道的脱色液在MTT比色法中的使用效果,实验证明它们均存在一定的局限性,不适于微囊细胞的脱色。改良的脱色液配方为N,N-二甲基甲酰胺-Triton-水(DTW),它不仅可迅速完成脱色,呈色稳定,不引起蛋白质沉淀,且无需破囊和洗涤细胞,从而较好地解决了微囊固定化细胞计数的难题。     

HIGH DENSITY CULTIVATION OF GENETICALLY-ENGINEERED CHO CELL LINES WITH MICROCARRIER CULTURE SYSTEMS

ＨＩＧＨＤＥＮＳＩＴＹＣＵＬＴＩＶＡＴＩＯＮＯＦＧＥＮＥＴＩＣＡＬＬＹ－ＥＮＧＩＮＥＥＲＥＤＣＨＯＣＥＬＬＬＩＮＥＳＷＩＴＨＭＩＣＲＯＣＡＲＲＩＥＲＣＵＬＴＵＲＥＳＹＳＴＥＭＳ￥ＸｉａｏＣｈｅｎｇｚｕ；（肖成祖）；ＨｕａｎｇＺｉｃａｉ（黄子才）；Ｌｉ...