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牛IgG轻链的分离纯化及其多克隆抗血清的制备 总被引:1,自引:1,他引:0
实验应用凝胶过滤和盐析等方法直接从牛初乳中分离纯化IgG,并应用化学方法断裂回收IgG轻链。分离纯化获得分子量约27.66 ku的IgG轻链蛋白溶液,蛋白质含量为0.105 mg.L-1,浓缩后免疫家兔,获得抗轻链抗血清,效价>11∶6,免疫双扩散和免疫电泳均为特异性条带,表明得到了纯化的IgG轻链及其特异性抗血清。 相似文献
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鹅细小病毒VP1与VP3非重叠序列的克隆与原核表达 总被引:8,自引:2,他引:6
根据鹅细小病毒GPVH1株基因组核苷酸序列设计了一对引物,对其结构蛋白VP1与VP3非重叠核苷酸序列进行PCR扩增,并克隆到表达性载体pGEX-6p-1,经酶切鉴定筛选出阳性克隆,并转化到大肠杆菌BL21(ED3)plysS进行原核表达,并用SDS—PAGE鉴定,结果表明融合蛋白在表达性细菌BL21中重获得了高效表达。 相似文献
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牛IFN-α基因高效表达及纯化的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
基于对RNA二级结构的预测和密码子偏性计算,通过计算机辅助软件进行牛IFN-α基因优化,经人工合成优化后的基因与pWL表达载体连接后诱导表达,并对表达条件进行优化。SDS-PAGE分析表明,其产物分子量约为17ku,最优表达条件下蛋白表达量占菌体总蛋白的33%,表达产物以包涵体形式存在。经过包涵体溶解、初步复性后利用CM Sepharose Fast Flow离子交换层析柱作为蛋白质复性系统,采用梯度法进行牛α-干扰素包涵体蛋白质的纯化复性。结果表明,梯度离子交换层析法能有效地复性牛α-干扰素包涵体,复性后的重组牛α-干扰素的纯度达95%,通过离子交换层析柱纯化和复性后,重组牛α-干扰素在MDBK/VSV细胞系上的抗病毒活性为5.56×10^6 u/mg。 相似文献
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【目的】建立新型古树名木档案管理系统,解决在古树名木档案管理工作中档案材料类型和数量越来越多、传统档案管理易出错和效率低下的问题。【方法】利用RFID实现对档案存放、查阅、盘点和失效的管理,可以有效减少人工操作环节,提高操作效率,实现档案的自动化、智能化管理。结合各种传感器,实现对档案库房动态环境的实时监测,为古树名木档案提供良好的存储环境。【结果】利用RFID和物联网技术,结合古树名木资源调查、认定保护、养护复壮、日常管理、迁移审批等信息资料,建立了基于RFID技术的济南市古树名木智慧档案库房管理系统。【结论】基于RFID技术的济南市古树名木智慧档案库房管理系统实现了基础设施稳定先进、数据信息全面准确、业务应用灵活、规范标准科学统一的古树名木档案智慧管理模式。 相似文献
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猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段克隆序列分析及原核表达 总被引:1,自引:0,他引:1
猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白可诱导中和抗体,是主要保护性抗原,N端抗原位点B和C在猪呼吸道冠状病毒(PRCV)中缺失。体外扩增TGEVS基因B、C抗原位点357bp片段(TS)。核苷酸序列与氨基酸同源性分析表明该片段较为保守。将TS克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,转化大肠杆菌中。经IPTG诱导后,SDS—PAGE分析目的蛋白与谷胱苷肽硫转移酶(GST,大小约为26ku)融合后大小约为40ku,目的蛋白分子量约为13.2ku,优化表达条件后表达量达37.9%。 相似文献