T淋巴细胞亚群及其细胞因子测定对鲍曼不动杆菌感染与定植的鉴别诊断效果

目的探讨T淋巴细胞亚群及其细胞因子测定对鲍曼不动杆菌感染与定植的鉴别诊断效果。方法选取2015年1月至2019年1月昆山市第三人民医院及昆山市第一人民医院收治的106例痰培养分离出鲍曼不动杆菌的住院患者为研究对象,依据医院获得性肺炎的诊断标准将其分为感染组(54例)与定植组(52例)。比较两组患者的临床特征、T淋巴细胞亚群及其细胞因子[白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-17、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ]水平,分析鲍曼不动杆菌感染的危险因素。结果感染组患者阳性标本留取前使用抗菌药物时间≥10d者比例、三代头孢使用率、真菌感染率、免疫抑制剂使用率、原发疾病为慢性肺部疾病患者比例、住ICU期间重症脓毒症发生率和病死率高于定植组患者(P0.05)。感染组患者IL-2、IL-4、IL-17、TNF-α、IFN-γ水平高于定植组患者,CD4~+/CD8~+水平低于定植组患者,差异均有统计学意义(P0.05)。Logistic回归结果显示,低CD4~+/CD8~+、高IL-17和高IFN-γ水平为鲍曼不动杆菌感染的危险因素(P0.05)。结论低CD4~+/CD8~+、高IL-17和高IFN-γ水平为鲍曼不动杆菌感染的危险因素,可作为临床鉴别鲍曼不动杆菌感染和定植的指标。     

腺苷脱氨酶自建检测系统及评价

目的比较北京利德曼生化股份有限公司生产的腺苷脱氨酶（ADA）检测试剂盒在Roche ModolarDPP全自动生化分析仪上建立的检测系统与Roche Modolar DPP可溯源的参考系统血清ADA检测结果之间的可比性和临床上可接受性。方法依据临床和实验室标准化协会（CLSI）标准中EP9-A文件对自建检测系统与可溯源参考系统检测门诊患者的40份新鲜血清ADA含量进行线性回归分析。结果自建系统和参考系统血清ADA检测结果具有很好的可比性。回归方程为Y=0.998 7 X＋0.090 2,其相关系数r2=0.998 4。结论自建系统血清ADA检测结果与Roche Modolar DPP可溯源的标准参考检测系统具有很好的可比性,可以代替参考系统检测临床标本,能够被临床所接受。     

miR-421在胃癌中的表达及对BGC-823细胞增殖的作用

目的探讨miR-421在胃癌细胞中的表达水平及对BGC-823胃癌细胞增殖的作用。方法利用PCR方法分析miR-421在胃癌组织细胞及多种胃癌细胞株中的表达水平,并通过RNA转染技术将miR-421 mimics与miR-421 inhibitors转染BGC-823胃癌细胞;通过CKK-8试剂盒检测转染后BGC-823细胞的增殖情况。结果 miR-421在胃癌组织细胞及多种胃癌细胞株中均表达增强（P〈0.05）;miR-421 mimics转染BGC-823后,癌细胞增殖能力增强（P〈0.05）,而miR-421 inhibitors转染的BGC-823细胞则增殖力受到明显抑制（P〈0.05）。结论 miR-421在胃癌组织细胞及多种胃癌细胞株中均过表达,而miR-421可能直接或间接参与调控BGC-823胃癌细胞的增殖。     

床边检测血糖仪与生化仪检测血糖相关性分析

目的:对床边检测血糖仪测定结果与全自动生化分析仪血糖测定结果进行对比,评价其相关性。方法:采用40份不同浓度血糖的EDTA-K2抗凝全血,在POCT血糖仪上测定三次,取均值,同时离心取血浆在全自动生化分析仪上测定三次,取均值进行比较分析。结果:POCT血糖仪检测结果比全自动生化分析仪检测血糖结果稍低,但在医学决定水平浓度的系统误差<10%,能够被临床所接受。结论:POCT血糖仪与全自动生化仪测定血糖的相关性尚好,可以用于糖尿病患者血糖监测或过筛,但是不能作为糖尿病的确诊试验。     

姜黄素对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞炎症反应的影响及分子机制

目的 研究姜黄素对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症因子表达的影响,初步探讨可能的分子机制.方法 使用LPS(1μg)和姜黄素(5μmol/L、15μmol/L或30μmol/L)处理HUVEC细胞24 h,收集细胞总RNA,实时定量PCR(RT-PCR)和ELISA方法检测细胞TNF-α、MCP-1水平;Western blot检测细胞TLR4、MAPKs、NF-κB p65、磷酸化-NF-κB p65及NF-κB抑制蛋白IκBα的表达情况.结果 与空白对照组比较,姜黄素能显著抑制LPS诱导HUVEC细胞TNF-α、MCP-1和TLR4的过表达(P<0.05),明显降低NF-κB p65和MAPKs的磷酸化及IκBα蛋白降解(P<0.05).结论 姜黄素可能基于抑制TLR4/NF-κB,从而影响LPS诱导HUVEC细胞炎症因子的表达.     

小鼠Bax的基因克隆及其原核表达

目的 克隆小鼠Bax基因全长编码区,并原核表达小鼠Bax基因全长序列,为从转录水平探讨Bax基因与肿瘤的关系奠定基础.方法 取小鼠骨髓细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从细胞中获得Bax基因,构建重组表达质粒pet28a/Bax;酶切鉴定挑选阳性重组质粒转化大肠埃希菌ROS,测序鉴定后经IPTG 25 ℃诱导6 h,SDS-PAGE电泳判断以包涵体形式存在的带有His标签的融合蛋白,Western blot鉴定.结果 扩增获得的Bax基因CDS区全长579 bp,编码192个氨基酸残基,与GenBank中发表的序列完全一致.成功构建了原核表达载体pet28a/Bax,并在工程菌ROS中获得大量表达.结论 获得了小鼠Bax基因,并成功原核表达和制备出小鼠Bax融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础,并为寻找多种肿瘤性疾病的有效治疗途径提供新思路.     

不同检测系统测定血清尿素氮和肌酐的结果偏倚分析

目的探讨尿素氮(BUN)和肌酐(CREA)在BECKMANLX20和RocheModolarDPP全自动生化分析仪之间测定结果的可比性,为不同的检测系统检测结果之间的临床可接受性提供依据。方法参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A文件,以RocheModolarDPP全自动生化分析仪为参考方法(X),以BANKMANLX20全自动生化分析仪为实验方法(Y),计算其相关系数(r2)及直线回归方程,按照美国实验室修正法规(CLIA’88)规定的室间质量评价标准允许总误差(Totalerrorallowance,TEa)的1/2为判断依据,判断两个不同的检测系统之间测定结果的可比性及临床可接受性。结果两个系统BUN、CREA检测相关系数r2=0.9989、0.9988,回归方程分别是y=0.992x-0.0389、y=0.9846x-0.0409。不同检测系统上检测的结果差异之间无统计学意义(P>0.05),结论两台全自动生化分析仪检测BUN、CREA的结果具有可比性,能够被临床所接受。