双 mTORC1/2 抑制剂 AZD2014 可抑制大鼠肝移植后的急性排斥反应

目的 在同种异基因大鼠肝移植模型中验证AZD2014是否具有抑制肝移植术后急性排斥反应的作用。方法 采用Kamada 提出的“二袖套”法建立Lewis→BN 同种异基因大鼠肝移植急性排斥反应模型,随机分成对照组和AZD2014组,各4只。AZD2014组腹腔内注射AZD2014药物,5 mg/kg,1次/d;对照组腹腔内注射药物溶剂2.5 mL/kg,1次/d。不同时间点取外周血检测肝功能（丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶和总胆红素）。记录生存时间,进行生存分析。移植肝脏行免疫组化检测CD3和Foxp3的表达水平,评估T淋巴细胞和Treg淋巴细胞浸润的程度;移植肝脏行HE染色,采用Banff方案评估肝移植术后排斥反应的严重程度。结果 对照组在术后14 d内有3/4 的大鼠死亡,而AZD2014组在术后14 d内无大鼠死亡,AZD2014组与对照组相比生存时间明显延长（χ2=4.213,P=0.040）。对照组血清中ALT、AST和TBIL进行性升高,上述指标均高于同时间AZD2014组（P<0.05）。病理检查显示对照组移植肝内排斥反应明显重于AZD2014组（排斥指数P<0.01）,对照组中T淋巴细胞（CD3阳性）浸润相较于AZD2014组更为严重（P<0.01）,而Treg细胞（Foxp3阳性）明显少于AZD2014组（P<0.01）。结论 双mTORC1/2抑制剂AZD2014可以有效地抑制同种异基因大鼠肝移植术后的急性排斥反应。     

碱性磷酸酶对大鼠自体原位肝移植后急性肺损伤的保护作用★

目的: 肝移植术后并发症不仅包括肝脏本身的损害，亦能导致肝外多个器官功能衰竭，其中肺脏是较易且较早受累的器官。文章通过建立大鼠自体原位肝移植模型，观察肝移植术后肺部急性损伤情况及碱性磷酸酶的干预作用。 方法:①实验于2007-05/10在南方医科大学附属南方医院实验动物中心、消化内科实验室完成，动物实验方法符合动物伦理学要求。②选用SD大鼠24只，按随机数字表法分为对照组、自体原位肝移植组和碱性磷酸酶组，每组8只。后两组建立大鼠自体原位肝移植模型，对照组开腹后游离肝叶后即关腹，碱性磷酸酶组于肝脏恢复血供前5 min自舌静脉注入碱性磷酸酶。③手术结束后2 h检测肺组织髓过氧化物酶活性、丙二醛含量、肺组织表面活性蛋白A含量及肺组织干湿重比值，并行肝脏、肺脏病理检查。 结果:大鼠24只全部进入结果分析。①自体原位肝移植组、碱性磷酸酶组肺组织中髓过氧化物酶活性、丙二醛含量均高于对照组（P﹤0.01），碱性磷酸酶组肺组织中髓过氧化物酶活性、丙二醛含量均低于自体原位肝移植组（P﹤0.01）。②碱性磷酸酶组、自体原位肝移植组肺组织表面活性蛋白A含量较对照组低，而碱性磷酸酶组较自体原位肝移植组有所升高。③自体原位肝移植组、碱性磷酸酶组肺组织干湿重比值均低于对照组（P﹤0.01），碱性磷酸酶组肺组织干湿重比值高于自体原位肝移植组（P﹤0.05）。④病理结果显示，肝移植后大鼠肝、肺组织受到明显损害，而碱性磷酸酶能减轻损伤程度。 结论:肝移植术后肺部确实存在急性损伤，而碱性磷酸酶对其具有保护作用。     

双mTORC1/2抑制剂AZD2014可抑制裸鼠体内的人肝细胞癌的生长

目的 体内研究双 mTORC1/2 抑制剂AZD2014 对肝细胞癌是否具有抗癌作用。方法 将肝癌细胞 HCCLM3 接种至祼鼠皮下,待形成明显瘤块,随机分成 2 组（对照组和 AZD2014组）,每组各 5 只。AZD2014 组腹腔内注射AZD2014,5 mg/kg体质量,1次/d;对照组腹腔内注射药物溶剂2.5 mL/kg体质量,1 次/d。定期测量肿瘤大小,绘制肿瘤体积增长曲线。给药后第24天,剥离皮下肿瘤,测量肿瘤的体积,并行HE 染色和免疫组织化学检测细胞增殖、凋亡和 EMT 相关蛋白。结果 AZD2014 组肿瘤的体积自给药后几乎未再增大,而对照组中的肿瘤体积随着时间的延长而不断增大（P<0.001）。HE 染色显示AZD2014 组中发生坏死的细胞显著多于对照组。免疫组化检测发现 AZD2014 组中细胞增殖核抗原 Ki-67 和血管内皮细胞标志蛋白 CD31的表达量显著低于对照组,而促凋亡蛋白 Cleaved caspase-3显著高于对照组;此外,AZD2014 组间质细胞表型蛋白 N-cadherin和 Vimentin的表达水平显著低于对照组,而上皮细胞表型蛋白 E-cadherin 的表达水平则显著高于对照组。结论 AZD2014可以抑制肝细胞癌的增殖、微血管形成和 EMT 进程,同时还可以促进肝癌细胞发生坏死和凋亡。     

腹腔镜根治性顺行模块化胰脾切除术1例报告及文献复习

目的:总结腹腔镜根治性顺行模块化胰脾切除术(Lap-RAMPS)的安全性、有效性。方法:回顾分析为1例患者行Lap-RAMPS的临床资料,并复习相关文献。结果:患者成功完成腹腔镜手术,手术时间230 min,术中出血量50 mL,术后住院7 d,无并发症发生。术后病理诊断:胰腺导管腺癌,浸润胰腺腺泡并突破胰腺外膜,累及周围脂肪、神经;肾上腺见癌细胞转移;脾脏未见肿瘤;淋巴结未见癌细胞转移。结论:Lap-RAMPS手术难度大、技术要求高,术者应具备丰富的开放手术经验,手术是安全、可行的。     

腹腔镜保留十二指肠胰头切除术初步体会

目的总结腹腔镜保留十二指肠胰头切除术(laparoscopic duodenum preserving pancreatic head resection,LDPPHR)的经验。 方法回顾性分析2019年3月南方医科大学珠江医院肝胆二科1例行LDPPHR患者的临床资料。 结果患者顺利完成手术,手术时间280 min,术中出血量50 ml,未予输血。术后出现胆漏,予保守治疗后痊愈。无术后出血、胰漏、十二指肠瘘、胆总管狭窄等并发症。术后病理报告显示胰头慢性炎。 结论LDPPHR对于胰头良性病变的治疗是安全的、可行的,具有创伤小、恢复快、改善患者术后生活质量等优点,值得临床推广应用。     

脾破裂后肝内异位脾种植

异位脾种植是指脾组织由于脾外伤或脾切除术所引起的自体种植.1937年,Shaw和Shafi[1]首次报道了1例发生于胸腔的异位脾种植.有关数据表明,67％的脾破裂患者会发生异位脾种植[2].其中多数病例没有临床症状,由术中病理或尸检发现,仅少部分病例出现腹部症状如腹痛、肠梗阻等.这无疑加大了临床诊断的难度.脾种植可发生于腹膜腔内的任何部位,但多发生于肠浆膜、肠系膜、大网膜、横膈膜、盆腔.发生于肝组织的脾种植较为罕见[3],易误诊为肝脏其他疾病,如肝脏肿瘤[4]、局灶性增生、血管瘤等.明确肝异位脾种植的特点,对该疾病的诊断与治疗具有重要意义.     

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌过程中肝脏胶原的动态观察

目的 动态观察大鼠肝脏癌变过程中胶原纤维的变化特点,为肝癌发病机制的研究提供参考。 方法 将50只雄性Wistar大鼠（体质量100～120 g）随机分为模型组和对照组,分别腹腔注射二乙基亚硝胺（DEN）50 mg/kg（加生理盐水至0.1 mL）或生理盐水（0.1 mL）,均每周2次,连续4周后改为每周1次,至14周停止。处死大鼠,取肝脏病变组织及周边正常组织,通过H-E染色、Masson染色、网状纤维染色观察其形态学改变;采用荧光定量PCR技术检测大鼠肝组织Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA的动态表达;采用明胶酶谱法检测大鼠肝组织中基质金属蛋白酶（MMP）含量变化。 结果 DEN诱癌开始5周后大鼠肝组织肝硬化形成,14周后诱导出肝癌。相应地,肝组织内胶原沉积持续增加,癌灶内胶原含量则明显少于癌周组织,并呈进行性减少;MMP-2、MMP-9在癌周组织和癌组织中的变化趋势则与胶原含量变化相反。 结论 DEN诱导的大鼠肝脏癌变过程中,胶原纤维在肝组织中沉积增加,在肝癌组织中则减少,随着肝癌的进展,癌组织内胶原进一步减少,提示肝硬化组织癌变过程中胶原纤维可能被降解。     

碱性磷酸酶对大鼠自体原位肝移植后急性肺损伤的保护作用

目的:肝移植术后并发症不仅包括肝脏本身的损害,亦能导致肝外多个器官功能衰竭,其中肺脏是较易且较早受累的器官.文章通过建立大鼠自体原位肝移植模型,观察肝移植术后肺部急性损伤情况及碱性磷酸酶的干预作用.方法:①实验于2007-05/10在南方医科大学附属南方医院实验动物中心、消化内科实验室完成,动物实验方法符合动物伦理学要求.②选用SD大鼠24只,按随机数字表法分为对照组、自体原位肝移植组和碱性磷酸酶组,每组8只.后两组建立大鼠自体原位肝移植模型,对照组开腹后游离肝叶后即关腹,碱性磷酸酶组于肝脏恢复血供前5 min自舌静脉注入碱性磷酸酶.③手术结束后2 h检测肺组织髓过氧化物酶活性、丙二醛含量、肺组织表面活性蛋白A含量及肺组织干湿重比值,并行肝脏、肺脏病理检查.结果:大鼠24只全部进入结果分析.①自体原位肝移植组、碱性磷酸酶组肺组织中髓过氧化物酶活性、丙二醛含量均高于对照组(P﹤0.01),碱性磷酸酶组肺组织中髓过氧化物酶活性、丙二醛含量均低于自体原位肝移植组(P﹤0.01).②碱性磷酸酶组、自体原位肝移植组肺组织表面活性蛋白A含量较对照组低,而碱性磷酸酶组较自体原位肝移植组有所升高.③自体原位肝移植组、碱性磷酸酶组肺组织干湿重比值均低于对照组(P﹤0.01),碱性磷酸酶组肺组织干湿重比值高于自体原位肝移植组(P﹤0.05).④病理结果显示,肝移植后大鼠肝、肺组织受到明显损害,而碱性磷酸酶能减轻损伤程度.结论:肝移植术后肺部确实存在急性损伤,而碱性磷酸酶对其具有保护作用.