黄芩苷下调p-STAT3诱导神经干细胞向神经元分化*

目的观察黄芩苷促进神经干细胞（NSCs）体外向神经元分化过程中信号传导子与转录激活子(STAT)的磷酸化蛋白表达水平。方法从孕14～15 d的SD大鼠胚胎大脑皮质中分离NSCs,体外培养传代,实验用第3代NSCs。随机分为对照组,低、中、高黄芩苷组（分别含黄芩苷7.5、15、30μmol/L）,白血病抑制因子（LIF）+碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）组和黄芩苷+LIF+bFGF组。培养6 d后,细胞免疫荧光化学染色法观察各组中微管相关蛋白2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达水平。培养2 h与6 d后,用Western blot方法观察各组中STAT3蛋白磷酸化水平。结果黄芩苷可使NSCs中MAP-2表达增加,GFAP表达减弱;LIF+bFGF可促进NSCs中GFAP表达增加;黄芩苷可抑制LIF+bFGF引起的NSCs中GFAP的表达增加。黄芩苷可下调NSCs中STAT3蛋白磷酸化水平;LIF+bFGF可上调NSCs中STAT3蛋白磷酸化水平;黄芩苷可抑制LIF+bFGF引起的NSCs中STAT3蛋白磷酸化水平的上调（P＜0.05）。结论黄芩苷可诱导NSCs向神经元分化并抑制其向星形胶质细胞分化,该作用可能经下调NSCs中STAT3的磷酸化水平来实现。     

同种异体与自体血清对骨髓基质干细胞的增殖效应

背景：传统的细胞培养方法大多采用胎牛血清作为营养支持,其存在传播疾病的风险和免疫排斥反应。寻找胎牛血清替代物并建立规范、安全、高效的成人骨髓基质干细胞体外培养体系刚刚起步,有待进一步研究。 目的：探讨AB血清、自体血清替代胎牛血清体外培养人骨髓基质干细胞的效果。 方法：从成人骨髓穿刺液中分离人骨髓基质干细胞,分别用含体积分数10%AB血清、自体血清和胎牛血清的基础培养基培养人骨髓基质干细胞,取第3代细胞进行相关指标检测。 结果与结论：相差显微镜下见AB血清组细胞最先达到汇合;流式细胞仪检测细胞表面抗原,各组均符合骨髓干细胞表型,纯化程度良好;Alamar Blue法显示AB血清组平均荧光强度最高,促增殖效率最高;Annexin V-FITC法显示各组细胞凋亡率均在5%以下,生长状态良好;碱性磷酸酶染色、钙结节和油红O染色结果显示,各组细胞均保持了成骨、成脂分化能力。AB血清对人骨髓基质干细胞的增殖作用较胎牛血清、自体血清明显增强。AB血清有望替代胎牛血清建立符合骨组织工程临床应用要求的体外成人骨髓基质干细胞培养体系。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

改良封闭式负压引流技术在骨科创面治疗中的应用

目的通过与常规封闭式负压引流技术(vacuum sealing drainage,VSD)进行比较,探讨改良VSD在骨科创面治疗中的优越性。方法 2008年3月-2010年4月,共治疗37例42处创面,其中17例20处创面采用常规VSD治疗(常规组);20例22处采用改良VSD治疗(改良组),即在常规VSD敷料中加入1根冲洗管,进行持续灌注冲洗。两组患者性别、年龄、病程、创面部位及创面范围等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。结果改良组泡沫敷料维持时间较常规组长(t=2.70,P=0.01)。常规组术后15例(88%)进行注射器冲管,改良组仅1例(5%),差异有统计学意义(χ2=3.80,P=0.04)。改良组术后更换泡沫敷料次数为(1.0±0.1)次,较常规组(2.2±0.6)次少(t=2.90,P=0.01)。改良组费用为(6 330±550)元,较常规组(12 990±1 120)元少(t=2.70,P=0.01)。结论改良VSD延长了泡沫敷料使用时间,减少了患者更换敷料的次数,降低了治疗费用。     

无创尾吊大鼠心血管功能监测新方法

目的：运用植入式遥测系统建立一种在体的实时监测无创尾部悬吊大鼠心血管生理参数模型.方法：将SD雄性大鼠随机分为对照组,尾吊组,每组5只.手术植入遥测子后记录尾吊前后各组大鼠血压（BP）、心率（HR）、心电图（ECG）变化.结果：所有大鼠在手术14d后完全恢复,体质量显著增加;尾吊组大鼠在尾吊0～5min时BP,HR值逐渐上升,随后逐渐下降,5.5h后维持稳定.其中BP值高于尾吊前及对照组,HR未出现类似状况.RR间期在尾吊0～5min下降,之后逐渐升高至尾吊前水平,对照组大鼠各项参数值无显著变化.结论：植入式遥测系统适用于监测尾吊大鼠心血管生理参数变化,为进一步研究失重引起的心血管功能变化提供了可靠的技术方法和实验依据.     

严重跟骨关节内骨折的治疗体会

[目的]探讨严重跟骨关节内骨折的治疗体会.[方法]26例30足跟骨骨折,采用切开复位钢板内固定治疗,术后对患足进行功能评价,观察术后并发症的发生情况.[结果]术后2足出现浅部切口感染,3足出现创伤性关节炎.按照Maryland足部评分方法,优16足,良10足,可4足,优良率86.7％.[结论]切开复位钢板固定治疗严重跟骨关节内骨折可以取得满意的疗效,但应注意手术操作技巧,减少术后并发症的出现.     

反相高效液相色谱法测定盐酸格拉司琼葡萄糖注射液的含量及有关物质

目的 建立盐酸格拉司琼葡萄糖注射液含量及有关物质的反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定法.方法 采用C18色谱柱,磷酸盐缓冲液(pH值2.0)(取无水磷酸二氢钠15.6g溶解于900 ml水中,用磷酸调节pH值至2.0,加水稀释至1000 ml)-甲醇-四氢呋喃(75∶24∶ 1.1)为流动相,流速1.2 ml/min,检测波长300 nm.结果 盐酸格拉司琼与杂质A、B、C、D及5-羟甲基糠醛的分离度均符合要求,系统适用性良好,盐酸格拉司琼在0.4426 ～2.213 μg范围内线性关系良好,方法平均回收率为100.1％(相对标准偏差=0.26％).结论 该法简便、准确,可用于盐酸格拉司琼葡萄糖注射液的主药含量及有关物质测定.     

高糖状态下心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达变化的观察

目的探讨高糖对大鼠心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法采用胰酶消化法和差速贴壁分离法获取心肌成纤维细胞,采用正常糖(5.5mmol/L,对照组)和高糖(25mmol/L,高糖组)干预。用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白水平的变化。结果与对照组比较,高糖刺激12h可使心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达增加,Ⅰ、Ⅲ前胶原mRNA表达在12h升高,在24h达高峰,Ⅰ型前胶原mRNA升高幅度高于Ⅲ型前胶原mRNA;高糖刺激48h可使Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,Ⅰ型胶原蛋白升高幅度高于Ⅲ型胶原。结论高糖可促进大鼠心肌成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原。     

HPLC法测定注射用兰索拉唑的有关物质及主药含量

目的:建立注射用兰索拉唑含量及有关物质的反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定法.方法:采用Agilent Eclipse XDB-C8色谱柱,三乙胺水溶液[取三乙胺10 ml,加水350 ml,以磷酸(1→10)调节pH至5.5]-甲醇(36:65)为流动相,流速:1.0 ml·min-1,检测波长284 nm.结果:兰索拉唑与杂质A、B、C、D、E的分离度均符合要求,系统适用性良好,兰索拉唑在0.303～2.725 μg范围内线性关系良好,方法平均回收率为99.8%(RSD=0.64%).结论:该法简便、准确,可用于注射用兰索拉唑的主药含量及有关物质测定.     

过伸双髁胫骨平台骨折的特点及疗效观察

目的探讨过伸双髁胫骨平台骨折(hyperextension bicondylar tibial plateau fractures,HEBTPs)的特点及其与非过伸双髁胫骨平台骨折(non-HEBTPs)的临床疗效比较。方法2014年6月至2017年5月共收集82例累及双髁的胫骨平台骨折患者,其中63例(63膝)患者(76.8%)为non-HEBTPs,19例(19膝,23.2%)为HEBTPs,男49例,女33例,年龄(48.3±10.9)岁(22~76岁)。19例HEBTPs中,4例为过伸外翻畸形,9例为过伸内翻畸形,6例为单纯过伸型损伤。均采用切开复位内固定结合植骨/或不植骨。评价HEBTPs组和non-HEBTPs组术前并发症发生率,术后感染、创伤性骨关节炎发生率,术后评估膝关节活动度,采用数字等级量表(numeric rating scale,NRS)评估疼痛程度,采用肌肉骨骼功能评估简表(short musculoskeletal function assessment,SMFA)评估功能,根据术后X线评估骨折愈合、膝关节力线。结果所有患者均获得随访,随访时间15.4个月(12~22个月)。骨折临床愈合时间12.6周(12~16周)。至末次随访,所有患者膝关节活动度正常,过伸双髁和非过伸双髁胫骨平台骨折术前并发症发病率分别为36.8%和15.8%,差异无统计学意义;19例HEBTPs组腘动脉损伤、腓总神经损伤和需要修复的韧带损伤的发生率分别为21.1%、26.3%和31.6%,而63例non-HEBTPs组相对应的合并症发生率分别为3.2%、4.8%和9.5%,差异均无统计学意义;HEBTPs组和non-HEBTPs组术后12个月NRS疼痛评分分别为(3.89±1.9)分和(2.76±1.88)分,差异无统计学意义;两组术后12个月SMFA得分为(27.27±19.44)分和(17.09±15.87)分,术后12个月HEBTPs患者SMFA得分高于non-HEBTPs患者,具有统计学意义,创伤后骨关节炎发生率高。结论过伸型胫骨平台骨折类型特殊,损伤程度不能低估,需要注意软组织损伤(韧带、血管与神经),治疗效果较差。