丙型肝炎病毒F蛋白结合蛋白1基因的克隆化与序列分析

目的 对命名为F蛋白结合蛋白1(FBP1)的未知基因,克隆其全长基因并进行生物信息学分析.方法 应用酵母双杂交技术得到FBP1,应用分子生物学技术克隆FBP1的基因编码序列.结果 经酶切和测序鉴定,结果完全正确,成功克隆了FBP1的基因编码序.结论 FBP1通过与F蛋白结合,在病毒蛋白与宿主细胞蛋白相互作用过程中发挥重要作用.     

SPP对人脐静脉内皮EA.hy926细胞表达粘附分子的作用

目的:通过研究在N,N-二甲基鞘氨醇(DMS)作用下,人脐静脉内皮EA.hy926细胞株(EA株)表达粘附分子CD54(ICAM-1)和CD62p(PS)的变化,探讨第二信使1-磷酸鞘氨醇(SPP)参与动脉粥样硬化(AS)粘附过程的机制。方法:采用流式细胞仪分群作用衡量EA细胞株和单核细胞之间的粘附率,用细胞免疫组化法检测DMS作用于EA株后引起的粘附分子的表达。结果:随着DMS作用剂量或作用时间的增加,CD54与CD62p的表达均减少,同时粘附率也相应地下降。结论:AS早期的粘附过程可能是通过SPP来转导信息,以促进粘附分子表达。     

产前筛查和基因多态性位点在唐氏综合征产前诊断中的应用

目的 在建立可靠的产前筛查方法的同时，采用快速，简便，准确的产前诊断方法，防止唐氏综合征（DS）患儿的出生，方法 采用酶联免疫方法测定妊娠14-20w孕妇血清甲胎蛋白（AFP）和绒毛膜促性腺激素β亚基（β-HCG）浓度，结合孕妇年龄，孕周和体重，用计算机软件进行分析，得到每位孕妇所怀胎儿DS风险系数，对筛查出胎儿唐氏综合征高风险孕妇，再利用21号染色体上的6个多态性位点对其作产前基因诊断。结果 经产前筛查，在395例孕妇中发现10例胎儿唐氏综合征高风险孕妇，其中1例产前基因诊断为胎儿唐氏综合征，与染色体核型分析结果相符。结论 产前筛查结合基因多态性在唐氏综合征产前诊断中具有很好的应用价值。     

胃癌患者6号染色体长臂遗传不稳定性

目的研究中国人胃癌6号染色体长臂微卫星不稳定性（microsatellite instability，MSI）和杂合性缺失（loss of heterozygosity，LOH）状况及与临床病理特征之间的联系。方法采用PCR-SSLP-银染方法对27例胃癌组织及其相应正常组织6号染色体长臂（6q）不同位置的4个位点进行MSI和LOH检测。结果27例信息个体中16例检测到一个或多个位点MSI，平均MSI频率59．2％；11例不具MSI的信息个体中7例存在1个或更多位点LOH，平均频率63．6％。MSI和LOH频发位点均为D6S434（6q16．3-q21）和D6S404（6q16．3-q23）。MSI和LOH在高分化胃癌和低分化胃癌各个时期均有发生．但高分化胃癌中高水平MSI（MSI-H）发生有增高趋势。结论MSI和LOH发生率与年龄、性别、组织分化程度、病理分期及发病部位等临床指标虽然无明显相关，但6q等位基因缺失关键区域与其它国家、地区相似，进一步证实6q上该区可能存在与胃癌相关的肿瘤抑制基因。     

左氧氟沙星对金黄葡萄球菌小RNA表达的影响

目的研究左氧氟沙星对金黄葡萄球菌小RNA表达的影响及对细菌生长的作用。方法分别在不同抑菌浓度左氧氟沙星干扰情况下,培养金黄葡萄球菌实验株RN6390和RN1HG001,提取RNA,用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同菌株中RNAⅢ、RsaA、RsaE、RsaG、RsaH的含量,比较不同抑菌浓度左氧氟沙星作用下小RNA的表达差异。结果在MH培养液和BH培养液中左氧氟沙星对RN6390和RN1HG001的MIC均为0.25μg/ml。5种小RNA中,RNAⅢ的表达量最多,RsaG最少;当左氧氟沙星浓度≥1/4MIC时,开始对金黄葡萄球菌的生长产生明显抑制作用,5种小RNA的表达均开始下降;在RN6390菌株,1/16 MIC和1/8 MIC的左氧氟沙星能促进RsaH表达。结论不同浓度左氧氟沙星对金黄葡萄球菌小RNA表达具有抑制或者促进作用,提示除了其本身具有的阻碍细菌DNA合成的功能外还可能影响细菌基因的转录。     

宫颈癌中HPV16 E5基因的变异与病毒物理状态的研究

目的研究HPV16DNA在宫颈癌组织中的物理状态及其与E5转化基因的变异的关系。方法用斑点杂交方法确定HPV16阳性的宫颈癌标本,采用Southern印记杂交技术检测HPV16DNA在宫颈癌组织中的物理状态,并结合E5基因的扩增及序列测定来综合探求HPV16基因组在宿主细胞中的物理状态及其与E5片段变异的关系。结果60例宫颈癌组织中HPV16阳性率为58%(35/60);其中有22%(8/35)的HPV16DNA是以游离状态存在于宿主细胞内。在HPV16以游离型存在的宫颈癌标本中,仅有1例(1/8)发生了变异。结论不同病理分期的宫颈癌组织HPV16的物理状态无明显差异。在游离型HPV16致癌机制中,E5的变异似乎不占主导地位。所得结果为揭示HPV16致宫颈癌的分子机制尤其是为E5在游离型HPV16致癌机制提供了新资料。     

丙型肝炎病毒研究模型的现状与未来

在过去较长时间内,由于缺少合适的丙型肝炎病毒研究模型,对丙肝病毒感染机制、生活周期和致病机制的研究进展较为缓慢。对丙肝病毒的认识不足严重阻碍了相关预防性疫苗和治疗药物的研制。近年建立的丙肝病毒全基因体外培养系统是一项重大突破,这将促进人们对丙肝病毒的全面认识和丙型肝炎防治药物的开发。     

朱砂七总蒽醌及朱砂七大黄素体外抗甲型流感病毒实验研究

从朱砂七总蒽醌及朱砂七大黄素研究其抗病毒、抗炎、镇痛等方面的研究。试验结果:朱砂七总蒽醌在药液为1-4mg/ml时,在体外对流感病毒PR8株有直接灭活作用(P<0.05)对流感病毒PR8株在鸡胚内的增殖有抑制作用。朱砂七大黄素在药液浓度为2-4mg/ml时,在体外对流感病毒PR8株有直接灭活作用(P<0.05)。     

乳腺癌组织中HPV16E6和E7的检测

目的 检测乳腺癌组织中人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16 E6和E7基因.方法 采用聚合酶链反应法(PCR)检测40例乳腺癌和20例正常乳腺组织中HPV16E6和E7.结果 40例乳腺癌中HPV16 E6和E7基因的检出率分别为60%(24/40)和55%(22/40),20例正常乳腺组织中HPV16 E6和E7检出率分剐为5 %(1/20)和5%(1/20),两者均存在显著性差异(P＜0.05).乳腺癌中HPV16E6和E7基因的检出率在患者不同年龄、肿块大小、雌孕激素受体水平和淋巴结转移中均无显著性差异(P＞0.05).结论 E6和E7基因共存于HPV16感染的乳腺癌中,HPV16可能是乳腺癌发病的病因学因素之一.     

反复自发性流产与抗心磷脂抗体和抗精子抗体之间的关系研究

目的 :探讨妊娠早期 (妊娠 5～ 11周 )反复自发性流产 (RSA )与抗心磷脂抗体 (ACA )和抗精子抗体(ASA)之间的关系。方法 :用ELISA法检测 3 3 8例反复自发性流产患者 (研究组 )血清ACA IgM和ACA IgG以及ASA IgM和ASA IgG。选择 69例无流产史并已分娩的妇女作为对照组。结果 :研究组ACA IgM和ASA IgM阳性检出率与对照组相比 ,差异有非常显著意义 (P <0 0 1) ;ACA IgG和ASA IgG阳性检出率与对照组相比 ,差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ;研究组ACA IgM或ACA IgG的阳性检出率以及ASA IgM或ASA IgG阳性检出率与对照组相比差异有极其显著意义 (P <0 0 0 1)。结论 :妊娠早期反复自发性流产与抗心磷脂抗体和抗精子抗体之间有密切关系