日本血吸虫Mf2基因的亚克隆表达与免疫保护效果研究

目的 在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫(Schistosoma japonicum，Sj）Mf2蛋白，并对表达产物进行免疫保护效果测定。方法 将SjMf2基因亚克隆至pCEX—5X—3原核表达载体，以GST融合蛋白的形式在ER2688中表达，表达产物免疫小鼠，免疫用抗原剂量为50μg/次.鼠，对照组分别注射FCA或PBS，在0、2、6周共免疫3次。第3次免疫后2周进行攻击感染，42d后杀鼠，观察减虫和减卵效果。结果 在IPTG诱导下，表达载体中的SjGST基因与重组的SjMf2基因在大肠杆菌中得以高效表达，形成了SjGST—Mf2融合蛋白，用这种融合蛋白免疫小鼠，诱导产生了27．75％的减虫率和45．7％的每雌肝组织虫卵减少率(LEPF)。结论 SjMf2基因亚克隆至pGEX—5X—3载体后可在大肠杆菌中高效表达，表达产物能诱导小鼠产生一定程度的抗日本血吸虫保护性免疫力。     

巴洛沙星的合成

目的合成巴洛沙星(Balofloxacin),并进行工艺优化。方法以1-环丙基-6,7-二氟-8-甲氧基-4-氧代-1,4二氢喹啉-3-羧酸乙酯为起始原料,经保护、缩合、水解等反应制得抗菌药巴洛沙星。结果合成目标化合物,总收率为54.9%。结论本工艺反应条件平和,成本较低,收率较高。     

女性生殖道假丝酵母菌感染的菌群分布及药敏分析

目的探讨女性生殖道假丝酵母菌感染的菌群分布及其对几种常见抗真菌药物的敏感性。方法应用真菌显色培养基和ApI-20CAUX鉴定到种,药物敏感性试验采用ROSCO纸片扩散法。结果99例阳性标本中,分离出白色假丝酵母菌66株(66.7%),光滑假丝酵母菌株20株(20.2%)、热带假丝酵母菌6株(6.1%)、克柔假丝酵母菌3株(3.0%)、其它假丝酵母菌4株(4.0%)。99株假丝酵母菌对两性霉素B、制霉菌素、氟康唑、酮康唑和伊曲康唑的敏感性分别为100.0%(99/99)、100.0%(99/99)、82.8%(82/99)、85.9%(85/99)和68.7%(68/99)。结论白色假丝酵母菌仍是主要致病菌,但非白色假丝酵母菌所占的比例呈上升趋势,分离株对唑类药物存在不同程度耐药情况。     

日本血吸虫雌虫抗原模拟表位的筛选及免疫保护性

目的　筛选日本血吸虫雌虫抗原的模拟表位 ,并探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。　方法　用日本血吸虫雌虫免疫兔血清IgG作配体对噬菌体随机 12肽库进行 3轮亲和筛选 ,随机挑取 18个噬菌体克隆用Dot ELISA检测其特异性 ,并对其中的 4个阳性克隆进行测序。分别在 0、2、4周用混合噬菌体克隆免疫小鼠 3次 ,第 6周每鼠经腹部感染 40条日本血吸虫尾蚴 ,42d后剖杀冲虫 ,计数虫数和每克肝卵数。　结果　经 3轮筛选 ,特异性噬菌体富集了 2 0 0多倍 ,随机挑取的 18个克隆经Dot ELISA鉴定有 17个能与雌虫抗原免疫兔血清呈阳性反应。DNA自动测序的 4个序列与GenBank的已知序列均无同源性。与对照组相比 ,混合噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率为 2 6.5 7% ,减卵率为 65 .3 4%。　结论　采用噬菌体随机肽库技术可获得模拟日本血吸虫雌虫特异性抗原表位的短肽分子 ,这些短肽分子能诱导一定程度的保护性免疫。     

从乳腺分泌物中检出路邓葡萄球菌

我们从乳腺分泌物中分离出路邓葡萄球菌(S.lugdunen-sis),报道如下。1病例摘要患者,女,25岁,因剖宫产术后第8d发热、畏寒、乳房胀痛1h余入院。患者入院后查体T39.2℃,心肺听诊未及异常,双乳房饱满,压痛明显,右乳外侧可扪及5cm×4cm×2cm大小硬块。血常规WBC13.59×109/L,N90.3%。取乳腺分泌物进行培养,分离出路邓葡萄球菌。根据该菌药敏试验结果,经抗炎治疗后,患者畏寒、发热、乳房胀痛、硬结消失,痊愈出院。2细菌学鉴定及药敏试验2.1培养特性标本接种于血平板及巧克力平板上,置5%~10%的CO2中35℃温育24h,血平板上生长桔黄色菌落,菌落平…     

提高血吸虫疫苗保护性效果的研究进展

对血吸虫感染产生的特异性免疫应答表现为非消除性免疫。当前 ,血吸虫疫苗的研究仍是世界性难题。迄今为止 ,还没有一种理想的疫苗可用于免疫预防以阻断血吸虫病的传播。基于国内外学者近几年在血吸虫病疫苗研究领域中取得的成就 ,本文在核酸疫苗、甘露糖化抗原、鸡尾酒式疫苗、免疫佐剂选用及改变免疫微环境等方面 ,就如何提高血吸虫病疫苗保护效果作一综述。     

贵州特色药材苦参人工栽培常见病虫害发生规律及防治措施

目的明确贵州省苦参人工栽培中常见的病虫害类型和发生规律,为科学防治提供依据。方法实地调查省内苦参的主要栽培区域病虫害发生情况。结果苦参常见的的侵染性病害主要有5种类型,非侵染性病害主要由4个方面因素引起,常见的虫害有3种类型,不同类型病虫害的防治措施不同。结论调查结果对于有效解决贵州省苦参人工栽培常见病虫害的防治,保证苦参原材料的质量,推动贵州省苦参产业规模化发展具有一定意义。     

女童阴道分泌物的病原学特征分析

目的:探讨女童阴道异常分泌物的病原学特征。方法:对165例女童阴道异常分泌物进行细菌培养、支原体培养和衣原体抗原的检测。结果:165例患者中,有108例分泌物中共检出病原体178株,其中支原体31例,衣原体7例,淋球菌11例,念珠菌13例,其它细菌116例。结论:对于出现阴道异常分泌物的女童必须进行病原体检测,以尽早治疗。     

泌尿生殖道支原体液体培养法与固体培养法结果比较的研究

目的 比较液体培养与固体培养方法对泌尿生殖道支原体检测的可靠性,从而提高支原体检测的准确率.方法 采用液体培养基和固体A7琼脂培养基平行检测106例宫颈分泌物样本的Uu和Mh.结果 对Uu检测,液体培养法阳性56例;固体培养法阳性49例;对Mh检测,液体培养法阳性24例,固体培养法阳性17例,两种培养法培养Uu及Mh的阳性率均没有显著性差异(P>0.05).液体培养法灵敏度较高而特异度较低,固体培养法则正好相反,特异性高而灵敏度低.结论 在泌尿生殖道支原体检测中,实验室应尽可能采用两种培养方法平行检测,以弥补两种方法各自的不足,提高检测的准确度.     

Sj31与鼠IFN-γ基因融合DNA疫苗免疫保护效果的研究

目的构建表达mIFN-γ与Sj31抗原融合蛋白的DNA疫苗,并探讨其免疫保护作用。方法在Sj31基因上游引物与mIFN-γ下游引物的5’分别设计与克隆载体相匹配的酶切位点,在mIFN-γ上游引物与Sj31基因下游引物的5’设计相同的酶切位点。分别进行PCR扩增,再通过引物的5’端相同的酶切位点进行2个PCR产物的酶切与连接,以连接产物为模板,应用Sj31的上游引物和mIFN-γ下游引物进行PCR扩增,将此次PCR产物经常规方法克隆入载体pcDNA3.0(简称为pc),构建成多价DNA疫苗pc-Sj31-mIFN-γ。对重组质粒鉴定后,大量制备纯化质粒免疫昆明小鼠,48只小鼠分为A、B、C、D4组,对照组的小鼠于股四头肌注射质粒pcDNA3.0100μg,3个免疫组的小鼠分别注射pc-Sj31、pc-mIFN-γ和pc-Sj31-mIFN-γ质粒DNA各100μg。在0、2、6周免疫共3次,第3次免疫后2周,每只小鼠经腹部贴片感染尾蚴40±1条,感染后第42天剖杀,计数各小鼠检获成虫数及肝卵数。结果pc-Sj31-mIFN-γ(D组)免疫组的减虫率和肝组织减卵率分别为28.56%和60.20%,但是表达鼠mIFN-γ与Sj31抗原融合蛋白的DNA疫苗并未明显优于单纯表达日本血吸虫组织蛋白酶B(Sj31)DNA疫苗的免疫保护作用。结论pc-Sj31-mIFN-γ多价DNA疫苗构建成功,但其诱导小鼠抗血吸虫病免疫保护效果不明显优于pc-Sj31。