纳米血管生成素-2小干扰RNA质粒制备及功能研究

[目的]制备血管生成素-2小干扰RNA(Ang-2siRNA)质粒纳米微粒,并观察其基因转染能力和基因沉默效果.[方法]应用分子克隆的方法构建Ang-2siRNA质粒,将其与聚乳酸、O羧甲基壳聚糖用水/油/水(W/O/W)双乳化溶剂蒸发法制备纳米微球,扫描电镜观察其形态和粒径.然后转染原代人脐带静脉内皮细胞,观察纳米Ang-2siRNA微粒干扰Ang-2基因表达的效果及其细胞保护功能.[结果]扫描电镜观察到Ang2siRNA纳米微球呈球形和椭球形,粒径150～200 nm,大小分布均匀,包封完整,分散性良好.有较强转基因能力,良好的RNA干扰效果和血管内皮细胞保护功能.[结论]成功制备纳米Ang-2siRNA微粒,并证实其载基因能力和RNA干扰效果,对血管内皮细胞损伤因素有良好保护作用,为进一步研究心肌梗死的血管修复机制奠定了坚实的基础.     

P53表达在胸腺瘤分型中的意义

目的探讨P53的表达在不同类型胸腺瘤中的意义。方法选取我科2000年5月至2005年12月29例经病理证实的胸腺瘤手术切除标本,采用SP免疫组化方法检测P53蛋白在胸腺瘤中的表达情况。结果P53阳性表达率分别为:良性胸腺瘤7.70%,恶性胸腺瘤I型50.00%,胸腺癌100%。P53的表达随着肿瘤恶性程度的增高而增加(P<0.05)。P53蛋白表达的阳性率与胸腺组织学类型及是否伴有重症肌无力(MG)无关(P>0.05)。结论P53的表达在不同类型胸腺瘤中差异显著,对于判断胸腺瘤良恶性有重要参考价值。     

停跳或不停跳心脏手术对血清 S-100B蛋白表达的影响

【目的】研究心脏手术围术期血清S-100B蛋白表达及其与停跳或不停跳心肺转流方式和时间的关系。【方法】体外循环心脏手术患者23例,测转流前、转流10min、转流末、转流后24h的血清S-100B蛋白表达水平。【结果】①血清S-100B蛋白质量浓度在体外循环前后动态变化:转流前(M)为0.27μg/L,转流10min后升至0.57μg/L(P<0.01),转流末达峰值1.80μg/L(P<0.01),转流后24h降为0.22μg/L(P>0.05)。转流末的血清S-100B蛋白质量浓度与转流时间呈正相关(r=0.488,P<0.05)。②停跳组(n=6)转流前、转流10min、转流末、转流后24h平均血清S-100B蛋白质量浓度分别为(0.17±0.09)μg/L、(0.48±0.13)μg/L、(1.65±0.52)μg/L和(0.19±0.04)μg/L,不停跳组(n=6)分别为(0.26±0.14)μg/L、(0.71±0.41)μg/L、(1.59±0.84)μg/L和(0.23±0.11)μg/L,两组差别无统计学意义(P>0.05)。【结论】体外循环可导致血清S-100B蛋白表达增高,其表达水平与心肺转流时间呈正相关,但与停跳或不停跳转流方式无关。     

自体骨髓单个核细胞心肌移植治疗猪慢性缺血性心脏病的实验研究

【目的】探讨自体骨髓单个核细胞心肌移植对猪慢性缺血心肌心功能的改善和促进血管新生的作用。【方法】小型猪左侧开胸在左冠状动脉回旋支起始部放置Ameroid环，4周后进行心脏超声波检测、冠状动脉造影和自体骨髓单个核细胞心肌移植，移植后4周进行心脏超声波检测，免疫组化计数血管密度。【结果】17只猪中有16只猪术后存活8周以上，活体冠状动脉造影显示左冠状动脉回旋支均闭塞。自体骨髓单个核细胞心肌移植组比对照组心功能有显著改善（P〈0．05），移植组的血管数密度显著高于对照组（P〈0．05），差异有统计学意义。【结论】自体骨髓单个核细胞心肌移植可改善慢性缺血心肌的心功能，其机理之一是通过改善缺血心肌的血供来实现。     

腺病毒介导血管内皮细胞生长因子基因体外转染骨髓间充质干细胞

 【目的】探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后目的基因表达情况及对MSCs增殖分化的影响。【方法】构建含VEGF基因的腺病毒表达载体,利用贴壁法分离培养MSCs后,用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效果和转染率,用免疫组化、Western-Blot和ELISA方法分别检测VEGF基因转染MSCs后VEGF的表达情况。【结果】腺病毒介导的VEGF基因对于MSCs具有很高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicyties of infection,MOI)具有量效关系。MOI为150倍时,转染效率>95%,转染VEGF后,MSCs可有效表达VEGF,9d时达到表达高峰(1125pg/mL),13d后仍可检测到VEGF的表达。转染VEGF对MSCs的增殖分化没有明显影响。【结论】腺病毒介导的VEGF基因可以有效的转染MSCs,MSCs是一种理想的基因载体细胞,其携带的VEGF基因可获得较高的表达水平。     

小鼠梗死心肌组织上VEGF基因治疗和骨髓间充质干细胞移植的实验研究

目的 探讨VEGF基因治疗和MSCs移植各对梗死心肌组织的影响.方法 将相同基因背景的SD雄性大鼠30只随机分成A、B、C三组.建立心肌梗死模型后,MSCs组注射MSCs 4×106 cells/50 μl.AdVEGF组注射AdVEGF 5×107 pfu 50μl.Control组(对照组)注射无血清IMDM培养液50 μl.移植前、移植后2、4周分别用超声检测心功能.病理中检测细胞存活分化和血管新生情况.结果 MSCs组移植2、4周后AdVEGF组与Control组相比,心功能较移植前有明显改善(P＜0.01),而且病理提示大部分MSCs己向心肌样细胞分化.MSCs组和AdVEGF组都有促血管新生作用,MSCs组为(5.94±1.67)mm;AdVEGF组(13.59±1.08)mm,Control组(对照组)无新生血管出现.结论 移植于梗死心肌的骨髓间充质干细胞可以存活,并在一定程度上改善了受体的心功能.     

腹腔镜与开腹式结直肠癌术前术后血清C-反应蛋白、白细胞介素-6、内皮素、一氧化氮检测的临床探讨

目的多点监测腹腔镜与开腹式结直肠癌术前术后血清CRP、IL-6、ET、NO的表达水平。方法选取本院2015年1月-2016年12月以腹腔镜手术治疗的36例结直肠癌患者作为腹腔镜组,以同期本院以传统开腹式手术治疗36例结直肠癌患者作为开腹组,分别于术前、术后12 h、24 h、48 h及72 h多点监测2组患者血清CRP、IL-6、ET、NO 4项表达水平,并分析2组各项检测指标的差异性。结果 2组ET均于术后12 h显著下降后开始上升,至术后24 h时达峰值,然后再次逐渐下降。2组NO水平均于术后逐渐升高且呈持续上升趋势;2组IL-6均于术后12 h内出现升高,至术后24 h时达峰值后逐渐下降;2组CRP均于术后12 h内出现升高,至术后24 h时达峰值后逐渐下降。结论腹腔镜结直肠癌手术术后应激反应较小,持续时间较短,因此术后恢复期短,适应范围更广。     

32例感染性心内膜炎临床分析

目的：探讨左心IE与右心IE两者临床表现及治疗上的差异。方法：对中山大学第二附属医院1999年1月～2003年12月住院的32例IE病人分成左心IE组，右心IE组进行回顾性对照分析。结果：左心IE中外科治疗者10例，瓣膜置换术9例，瓣膜修复整形术1例。右心IE中外科治疗者5例，其中瓣膜置换术4例，瓣膜修复整形术1例。结论：左心IE与右心IE临床表现不同，突出表现在肺部病变；对于IE瓣膜病变的手术方式应根据瓣膜损坏程度来决定，左心IE以瓣膜置换为主，右心IE尽量争取瓣膜修复整形。