胰腺癌组织中BRAF表达的初步研究

目的:了解BRAF基因在正常胰腺和胰腺癌组织中的表达水平。方法:6例胰腺癌标本取自胰腺癌手术患者,3例正常胰腺组织取自外伤性胰腺损伤需切除部分胰腺者。用Trizol法抽提每份组织的总RNA,分别进行紫外分光光度计测定、琼脂糖凝胶电泳及Lab on ch ip检测,对总RNA进行质控;应用实时定量PCR技术检测正常胰腺和胰腺癌组织BRAF的mRNA水平;应用W estern b lot检测BRAF的蛋白表达水平。结果:BRAF mRNA水平在正常胰腺组织中为0.001 016 7±0.000 25,胰腺癌组织中为0.002 606 2±0.001 09,上调2.56倍;W estern b lot显示,正常胰腺组织BRAF蛋白表达为6.70±2.50,胰腺癌组织为21.23±5.60,上调3.17倍。结论:胰腺癌组织中BRAF mRNA和蛋白表达水平均明显上调,其可能的调控机制及生物学效应还有待进一步研究。     

闭合性胰腺损伤17例诊治体会

目的　交流闭合性胰腺损伤的诊治经验 ,以提高治愈率和减少并发症。方法　回顾性分析 17例闭合性胰腺损伤患者的病情资料。结果　本组 17例 ,治愈 15例 ,死亡 2例。并发胰瘘 2例 ,创伤性胰腺炎 2例 ,胰腺假性囊肿 1例。结论　闭合性胰腺损伤诊断主要依靠 CT及血和腹腔穿刺液淀粉酶测定。选择合适的术式 ,术后予以积极的支持 ,抑胰酶 ,抗感染 ,保持通畅引流等综合治疗措施 ,可提高治愈率 ,减少并发症的发生。     

胰腺癌组织中BRAF基因和KRAS基因突变分析

目的探讨人胰腺癌组织中BRAF和KRAS基因突变情况及两者的关系。方法对36例胰腺癌组织及癌旁胰腺组织中BRAF基因15号外显子及KRAS基因12号密码子进行测序。结果 36例胰腺癌组织中,25例出现KRAS基因12号密码子突变(69.4%,25/36),3例出现BRAF基因V600E突变(8.3%,3/36),且均同时存在KRAS突变;11例KRAS野生型胰腺癌组织中未发现BRAF突变;癌旁胰腺组织中均未检出突变。结论胰腺癌组织中BRAF基因突变可能并非主要突变,且常与KRAS基因突变同时存在。     

246例原发性肝细胞癌术后预后的多因素分析

目的 探讨影响肝细胞癌(HCC)根治性术后生存和复发的因素.方法 回顾性分析246例行根治性切除术HCC患者的临床资料,用Cox风险比例模型进行多因素分析,筛选出有独立影响的预后因素.结果 246例患者的中位生存时间为18.3个月;术后3和5年累积生存率分别为43.0％和39.5％;术后3和5年累积复发率分别为69.4％和71.6％.多因素分析显示,对患者生存期有独立影响的因素包括肿瘤大小、有无包膜、门静脉癌栓和术中是否输血;而肿瘤大小、卫星灶、有无包膜、门静脉癌栓和术中是否输血则是独立影响术后复发的因素.结论 肿瘤大小、包膜、卫星灶、门静脉癌栓和术中输血是与HCC患者术后预后相关的独立因素,早期发现和术中规范操作是改善HCC患者预后的关键.     

肝内胆管癌外科治疗中国专家共识(2020版)

肝内胆管癌是一种原发性肝癌。近年来,该病发病率在国内外呈明显上升趋势。因发病隐匿,侵袭性强,且缺乏有效治疗方法,肝内胆管癌预后极差。国家科技部传染病防治重大专项课题专家组基于国内外本领域研究获得的循证医学证据,并结合符合我国国情的临床实践,特制订《肝内胆管癌外科治疗中国专家共识(2020版)》。该共识针对肝内胆管癌的危险因素、发病机制、病理特征、临床表现、诊断方法、疾病分期、外科治疗、辅助治疗,以及其他局部、区域性和系统性治疗进行系统阐述,旨在规范、普及和提高对肝内胆管癌的诊断和多学科治疗水平,改善该病总体预后。     

三镜联合治疗胆总管结石合并胆囊结石的体会(附34例报告)

目的:探讨三镜联合治疗胆总管结石合并胆囊结石的手术方法及疗效。方法:回顾分析2006年1月至2008年6月,我院应用腹腔镜、胆道镜、十二指肠镜联合治疗34例胆总管结石合并胆囊结石患者的临床资料。结果:34例手术均获成功,无中转开腹及死亡病例;三镜联合累计手术时间90～245min,平均130min,术中出血20～180ml,平均70ml,术后住院7～15d,平均9.3d;随访6～24个月,平均11.3个月,无结石复发及严重并发症发生。结论:三镜联合冶疗胆总管结石合并胆囊结石具有创伤小、功能恢复快及结石除净率高等优点。     

胰管结石的临床特点及外科处理

目的探讨胰管结石的临床特点及外科处理策略。方法回顾性分析2002年1月至2007年12月间收治的14例胰管结石病人临床资料。结果14例病人均有上腹痛症状,11例合并慢性胰腺炎,14例病人中,13例病人行手术治疗,1例放弃手术。其中10例行胰管空肠Roux—en-Y吻合术;1例行保留十二指肠的胰头切除术;1例行胰体尾加脾切除术,1例胰管切开取石,胰管内置T型管引流,术后症状均有不同程度缓解。结论上腹痛及合并慢性胰腺炎是胰管结石的主要临床特点,B超、CT及MRCP是诊断胰管结石最主要的手段,手术治疗是胰管结石的最佳方法。手术方式应该根据病人情况进行选择。     

人BRAF野生型及V600E突变型真核表达载体的构建及表达

目的:构建BRAF野生型和V600E突变型真核表达载体;转染并筛选稳定表达BRAF的胰腺癌细胞株,为探讨BRAF V600E突变在胰腺癌发生发展中的作用提供合适的细胞模型.方法:将BRAF野生型及V600E突变型cDNA克隆于真核表达载体pCMV-Myc中,构建pCMV-Myc-BRAFW)及pCMV-Myc-BRAFV600E重组质粒,酶切鉴定、测序证实序列正确后,利用脂质体将重组质粒转染胰腺癌细胞Panc-1,经G418培养筛选获得抗性细胞克隆,用RT-PCR和Western blot鉴定野生型和V600E突变型BRAF基因在Panc-1细胞中的表达.结果.酶切鉴定和序列分析证实,重组克隆pCMV-Myc—和pCMV-Myc—BRAFV600E序列正确,RT-PCR和Western blot结果显示G418筛选获得的转基因Panc-1细胞稳定表达BRAF和BRAF V600E.结论:成功构建了pCMV-Myc-BRAFW和pCMV-Myc-BRAFV600E真核表达载体,建立了稳定表达BRAF和BRAF V600E的胰腺癌细胞株.稳定表达BRAF和BRAF V600E的胰腺癌细胞株.稳定表达BRAF和BRAF V600E的胰腺癌细胞株.     

Effect of p120 catenin silencing on biological behaviors of PANC-1 cells

This study examined the possible role of p120ctn in the pathogenesis and development of pan-creatic cancer.PANC-1 cells,a kind of human pancreatic carcinoma cell line,were cultured in this study.p120ctn was immunocytochemically detected in PANC-1 cells.The recombinant lentivirus vector was constructed to knock down the p120ctn expression of PANC-1 cells.Real-time quantitative PCR (RQ-PCR) and Western blotting were used to determine the expression of p120ctn and E-cadherin in PANC-1 cells after p120ctn knockdown.The adhesion,invasion and migration capacity of PANC-1 cells after p120ctn knockdown was detected by cell adhesion,invasion and migration assays.Cell growth was measured by the MTT method.Cell cycle and apoptosis were analyzed by fluorescence-activated cell sorting.The results showed that p120ctn knockdown led to significantly down-regulated E-cadherin and a reduced cell-to-cell adhesion ability in PANC-1 cells.shRNA-mediated knockdown of p120ctn reduced invasion and migration capacity of PANC-1 cells,inhibited cell growth,caused a significant decrease in the percentage of cells in G1,an increase in S,and promoted apoptosis of PANC-1 cells.It was concluded that p120ctn plays a pivotal role in the proliferation and metastasis of pancreatic carcinoma,suggesting that p120ctn is a novel target for pancreatic carcinoma treatment.