利用种特异性PCR快速鉴定新疆酸马奶优势菌群

建立了一种快速准确鉴定酸马奶中乳酸菌优势菌群的种特异性PCR技术。据资料报道,酸马奶中已知的6种优势菌主要集中在植物乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜酸乳杆菌3大类群。首先,针对属于同一类群内的两种优势菌设计2对种特异性引物,采用3组PCR实验验证引物的特异性。然后以酸马奶中提取的总DNA为模板,利用经验证的6对种特异性引物鉴定2份新疆酸马奶样品中的优势菌群。结果表明,新疆酸马奶中含有Lactobacillus(L.)helveticus,L.pentosus,L.plantarum,L.acidophilus和L.paracasei,与前人报道结果一致。本研究建立的种特异性PCR技术不仅能够快速鉴定酸马奶中乳酸菌优势菌群组成,同时可为其它发酵制品中3大类群乳酸菌鉴定提供有效的方法。     

乳酸菌发酵液中有机酸的毛细管电泳法分析

通过试验确定了毛细管电泳法分离检测乳酸、柠檬酸、丙酮酸、异柠檬酸、苹果酸、α-酮戊二酸、富马酸和草酸等8种有机酸的分析条件。优化后的缓冲液组成为：300mmol／L磷酸盐、0．5mmol／L十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）和18％（vol）甲醇,缓冲液pH值为8．0;毛细管电泳采用50mbar、50s压力进样,分离电压-15kV,检测波长200nm,检测温度20℃。迁移时间和峰面积相对标准差分别小于0．5％和10％,样品加标回收率为81．4％-108．5％,该方法简便、快速、准确,可用于乳酸菌发酵过程中有机酸代谢图谱的测定。     

干酪乳杆菌05—21在酸、胆盐和渗透压胁迫条件下的同源抗性和交叉抗性反应研究

对干酪乳杆菌在干酪生产和人体胃肠道环境中主要面临的酸、胆盐和渗透压3种胁迫条件下的同源抗性和交叉抗性进行研究.首先确定酸、胆盐、NaCl胁迫的亚致死水平和致死水平分别为pH值为5.0和pH值为3.5,质量浓度为0.5 g/L和3 g/L,20 g/L和180 g/L.同源抗性实验表明,酸诱导2h存活率可提高23倍,胆盐诱导提高25倍,NaCl诱导提高75倍.交叉抗性实验表明,酸诱导后茵体在胆盐、NaCl中存活率分别提高20倍和11倍:而NaCl诱导后茵体在胆盐中存活率提高250倍,但却不能诱导茵体的抗酸能力.稳定期茵体具有比对数期菌体更强的抗胁迫能力.实验结果为优化干酪生产工艺,提高干酪乳杆菌在胃肠道中的存活率提供了理论基础.     

茶叶冲泡中铅浸出规律研究

研究了茶叶中重金属污染物铅在冲泡中的浸出规律,并根据其浸出情况进行了危害性分析。结果表明,茶叶中的铅在各种冲泡条件下浸出率为5%～50%,在80℃、1∶50、5min的常规冲泡条件下,铅浸出率为20%左右。茶叶中铅浸出率与冲泡温度和冲泡时间均呈正相关关系,与冲泡茶水比呈负相关关系。     

咸蛋渗透传质与品质的研究

影响鸭蛋腌制成熟的一些因素进行正交试验,并从渗透传质的角度对其进行分析,得出影响咸蛋成熟的因素中,磷酸影响较大(在盐的浓度一定时),其次是香辛料,试验证明,香辛料对改善鸭蛋的风味有重要作用。     

片球菌素BM-1免疫蛋白对甘露糖磷酸转移酶受体识别特异性研究

利用牛津杯法筛选到对片球菌素BM-1敏感的植物乳杆菌WQ0815和肠膜明串珠菌05-43。并利用Nisin诱导表达系统,在乳酸乳球菌NZ9000中诱导表达两敏感菌株的甘露糖磷酸转移酶系统IICD组分,抑菌实验表明不同来源的IICD组分皆可被片球菌素BM-1识别。进一步将片球菌素BM-1同源免疫蛋白分别与两种IICD组分同时在乳酸乳球菌中表达,抑菌实验表明:免疫蛋白可识别植物乳杆菌来源的IICD组分,不能识别肠膜明串珠菌来源的IICD组分。研究结果为IIa类细菌素的同源免疫蛋白对受体存在特异性识别提供了直接证据。     

气体射流冲击烤制"北京烤鸭"不同加工技术与鸭皮中多环芳烃含量变化的研究

采用气体射流冲击加热新技术烤制"北京烤鸭",在保证烤鸭品质的前提下,改变烤制温度,运用高效液相荧光检测技术研究不同烤制温度的烤鸭鸭皮中高致癌性多环芳烃(PAHs)含量的变化.结果显示,在170、190、2100C三种不同烤制温度下,苯并[a]芘含量在0.13～0.451xg/kg,二苯并[a,h]蒽含量在0.48～2.01μg/kg,7,12一二甲基苯并[a]蒽含量为1.28～3.19μg/kg,苯并[a]芘含量远远低于国家标准5μg/kg.高烤制温度下(210%)各PAHs的产生量要显著高于低温(170、190℃)烤制产生的量,在此技术下低温烤制产品安全性更高于高温烤制产品.     

植物乳杆菌ⅡD基因突变株的构建及对Ⅱa类细菌素敏感性分析

采用同源重组技术,对Ⅱa类植物乳杆菌素LB-B1敏感的植物乳杆菌WQ0815中甘露糖磷酸转移酶系统(Ell.Man)中的 ⅡD组分进行突变,利用牛津杯法分析了植物乳杆菌WQ0815 ⅡD组分突变前后对植物乳杆菌素LB-B1的敏感性变化.结果表明,突变株对植物乳杆菌素LB-B1产生抗性,说明敏感菌株中Ell.Man的 ⅡD组分是植物乳杆菌素LB-B1发挥抑茵作用时的结合位点.     

气相色谱法测定酱油中的4-甲基咪唑

采用气相色谱法测定了酱油中4-甲基咪唑的含量。样品在层析柱中用二氯甲烷洗脱,洗脱液浓缩后直接进行气相色谱分析。采用HP-5毛细管柱和NP检测器测定4-甲基咪唑的含量。方法的线性范围为5.160～1.548×102μg/L,线性相关系数0.9993,平均回收率为86.4%～93.2%,相对标准偏差(RSD)为1.7%～3.2%,酱油中4-甲基咪唑的检出限为0.1μg/L。方法准确、可靠,分析结果令人满意。     

乳酸菌启动子探针载体的构建及其功能验证

以β-葡萄糖醛酸酶基因gusA作为报告基因,在乳酸菌表达载体pMG36e基础上,利用平滑化技术删除表达栽体自带启动子P32,构建了乳酸菌启动子探针载体pMGPP.将已知的嗜酸乳杆茵S-layer蛋白基因启动子slpA插入到pMGPP无启动子的gusA基因上游验证其功能,GUS染色结果表明:pMGPP在大肠杆茵KW1和植物乳杆菌WQ0815中皆具有启动子探针载体的功能.因此,具有自主知识产权的启动子探针载体pMGPP的构建不仅为筛选乳酸菌启动子提供了有效的工具,同时为高效乳酸菌表达载体的构建奠定基础.