PCR-RFLP检测Apo CⅢ基因T-455C多态性的反应条件优化

目的：探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）反应体系中各种成分的优化，建立检测载脂蛋白CⅢ（ApoCⅢ）T-455C多态性的方法。方法：采用PCR—RFLP检测ApoCⅢ基因T-455C多态性，同时通过对参与反应体系的成分，在一定范围内设置不同的浓度或参数组，进行正交试验和单因素逐项试验，观测各成分在不同条件下对结果的影响。结果：ApoCⅢ基因检测到3种基因型。PCR反应体系中不同模板含量、引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTP浓度、Mg^2＋浓度、退火温度和酶切体系中PCR产物量、内切酶量、酶切时间等对反应结果均有不同程度的影响。结论：该研究建立的PCR—RFLP体系检测Apo CⅢ基因T-455C多态性技术，是一种高效快速、简单敏感、准确可靠的分析方法，适合常规实验室开展。     

毛细管电泳-激光诱导荧光法分离四种神经递质类氨基酸的条件优化

目的探讨毛细管电泳分离神经递质类氨基酸的影响因素。方法采用毛细管电泳法分离4种神经递质类氨基酸的荧光素异硫氰酸酯(FITC-AAs)衍生物,分析电泳缓冲液、表面活性剂以及衍生条件对分离的影响。结果电泳缓冲液的组成、浓度、pH值、表面活性剂以及衍生条件对4种FITC-AA衍生物分离有很大影响,在以75 mm ol/L,pH 9.42硼酸盐含100 mm ol/LSDS为电泳缓冲液,50 mmol/LpH 9.8硼酸盐为衍生缓冲液,4种FITC-AA衍生物20 min内得到很好分离。结论通过条件优化,毛细管电泳-激光诱导荧光技术分离神经递质类氨基酸的分离效果能得到很大提高。     

微流控芯片电泳测定血清小而密低密度脂蛋白及临床应用价值

目的建立微流控芯片电泳分离血清小而密低密度脂蛋白(sdLDL)的方法并探讨其临床应用价值。方法利用自制的微流控芯片,选择Tricine缓冲液为电泳缓冲液,SDS作为添加剂,电泳分离经硝基苯并噁二唑-C6-酰基鞘胺醇(NBD C6-ceram-ide)预染的脂蛋白,激光诱导荧光技术检测。结果大而轻低密度脂蛋白(lLDL)、sdLDL、极低密度脂蛋白(VLDL)和高密度脂蛋白(HDL)在3 min内得到有效分离。冠心病(CHD)组,sdLDL检出率显著高于正常对照组(P<0.01)。CHD患者血清经连续3次分析,sdLDL出峰时间和峰面积相对标准差分别为2.18%和2.94%。sdLDL阳性组TG水平增高,HDL-C水平降低,均与阴性组存在显著差异(P<0.01和P<0.05)。CHD患者sdLDL与三酰甘油(TG)、载脂蛋白B(apoB)呈正相关(r=0.82和0.79,P<0.0001)。结论微流控芯片电泳可望成为sdLDL的常规分析手段,用于CHD危险性的评估。     

皮肤病198例血清泌乳素检测分析

采用放射免疫法（ＲＩＡ）测定１９８例皮肤病患者和３８例健康体检者的血清泌乳素（ＰＲＬ），结果除银屑病患者（包括男性和女性）ＰＲＬ值高于对照组（Ｐ〈０．０１），其它如白癜风，斑秃，湿疹，黄褐斑等ＰＲＬ值与正常对照组比较无统计学意义（Ｐ〉０．０５），提示ＰＲＬ值增高与银屑病的发生有关，与白癜风，斑秃，湿疹、黄褐斑等ＰＲＬ值与正常对照组比较无统计学意义（Ｐ〉０．０５）。提示ＰＲＬ值增高可以与银屑病的发生     

南通市抗非典期间1011例发热病人临床分析

2003年4～6月是我国暴发传染性非典型肺炎(非典，SARS)最紧张的时期，我院从4月23日成立发热门诊，严格按照卫生部疾病控制司发布的“非典型肺炎临床诊断标准”，对于38℃以上的高热病人一一进行排查，加上院外医药公司及所有药店不卖退热药等的配合，故来院就诊的发热病人就更具有这个时期发热病例的代表性和普遍性，现将我市抗非典期间1011例发热病人进行临床分析，探讨其临床意义。     

时间分辨荧光法检测尿微量白蛋白方法学研究及应用

目的 :建立时间分辨荧光法 (TRFIA)测定尿微量白蛋白的方法。方法 :采用铕标记的纯化白蛋白与尿样中的白蛋白竞争结合抗血清的原理 ,在WALLAC VICTOR2 型时间分辨荧光仪上测定尿微量白蛋白。结果 :该法检出限为 2 9mg/L ,线性达 2 0 0mg/L ,批内变异系数为 4 4%～ 1 0 6% ,批间变异系数为 3 9%～ 1 0 3% ,平均回收率为 1 0 2 % (范围 97 2 %～ 1 0 8 6% ) ,与放射免疫法 (RIA)比较相关方程为YRIA=1 0 4X 0 1 2 ,r =0 981 (n =40 )。结论 :TRFIA法简单易行 ,铕标记物无污染 ,稳定时间长 ( 4°C ,1 8mo) ,该法是临床测定尿微量白蛋白的一种有发展前途的方法。     

沉淀法检查抗酸杆菌的改进

取晨痰2～3ml 置玻瓶内,加入2ml0.4g/LNaOH,送高压蒸气消毒1.5公斤20分钟,将标本放于一试管中,以3000r/min 离心5分钟,倾去上清液,于沉渣中加入8～10滴乙醚,振摇半分钟,静置     

高血压病患者血清中CNP水平的变化

目的:探讨单纯高血压病与高血压伴左心肥厚患者血中C型利钠肽(CNP)的变化。方法:用EL ISA法测定56例单纯高血压病组(Ⅱ级以上)、48例高血压伴左心肥厚组患者血清CNP及B型利钠肽(BNP),并与96例健康对照组比较。结果:单纯高血压病组和高血压伴左心肥厚组与健康对照组CNP浓度有显著差异(P<0.01);而单纯高血压病组与高血压伴左心肥厚组差异亦有显著性(P<0.01);另外64例伴并发症组与40例无并发症组CNP值亦有显著差异(P<0.01);血清CNP的P25为9.35ng/L,P50为11.75ng/L,P75为18ng/L,血清各组CNP在各百分位点的分布与正常对照组在各百分位点的分布相比有显著性差异。结论:血清CNP在高血压病时增高,可作为临床监测治疗的一个良好指标。     

血清BLyS和APRIL水平与非霍奇金氏病关联性的初步研究

目的：研究非霍奇金氏病（NHL）患者血清B淋巴细胞刺激因子（BLyS）和增殖诱导配体（APRIL）蛋白水平，并探讨其与血清乳酸脱氢酶（LDH）的关系。方法：应用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测LDH升高患者组（10例）和LDH正常NHL患者组（12例）NHL患者血清BLyS和APRIL水平，以健康志愿者（23例）作为对照；同时将血清BLyS和APRIL水平与患者血清乳酸脱氢酶（LDH）进行相关性分析。结果：NHL患者组血清BLyS水平显著低于健康对照组（P〈0.05）；NHL患者血清APRIL水平与健康对照组无显著性差异（P〉0.05），但LDH升高患者组血清APRIL水平明显高于LDH正常患者组（P〈0.05）；NHL患者组和LDH升高患者组血清APRIL水平与LDH正相关（r=0.923、0.799，P〈0.05）。结论：NHL患者血清BLyS、APRIL水平与健康对照组差异，提示BLyS和APRIL可能与NHL的预后及恶性程度有关。     

脑钠素与左室舒张功能的关系

目的:探讨无症状和有症状左室舒张功能障碍患者血清脑钠素(BNP)水平变化及临床意义。方法:对经超声心动图检测符合心脏单纯左室舒张功能障碍的53例心血管病患者根据临床症状分为无症状左室舒张功能障碍组(无症状组)和有症状左室舒张功能障碍组(有症状组)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清BNP水平,并与30例健康体检者(正常对照组)进行对比分析。结果:与正常对照组相比,无论有无症状,左室舒张功能障碍组BNP水平均明显升高,且有症状组比无症状组升高更明显(P<0.01)。结论:血清BNP水平升高可反映左室舒张功能障碍及其严重程度,对心功能不全的早期诊断具有重要临床价值。