宫颈癌中RASSF1A基因高度甲基化及微卫星变异的研究进展

新近克隆出来的Ras相关区域家族1A基因(RASSF1A)已被确认为一种候选抑癌基因(TSGs),位于人类染色体3p21.3上。RASSF1A基因失表达见于多种人类肿瘤中,如肺癌、乳腺癌、肝癌、宫颈癌、肾癌等,表明了其在致癌作用中的重要性。高度甲基化和微卫星变异(mic-rosatellite alterations)是导致RASSF1A基因失活的主要机制,其参与了细胞凋亡信号的转导、微管的稳定作用和有丝分裂的进程,作为一种Ras负向调节因子阻止细胞生长,诱导细胞凋亡,促进肿瘤的发生和发展。宫颈癌中存在RASSF1A基因的表达缺失,且与人乳头状瘤病毒(HPV)感染之间存在一定的相关关系。     

FHIT基因杂合性丢失与宫颈癌关系

目的探讨脆性组氨酸三联体基因（Fragile histidine triad，FHIT）杂合性丢失（Loss of heterozygosity，LOH）及人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus，HPV）感染与宫颈癌的关系。方法选取FHIT基因的2个微卫星多态标记，采用聚合酶链反应（Polymerase chain reaction，PCR）法对50例宫颈癌及40例宫颈上皮内瘤样病变（Cervical intraepithelial neoplasia，CIN）组织进行杂合性丢失及HPV16感染的检测。结果在D3S1234和D3S4103位点上宫颈癌的杂合性丢失发生率分别为46％（23／50）、40％（20／50）；宫颈上皮内瘤样病变的杂合性丢失发生率分别为40％（16／40），37．5％（15／40）。宫颈癌与CIN在D3S1234位点上的LOH差异无统计学意义（P〉0．05）；在D3S4103位点上也无统计学意义（P〉0．05）。但宫颈癌在2位点上LOH发生频率均高于CIN，且高级别CIN发生率高于低级别CIN。HPV16感染的阳性组中LOH发生率为79．5％（35／44）；阴性组LOH发生率为33．3％（2／6），组间LOH的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论FHIT基因的变异可能发生在宫颈癌变的晚期；FHIT基因的LOH对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值。     

宫颈癌中RASSF1A基因微卫星的不稳定性

Ras相关区域家族1A(ras association domain family 1A,RASSF1A)基因是新近克隆出来的一种肿瘤抑制基因[1],其在调节细胞周期和细胞凋亡方面具有重要作用。RASSF1A基因失表达见于多种人类肿瘤中。本研究选择RASSF1A基因内的两个微卫星多态标记,对110例宫颈组织进行微卫星不稳定     

Relationship between Microsatellite Alterations of RASSF1A Gene and Development of Cervical Carcinoma

Objective： To explore the relationship between microsatellite alterations of RASSFIA gene and the development of cervical carcinoma, and its relationship with HPV16 infection. Methods： Two sites of microsatellite polymorphism of RASSFIA gene were selected. Polymerase chain reaction （PCR） technique was used to detect LOH and MSI in 50 cases of cervical carcinoma and 40 cases of cervical intraepithelial neoplasia （CIN）, and to detect the infection state of HPV16. Results： At D3S1478 and D3S4604, the LOH rates of cervical carcinomas were 32.6% （14/43） and 48.9% （23/47）, the MSI rates were 14% （6/43） and 19.1% （9/47）, respectively. The LOH rates of CINs were 31.4% （11/35） and 39.5% （15/38）, the MSI rates were 11.4% （4/35） and 15.8% （6/38）, respectively. There were no significant differences between cervical carcinomas and CINs in respect to their positive rates of LOH and MSI at D3S1478 and D3S4604 （P〉0.05）. There were significant differences in LOH rates at D3S1478 and D3S4604 between the stage Ⅰ-Ⅱ and Ⅲ-Ⅳ cervical carcinomas and between the well/moderately differentiated cervical carcinomas and the poorly differentiated cervical carcinomas （P〈0.05）. The positive rates of LOH and MSI for CIN Ⅲ and noninvasive cervical carcinomas were higher than those in CIN Ⅰ-Ⅱ. The rates of infection of HPV16 in cervical cancer was obviously higher than that in CIN and in normal cervical tissues （P〈0.05）, and the incidence of LOH of RASSFIA gene was higher in HPV16（＋） than that in HPV16（-） （P〈0.05）. Conclusion： The RASSFIA gene change is a relatively late event in cervical carcinomas. The detection of LOH and MSI of RASSFIA gene might be helpful to the early diagnosis and the screening of cervical carcinoma. It might also be useful for predicting the prognosis of cervical carcinoma.     

FHIT基因微卫星变异及人乳头瘤病毒感染与宫颈癌关系的研究

目的：探讨脆性组氨酸三联体（FHIT）基因微卫星变异及人乳头瘤病毒感染与宫颈癌的关系。方法：选取FHIT基因的两个微卫星多态标记，采用聚合酶链反应（PCR）法对50例宫颈癌及40例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织进行杂合性丢失（LOH）、微卫星不稳定性（MI）及HPV16感染的检测。结果：在D3S1234位点上宫颈癌和C1N的LOH发生率分别为46％（23／50）和40％（16／40），差异无统计学意义，P=0．361；宫颈癌和CIN的MI发生率分别为18％（9／50）和12．5％（5／40），差异无统计学意义，P=0．339。在D3S4103位点上宫颈癌和CIN的LOH发生率分别为40％（20／50）和37．5％（15／40），差异无统计学意义，P=0．491；宫颈癌和CIN的MI发生率分别为14％（7／50）和7．5％（3／40），差异无统计学意义，P=0．265。但宫颈癌在两位点上LOH和MI发生频率均高于CIN且高级别CIN发生率高于低级别CIN。在50例宫颈癌组织中HPV16感染阳性组的LOH和MI发生率分别为79．5％（35／44）和31．8％（14／44），阴性组LOH发生2例，MI发生1例，两组间LOH的差异有统计学意义，P=0．003，MI的差异无统计学意义，P=0．645。在40例CIN中HPV16感染阳性组的I，0H和MI发生率分别为82．4％（14／17）和35．3％（6／17），在HPV16感染阴性组中I。0H和MI的发生率分别为52．2％（12／23）和17．4（4／23）；LOH的差异有统计学意义，P=0．048，MI的差异无统计学意义，P=0．274。结论：FHIT基因的变异可能发生在宫颈癌变的晚期。     

FHIT基因微卫星变异与宫颈癌关系的分析

[目的]探讨FHIT基因微卫星变异与宫颈癌的关系。[方法]选取FHIT基因的两个微卫星多态标记,采用聚合酶链反应法（PCR）对50例宫颈癌及40例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织进行杂合性丢失（LOH）和微卫星不稳定性（MI）的检测。[结果]在D3S1234位点上宫颈癌的LOH发生率为46%（23/50）,CIN的LOH发生率为40%（16/40）,宫颈癌与CIN的LOH发生率差异无统计学意义（P〉0.05）,宫颈癌的MI发生率为18%（9/50）,CIN的MI发生率为12.5%（5/40）,差异无统计学意义（P〉0.05）;在D3S4103位点上宫颈癌的LOH发生率为40%（20/50）,CIN的LOH发生率为37.5%（15/40）,差异无统计学意义（P〉0.05）,宫颈癌的MI发生率为14%（7/50）,CIN的MI发生率为7.5%（3/40）,差异无统计学意义。但宫颈癌在两位点上LOH和MI发生频率均高于CIN,且高级别CIN发生率高于低级别CIN。[结论]FHIT基因的变异发生在宫颈癌变的晚期;FHIT基因的LOH与MI对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值。     

RNA干扰沉默HIF-1α基因对舌癌Tca8113细胞侵袭和迁移的影响

目的 观察RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α （HIF-1α）基因对人舌癌细胞Tca8113侵袭和迁移的影响.方法 将3个shRNA序列质粒导入pGCsi-H1/Hygro/GFPshRNA质粒表达载体,并将重组质粒经脂质体介导转染人舌癌细胞Tca8113（siHIF-1α组）,转染阴性对照质粒的细胞作为空载组.半定量RT-PCR及Western blot法检测HIF-1α的mRNA及蛋白,细胞侵袭实验和划痕实验检测Tca8113的侵袭和迁移能力,同时采用Western blot法检测其上皮-间质转化（EMT）相关标志蛋白和黏着斑激酶（FAK）、磷酸化FAK（P-FAK）.结果 测序证实成功构建了HIF-1α shRNA重组质粒（分别为sh1、sh2、sh3）,将sh3,转染Tca8113后进行低氧培养,HIF-1α基因表达显著被抑制.与空载组相比,转染sh3的siHIF-1α组穿透Matrigel胶的细胞数明显减少,且迁移能力也显著下降,两组相比,P均＜0.05.与对照组（未转染质粒的Tca8113）相比,siHIF-1α组EMT相关标志蛋白和p-FAK蛋白表达下降,两组相比,P均＜0.05.结论 RNA干扰沉默HIF-1α基因能有效抑制舌癌细胞的侵袭和迁移,在一定程度上可以逆转舌癌细胞的恶性表型.     

宫颈癌中RASSF1A基因杂合性丢失及HPV感染状态的研究

[目的]研究RASSF1A基因的杂合性丢失(Ioss of heterozygosity, LOH)及人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染与宫颈癌临床病理参数之间的关系.[方法]选择3p上2个微卫星位点,对110例宫颈组织进行LOH及HPV感染状态的分析.[结果]宫颈癌及CIN中RASSF1A基因LOH阳性的比例明显高于正常宫颈(P<0.05);官颈癌Ⅲ和Ⅳ期LOH的阳性率明显高于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05);低分化宫颈癌的LOH阳性率明显大于高中分化官颈癌(P<0.05);随CIN级别的增加LOH阳性率也呈逐渐递增趋势,高级别CIN(CINⅢ及原位癌)明显高于低级别CIN(CIN I/Ⅱ)(P<0.05).宫颈癌中HPV感染阳性率明显高于CIN组及正常宫颈组(P<0.05);RASSF1A的LOH阳性率在HPV感染阳性组明显高于阴性组(P<0.05).[结论]RASSF1A基因的改变是宫颈癌发生过程中的较晚期事件,RASSF1A基因的LOH对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值.HPV感染与RASSF1A基因的LOH共同作用在宫颈癌发展过程中更有意义.     

抑癌基因RASSF1A微卫星变异与宫颈癌发生发展的关系

目的 探讨抑癌基因RASSF1A微卫星变异在宫颈癌发生发展中的作用及其与HPV感染的关系.方法 选择RASSF1A基因的两个微卫星多态标记位点,采用PCR技术对宫颈组织进行杂合性丢失与微卫星不稳定性的检测,同时检测宫颈组织中HPV16的感染状况.结果 两位点的LOH发生率在宫颈癌组织临床分期及病理分级之间差异有统计学意义(P＜0.05).双位点的LOH及MSI在宫颈癌有无淋巴结转移间差异有统计学意义(P＜0.05).RASSF1A基因的LOH发生率在HPV16感染阳性组中明显高于阴性组(P＜0.05).结论 RASSF1A基因的改变是宫颈癌发生过程中的较晚期事件,RASSF1A基因的LOH与MSI对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值.RASSF1A基因的LOH与HPV16感染二者共同作用在宫颈癌的发生发展过程中更有意义.     

关于在天津建立卫生类应用科技大学的探讨

随着医学教育的进步与发展，对相应的人才培养水平提出了更高的要求。中、高职对医疗技术技能人才的培养将不能满足经济和社会发展的需要，进行本科层次人才的培养势在必行，一批卫生类应用科技大学将应运而生。以天津市医学高等教育相关情况为基础，拟探讨在天津建立卫生类应用科技大学的必要性和可行性。