大鼠再生肝细胞对四氯化碳的耐受

本工作采用肝部分切除(PH)后96h 大鼠的离体肝细胞,以细胞存活率、介质中 GPT、GOT 含量作为肝损伤指标,观察其抗四氯化碳损伤作用。在不加四氯化碳条件下,肝细胞温育3h 或5h 后,细胞存活率、漏入介质中GPT、GOT 活性在假手术组和 PH 组间无显著差异。但在有四氯化碳损伤条件下则不同,在温育3h 或5h 后,存活率在假手术组分别降到52.8±5.9%和43.5±5.8%,而 PH 组分别为69.2±5.8%和60.9±3.2%。漏出的 GPT和 GOT 活性在假手术组也明显高于 PH 组(P<0.01)。提示大鼠离体再生肝细胞有明显的抗四氯化碳损伤作用。     

大鼠再生肝的抗四氯化碳损伤作用与金属硫蛋白

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是富含半胱氨酸和金属的非酶蛋白,具有清除自由基的作用,主要在肝脏合成。本工作探讨了再生肝抗四氯化碳(CCl_4)损伤作用与其MT含量的关系。以血清胆红素浓度和谷丙转氨酶(sGPT)活性为指标,观察了CCl_4对肝部分切除后2、4、6、8天大鼠再生肝的损伤情况,并对应地测定了肝脏MT含量。结果表明,二者的变化密切相关,肝部分切除后4天再生肝对CCl_4的抗损伤作用最为明显,同时MT含量的增加适达高峰。     

大鼠肝刺激因子对CCl_4致肝损伤小鼠保护作用的机制研究——Ⅰ.HSS的抗氧化作用

本工作观察了大鼠肝刺激因子(HSS)对CCl_4损伤小鼠后,肝组织和血清脂质过氧化物丙二醛(MDA)及自由基清除剂谷胱甘肽(GSH)含量的影响。结果发现,HSS(0.1mg/g 体重,ip)可使CCl_4(10%,5ml/kg)中毒后48 h,肝组织 MDA 值的升高幅度明显降低(6.23±0.98/nmol/mg 蛋白vs.4.17±1.67nmol/mg 蛋白,P<0.005),但血清MDA值的下降幅度不明显。同时肝组织GSH含量明显高于CCl_4损伤组(3236±472μg/g vs.2007±589μg/g,P<0.001)。上述结果提示,HSS具有抗氧化作用,降低CCl_4自由基对肝细胞膜的损伤作用,保护受损肝脏。     

大鼠肝刺激因子对CCl_4损伤小鼠肝脏保护作用机制的研究 Ⅱ.HSS 保护膜结构稳定性的作用

本工作用小鼠肝细胞膜、线粒体膜和微粒体膜为研究对象,观察经过生物活性鉴定过的肝生长刺激因子(HSS)对 CCl_4损伤膜流动性的效应。利用荧光探测剂 DPH 与含膜片液混合,测其荧光偏振度并计算膜的微粘度,以作为膜流动性改变的指标。结果表明,HSS 可减弱 CCl_4对肝细胞膜、线粒体膜和微粒体膜的损伤,使它们保持正常的流动性和稳定性。我们推测这可能是 HSS 保护肝脏的机制之一。     

大鼠肝刺激因子对CCl_4致肝损伤小鼠保护作用的机制研究——Ⅲ.HSS对DNA合成和琥珀酸脱氢酶的影响

我们曾经证明肝刺激因子(HSS)对小鼠实验性肝损伤的保护机制有二:一为抗氧化作用;另一为保持膜的流动性。本文再次探讨其机制并获得如下结果:①HSS促进CCl_4染毒小鼠肝细胞合成DNA;②HSS增加~3H-TdR掺入CCl_4染毒肝的DNA,③HSS保护受CCl_4处理小鼠的肝线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性。根据这些结果我们设想,HSS对CCl_4染毒小鼠奸细胞有强烈的增殖作用,其对SDH活性的保护有利于葡萄糖的氧化,这二者也可能是HSS的保肝机制。     

大鼠离体再生肝细胞对四氯化碳损伤的自身作用

本工作采用肝部分切除(PH)后96h大鼠的离体肝细胞,以细胞存活率、细胞内K~+漏出量、介质中GPT、GOT含量和细胞膜微粘度的改变作为指标,观察其抗CCl_4损伤作用。结果如下:(1)细胞温育3h或5h(介质中含5μl/ml,CCL_4)后PH组细胞存活率明显高于假手术组,介质中GPT和GOT含量亦明显降低。(2)细胞培养24h后换含CCL_4(15mmol/L)的新鲜培养液再培养20min,PH组细胞内K~+漏出量明显低于假手术组。(3)PH组细胞膜微粘度明显低于假手术组。这些结果提示大鼠离体再生肝细胞膜稳定性增高可能有抗CCl_4损伤的作用。