胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶和DNA拓朴酶在人骨肉瘤中的表达及其与预后的关系

目的探讨骨肉瘤组织中胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和DNA拓朴酶Ⅱ(Topo Ⅱ)的表达及其与预后的关系.方法应用免疫组化SP法检测GST-π、Topo Ⅱ在40例骨肉瘤中的表达,并结合临床资料分析其对预后的影响.结果 40例骨肉瘤中GST-π和Topo Ⅱ的阳性表达率分别为82.5%(33/40)和52.5%(21/40),其中术前化疗组Topo Ⅱ阳性表达率为38.5%(5/13),显著低于术前无化疗组77.8%(21/27)(P<0.05),GST-π的阳性表达率在两组间无显著差异;GST-π和Topo Ⅱ的阳性表达率与患者的预后显著相关.结论 GST-π主要参与骨肉瘤原发性耐药,Topo Ⅱ不仅参与骨肉瘤原发性耐药,同时也参与骨肉瘤继发性耐药;GST-π和Topo Ⅱ是影响骨肉瘤预后的重要因素,可能成为评估骨肉瘤预后的有价值的指标.     

食管类癌三例

食管类癌是一种少见的低度恶性神经内分泌肿瘤。国内外报道很少。现将我院收治的3例报道如下。     

细胞毒性蛋白检测在移植肝急性排斥反应诊断中的意义

目的检测移植肝组织中穿孔素、颗粒酶B及细胞毒颗粒相关蛋白（TIA-1）的表达情况，评价其在肝移植术后急性排斥反应诊断及鉴别诊断中的意义。方法应用免疫组织化学方法检测肝移植术后急性排斥组和非排斥组患者移植肝组织中穿孔素、颗粒酶B及TIA-1的表达情况；结合组织形态学观察，分析肝组织中不同区域的阳性细胞数量。结果肝移植术后共行移植肝组织活检108例次，其中排斥组62例次，非排斥组46例次。两组移植肝汇管区及小叶内表达穿孔素、颗粒酶B及TIA-1的阳性细胞数比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；两组移植肝胆管或血管中表达阳性的细胞浸润率比较，差异也有统计学意义（P〈0．05）。表达穿孔素和颗粒酶B的阳性细胞数与排斥反应组织学分级及肝功能生化指标（天冬氨酸转氨酶和γ-谷酰转肽酶）升高成正相关。结论检测移植肝组织中穿孔素、颗粒酶B及TIA-1的表达对急性排斥反应的诊断及分级具有重要意义。     

鼠双微体2与核糖体蛋白L23在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:研究胃癌中鼠双微体2(murine double mimute 2,MDM2)与核糖体蛋白L23(ribosomal protein L23,RPL23)的表达及其临床相关性,初步探讨他们在胃癌发生发展中的生物学意义.方法:采用免疫组织化学染色方法检测90例胃癌组织和30例胃癌旁正常组织中MDM2和RPL23蛋白的表达;统计学分析他们表达的相关性及其与临床病理因素、患者生存时间的联系.结果:胃癌组织中MDM2表达阳性率与癌旁对照组比较显著性增高(62.2%vs 40.0%,P0.05),而RPL23蛋白表达显著性降低(30.0%vs 63.3%,P0.05).MDM2和RPL23在胃癌中的表达呈负相关(r=-0.23,P=0.029).多因素分析显示MDM2高表达和RPL23低表达、淋巴结转移、肿瘤入侵深度、肿瘤的大小对胃癌患者生存预后的影响有统计学意义.结论:MDM2、RPL23的表达与胃癌的发生发展具有一定的相关性,针对两者的信号通路或许可作为胃癌预后的标志和新型治疗靶标.     

脂多糖对枯否细胞中CD14、ToLL样受体4表达的影响及其意义

目的：探讨脂多糖（LPS）对枯否细胞（KC）CD14和ToLL样受体4（TLR4）表达的影响。方法：应用不同浓度（10mg/L-1μg/L）或同一浓度（10mg/L）的LPS在不同时间（0．5－24．0h）刺激培养大鼠48h的KC并测定其CD14和TLR4、肿瘤坏死历子（TNF）和白细胞介素－6（IL－6）表达的变化。结果：LPS能明显上调KC中CD14、TLR4表达，且其表达量与LPS浓度（10mg/L,CD14/GAPDH=0.73,TLR4/GAPDH=0.63)及时间呈正相关，其中CD14的表达在3－6h左右达到高峰CD14／GAPDH＝0．86）；同时，KC产生的活性介质能明显上调其CD14、TLR4的表达（CD14／GAPDH＝0．70，TLR4／GAPDH＝0．59）。结论：LPS及其刺激KC后产生的活性介质与CD14、TLR4表达密切相关，在1－3h的CD14、TLR4表达的增强可能主要由LPS引起，而此后的进一步增强可能与KC释放的细胞因子密切相关。     

CD14的表达及其在库普弗细胞激活中的意义

目的　探讨LPS对库普弗细胞 (KC)CD14表达的影响及CD14在LPS激活KC中的意义。　方法　在分离培养大鼠KC的基础上 ,应用免疫组织化学染色、RT PCR等方法分别测定CD14表达的变化、培养KC中上清中TNFα、IL 6和NO浓度。　结果　 (1)不同浓度的LPS使KC中CD14mRNA的表达及其蛋白合成明显增加 ,其表达量与LPS浓度呈剂量依赖性相关 ;(2 )同一浓度的LPS可使KC中CD14mRNA的表达及其蛋白合成明显增加 ,且在 3～ 6h左右达到高峰 ;(3)LPS刺激KC后产生的活性介质能明显上调新培养KC中CD14mRNA的表达及其蛋白合成 ;(4)在血清存在的情况下加入抗CD14单抗或在无血清的情况下单独加入LPS ,可明显降低KCTNFα、IL 6和NO的释放。而后者如果同时加入LBP ,则可明显上调培养KC中的TNFα、IL 6和NO浓度。　结论　 (1)LPS及其刺激KC后产生的活性介质与CD14mRNA的表达及其蛋白合成密切相关 ,并推测在实验 1～ 3h的CD14表达的增强可能主要由LPS引起 ,而此后CD14表达的进一步增强可能与KC释放的细胞因子密切相关 ;(2 )低浓度LPS对KC的激活是CD14依赖的。     

丝裂素原激活蛋白激酶途径在内毒素激活枯否细胞中的作用

目的 :探讨丝裂素原激活蛋白激酶 (MAPKs)途径在脂多糖 (L PS)激活枯否细胞 (KC)中的作用。方法 :用 3种 MAPK通路阻滞剂 ,测定其后培养 KC中肿瘤坏死因子 α m RNA(TNFα m RNA)、白介素 6m RNA (IL 6 m RNA )以及诱生型一氧化氮合酶 (i NOS)表达和 TNFα、IL 6以及 NO的释放。结果 :1ERK1/ 2途径抑制剂 (PD0 980 5 9)对 KC中 TNFα m RNA表达和 TNFα的释放影响极小 ,而对 IL 6m RNA和 i NOS的表达以及 IL 6和 NO的释放有明显的抑制作用 ;2 p38MAPK途径抑制剂 (SB2 0 35 80 )对KC中 TNFα m RNA和 IL 6 m RNA表达以及 IL 6和 TNFα的释放影响极小 ,而对 i NOS的表达和 NO的释放有明显的抑制作用 ;3当用 SB2 0 2 4 74抑制整个 MAPK途径时 ,KC中 TNFα、IL 6 m RNA和 i NOS的表达和 TNFα、IL 6以及 NO的释放均明显降低。结论 :TNFα m RNA表达和 TNFα的释放主要受MAPK途径中的 JNK/ SAPK途径的调节 ,IL 6 m RNA表达和 IL 6的释放主要受 MAPK途径中的 ERK1/ 2和 JNK/ SAPK通路的调节 ,而 i NOS的表达和 NO的释放可能与以上 3种途径均有关系。     

烧伤内毒素血症肝损害与相关炎性因子及调节蛋白的表达关系

Objective To study the pathogenesis of early liver injury following burns combined with en dotoxemia.MethodsRats were subjected to 20% TBSA Ⅲ degree burn injury combined with intraperiton eal injection of lipopolysaccharide(LPS).Various parameters were observed in the present experiment as follows①pathomorphological observation by LM and EM;②tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin6(IL-6),nit ric oxide(NO) levels by biochemical methods;③in situ expression of TNF-α,IL 6 and inducible nitric oxide synthase(iNOS) by IHC;④in situ expression of TNF-α mRNA,IL-6 mRNA and lipopolysaccharide binding protein(LB P) mRNA by ISH.ResultsIt was shown that there were sinusoid reaction,Kupffer cells(KCs) activation and degeneration,necrosis of hepatic cells(HCs),and platelets aggregation,fibrins d eposition and polymorphonuclear leucocytes(PMNs) attachment in sinusoid.Meanwhil e,serum TNF-α,IL-6,NO levels were mar kedly higher in animal s following burn injury combined with endotoxin challenge.These mediators were m ainly localized in sinusoid endothelial cells(SECs),KCs,and TNF-α mR NA,IL-6 mRNA was mainly distributed in KCs,PMNs,as well as macrophage s(MPs).In addition,LBP mRNA was mainly localized in cytoplasma of hepatocytes.ConclusionsIt is demonstrated that the early liver injury after burns combined with endotox emia may be closely associated with the excessive expression of inflammatory med iators and LBP.     

大鼠肝脏枯否细胞分离、培养与鉴定

目的　研究大鼠肝Kupffer细胞 (KC)分离、培养和鉴定。方法　用Ⅳ型胶原酶离体灌注、差速离心分离大鼠KC ,再经贴壁培养 ,并应用免疫组织化学、吞噬功能实验、电镜等方法进行鉴定。结果　此法能成功地获得较高纯度的KC ,KC的获得率为每只大鼠 ( 7～ 10 )× 10 6 ,贴壁后细胞呈典型的星形或多角形 ,免疫组织化学染色显示lysozyme阳性 ,胞浆内见吞噬的latexbeads颗粒 ,电镜观察显示细胞表面伪足及微绒毛发达 ,胞浆内含有大量的溶酶体及吞噬的latexbeads颗粒。结论　该方法简单易行 ,细胞纯度较高 ,可进一步用于KC的其它方面的研究     

人耳蜗电位的引导

近年来在耳科临床检查和听觉生理功能的研究中由于采用了电子计算技术,得到了不少有价值的新资料。采用叠加平均技术(即叠加仪)记录的人的耳蜗电图(Electrococh-leogram,ECochG)对于听觉功能的客观测定、耳聋和耳病的鉴别诊断、治疗耳聋疗效的估计与内耳手术即时效果的了解等,都有较大的参考价值。我们使用的全部仪器、设备和所需的物品都为国产或自制。现将引导人耳蜗电位的方法及所记录到的耳蜗电图,作一初步的介绍。