IL-27亚基基因真核表达质粒的构建与表达

目的 克隆人白细胞介素27(interleukin 27,IL-27)蛋白亚基EB病毒诱导的基因3(Epstein-Barr vi-rus-induced gene 3,EBI3)与p28基因的cDNA,分别构建其真核表达质粒并在COS-7细胞表达.方法 人外周血单核细胞诱导为成熟树突状细胞后提取细胞总RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增EBl3与p28基因cDNA,酶切后插入pcDNA-3.1构建真核表达载体pcDNA-EBI3与pcDNA-p28.重组质粒转染COS-7细胞,RT-PCR检测目的 基因表达.结果 成功构建克隆人IL-27蛋白亚基真核表达质粒,重组质粒分别转染COS-7细胞后检测到相应基因表达.结论 人IL-27蛋白亚基基因克隆及真核表达质粒的成功构建,为构建表达有生物学活性的重组人单链IL-27蛋白奠定基础.     

鸡卵黄抗体研究进展

抗体（免疫球蛋白，Ig）是指机体受到外来抗原物质刺激后，B细胞识别抗原后活化、增殖分化为浆细胞，由浆细胞合成和分泌的能与相应抗原特异性识别和结合的一类球蛋白。经特定抗原免疫后的母鸡可产生相应的特异性抗体，有研究证实，产蛋鸡的卵黄对抗体有浓集作用，使其不断储存于卵黄中，这种抗体称为卵黄抗体（Immunoglobulin of yolk，IgY），卵黄抗体是当今生物科学研究领域的一项重大发现。     

护理记录取代整体护理病历的探讨

为了避免重复记录 ,让责任护士有更多的时间照料病人 ,满足他们的健康需求 ,将整体护理落实到位 ,我院在执行《病历书写基本规范》的同时 ,取消了整体护理病历 ,对此作法 ,主要基于以下思考。1　“护理记录”与整体护理病历的内涵相同1 1　“护理记录”与整体护理病历内容一致。《病历书写基本规范》第三十二条规定 ,“护理记录分为一般患者护理记录和危重患者护理记录” ,其内容是根据医嘱和病情对病人住院期间护理过程的客观记录 ,主要为病情观察情况、护理措施和效果等 ,其中病情包括症状、体征、心理等健康状况 ,见表 1。表 1　护理记录…     

锦州近海海域放射性活度及海生物所致居民的内剂量

本文报道了1988年～1989年锦州近海的海水、海底质和海生物中总α总β, ⁹⁰Sr、¹³⁷Cs, ^6Oco, ¹⁰⁶Ru、²³²Th、²²⁶Ra的放射性活度。在海水和海生物中⁹⁰Sr、¹³⁷Cs稍有增加, 说明海洋环境可能受到了切尔诺贝利事故泄漏物的污染。     

妊娠合并风湿性心脏病

风湿性心脏病是指人体心脏经风湿热感染后其心脏瓣膜所遗留下来的病变。在生育年龄的妇女 ,风湿性心脏病占心脏病人数的７０%。风湿性心脏病占心脏病人妊娠的２８ ２２% ,妊娠合并心脏病是产妇死亡的第二、三位原因 ,占非直接产科死因的第一位 ,风心病威胁着育龄妇女的妊娠、分娩与围生儿的生存。风湿性心脏瓣膜病包括二尖瓣狭窄、二尖瓣关闭不全、主动脉瓣狭窄、主动脉瓣关闭不全等 ,其中以二尖瓣狭窄为主 ,据协和医院统计占妊娠妇女风心病的１００% ,并常合并二尖瓣关闭不全。１病理生理正常成人的二尖瓣口可达４～６ｃｍ ,休息状态每分钟…     

幽门螺杆菌napA-ctxB融合蛋白的基因克隆与表达

目的 克隆、表达幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白napA与霍乱毒素B亚单位ctxB融合基因napA-ctxB(nctB),为制备预防H.pylori感染的疫苗奠定基础.方法 用PCR方法扩增ctxB目的基因片段,克隆至pQE30-napA质粒的napA基因上游,构建含双基因的表达质粒pQE30-napA-ctxB(pQE30-nctB),经测序分析确认后转化E.coli DH5α,经IPTG诱导表达融合蛋白NCTB,融合蛋白NCTB经镍离子柱纯化.结果 PCR扩增出807 bp的目的基因片段nctB.工程菌pQE30-nctB-DH5α经IPTG诱导后,SDS-PAGE显示有新生的蛋白表达条带,Mr为30 000,与预期的一致,约占菌体总蛋白的27%,重组蛋白用Ni2 -NTA 树脂提纯,纯化后的蛋白质经SDS-PAGE分析可见单一条带,图象软件分析表明纯度可达94%以上.Western blot 显示重组蛋白质有良好的抗原性.结论 构建含双基因的表达质粒pQE30-nctB成功,并在大肠杆菌DH5α中高效的表达.     

抗幽门螺杆菌粘附素HpaA卵黄抗体的制备

目的研制高效价特异性的抗幽门螺杆菌黏附素鸡卵黄抗体免疫球蛋白抗体。方法用纯化重组幽门螺杆菌黏附素(Helicobacter pyloriadhesin A,rHpaA)抗原免疫22周龄罗曼鸡,母鸡免疫应答后,在卵黄中产生抗幽门螺杆菌黏附素抗体;经硫酸铵法初步纯化浓缩后;以间接ELISA鉴定抗体效价及免疫学活性;采用Bradford法测定蛋白含量;并用SDS-PAGE法测定分子量及鉴定抗体纯度。结果母鸡初次免疫第10d即有抗体产生,初次免疫后75d左右抗体效价超过1∶10000;最高可达为1∶12800。卵黄抗体经硫酸铵法纯化后,用SDS-PAGE分析,出现两条蛋白带,纯度达95%以上。其含量为10.56mg/ml蛋黄。结论本研究首次研制并鉴定抗黏附素卵黄抗体,开拓了我国预防幽门螺杆菌感染的新领域,分析了抗体在产蛋期卵黄液中表达的进度,为今后该抗体的持续、高质量诱导奠定基础。有望获得高效价、高产量的抗黏附素的IgY抗体(IgY-HpaA),为制备口服制剂开辟了广阔前景。     

青藤碱对动脉粥样硬化兔及其体重的影响

目的:研究青藤碱调节体重及抗动脉粥样硬化的作用。方法:将48只雄性日本大耳白兔随机分为空白对照组;高脂模型组:青藤碱高、中、低剂量组;脂必妥对照组。每周测量体重,饲养15周,取主动脉进行病理学检查。结果:各组体重随饲养时间的延长而增加,与正常对照组相比,模型组体重持续上升更显著;与模型组相比,青藤碱高剂量组体重变化与脂必妥组相当,而低剂量组体重变化接近模型组;病理学检测显示青藤碱组动脉粥样硬化病变进展明显延缓。结论:青藤碱有抗动脉粥样硬化的作用。     

CD40L与动脉粥样硬化的研究进展

动脉粥样硬化是多种心脑血管疾病的基础,其本质是一种慢性炎症性疾病。大量研究表明：免疫调节分子CD40L与其受体的相应结合在动脉粥样硬化的发生发展及斑块破裂等诸多环节中发挥着重要作用。CD40L通过与其主要受体CD40及其他新近发现的受体结合,对脉管系统的不同细胞发挥各种生物学作用,可能成为防治心血管疾病的重要靶点。     

35例肺癌并发阻塞性肺炎的临床特点

肺癌并发阻塞性肺炎的临床表现,X线征象与一般肺炎酷似,易造成误诊。自1995～1998年,作者收集了盐城市第一人民医院肿瘤科肺癌并发阻塞性肺炎35例,并对其临床特点进行分析,报告如下。 1.临床资料 本组肺癌35例,男31例,女4例,年龄35～72岁,平均59.2岁。所有病例均经纤维支气管镜活检或手