Expression and function of c-kit receptor in bone marrow mononuclear cells of patients with myelodysplastic syndromes

目的　了解骨髓增生异常综合征 (MDS)骨髓单个核细胞c kit受体的表达与功能。方法　采用免疫荧光方法测定c kit受体蛋白 (CD117)的表达 ;逆转录 聚合酶链反应方法测定c kitmRNA的表达 ;细胞培养检测c kit受体的功能。结果　CD117表达率正常人为 3 0 4 %± 1 4 9% ,MDS患者为 8 58%± 5 2 8% ,两者差异有显著性 (P <0 0 5) ;RA患者为 5 12 %± 2 13% ) ,RAEB RAEB t患者为 10 0 1%± 5 0 7% ,两者差异有显著性 (P <0 0 5) ;MDS继发白血病患者为 32 4 3%± 18 16 %。MDS患者c kit基因mRNA表达与CD117表达相一致。正常骨髓单个核细胞体外半固体培养 ,在加入造血干细胞因子、白细胞介素 3、红细胞生成素 (SCF IL 3 Epo)后形成的粒 巨噬细胞集落 (CFU GM)较仅加入IL 3 Epo显著增多 (P <0 0 5) ,红系爆式集落 (BFU E)数量极显著增多 ,且BFU E体积显著增大(P <0 0 1)。MDS患者在上述相同条件下CFU GM数量无明显变化 (P >0 0 5) ,与正常对照比较 ,CFU GM和BFU E数量均显著减少 (P <0 0 5)。结论　MDS患者骨髓单个核细胞CD117表达明显高于正常对照 ,且与病情进展相关 ;c kitmRNA表达与CD117表达相一致 ;MDS患者骨髓单个核细胞体外培养时 ,SCF协同IL 3、Epo促进造血干 祖细胞增殖分化能力较正常对照明     

再生障碍性贫血患者外周血单个核细胞产生某些细胞因子能力的变化及意义

观察再生障碍性贫血患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）产生 ＩＬ－１α、ＩＬ－２的能力及外周血清ｓＩＬ－２Ｒ水平,探讨这些变化的意义。方法：应用ＥＬＩＳＡ法测定细胞因子活性。结果〔显示再障患者ＰＢＭＮＣ产生ＩＬ－１α的能力明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）;而产生 ＩＬ－２的能力则明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）;血清 ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论：这三项检测结果对于认识再障贫血的发病机制、辅助诊断疾病的严重程度、指导治疗和估计预后有一定意义。     

紫外线照射自血回输治疗急性呼吸窘迫综合征

1　治疗方法　　采患者静脉血 10 0～ 4 0 0ｍＬ于血袋内 ,然后转移至石英玻璃瓶内 ,置血液量子治疗仪内 ,紫外线照射并通入氧气(3～ 5Ｌ/ｍｉｎ) ,震荡 8～ 10ｍｉｎ后取出石英玻璃瓶 ,将照射后的血液回输给患者 ,每日治疗 1次 ,连续数次 ,直至患者症状消失及血气分析恢复正常。2　病例报告　　例 1.男 ,5 9岁。因反复乏力、鼻衄、齿龈出血 3个月 ,加重 5ｄ于 1995 - 0 3- 0 9入院。入院诊断 :慢性再生障碍性贫血。给予雄激素、环孢菌素Ａ、强的松等治疗。入院 3个月后患者出现发热、呼吸困难、心慌。给予吸氧、抗感染、强心利尿等治疗 ,但…     

干扰α烯醇化酶对耐药细胞株K562/A02耐药性的影响

目的肿瘤耐药的产生是肿瘤治疗失败的主要原因之一,α烯醇化酶(eno1)与肿瘤细胞耐药产生和发展密切相关。探究eno1对人慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/A02生长及耐药的影响。方法筛选3株稳定干扰eno1的细胞系K562/A02-sheno1和对照细胞系K562/A02-shcon;采用细胞计数法测定细胞生长速率,MTT法测定细胞增殖能力,细胞内罗丹明123含量测定细胞外排药物能力,real-time PCR反应测定基因mRNA表达水平,Western blot实验测定基因蛋白表达水平。结果与敏感性细胞株K562相比,eno1在耐药细胞株K562/A02中为高表达状态,其在mRNA水平和蛋白水平表达分别增高(2.85±0.56)倍和(1.43±0.05)倍;而K562/A02细胞生长速率与K562细胞相比差异无显著性。K562/A02-sheno1细胞系与对照组K562/A02-shcon相比生长速率降低,对抗肿瘤药物紫杉醇和阿霉素的敏感性均增强,且K562/A02-sheno1细胞系中罗丹明123含量也明显增高。K562/A02-sheno1细胞系中耐药相关基因MDR1表达水平降低。结论稳定干扰eno1表达能抑制K562/A02细胞生长,有效逆转K562/A02细胞耐药性,提高其对药物的敏感性,其机制与MDR1基因表达相关。     

Subclasses of warm autoantibody IgG in patients with autoimmune hemolytic anemia and their clinical implications

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｈｅｍｏｌｙｓｉｓａｎｄｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｏｒｅｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｅｓｔｆｏｒａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｈｅｍｏｌｙｔｉｃａｎｅｍｉａ（ＡＩＨＡ）Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＩｇＧｓｕｂｃｌａｓｓｅｓｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄｉｎ４０ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｉｄｉｏｐａｔｈｉｃｏｒｓｅｃｏｎｄａｒｙＡＩＨＡｂｙＣｏｏｍｂｓｔｅｓｔｗｉｔｈｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓＨｂ,ＴＢｉｌ,ＲＣａｎｄＦＨｂ,ａｓｈｅｍｏｌ…     

两种免疫抑制疗法治疗重型再生障碍性贫血比较研究

目的 :探讨重型再生障碍性贫血的适宜治疗方案。方法 :回顾性比较猪 -抗胸腺细胞球蛋白( P- ATG)单用 ( IST方案 )与联合方案兔 -抗人 T淋巴细胞球蛋白 ( R- ATL G)、环孢霉素 A( Cs A)、重组人粒 -巨噬细胞集落刺激因子 ( rhu GM- G- CSF) /重组人粒细胞集落刺激因子 ( rhu- G-CSF)及重组人红细胞生成素 ( rhu EPO) ( IST方案 )治疗 SAA疗效。结果 :IST方案 组不仅疗效高于 IST方案 组 ,且其有效者造血功能恢复更为迅速及良好。结论 :SAA患者更适宜于 IST方案 。     

ALG、CsA并用GM－CSF、Epo治疗重型再生障碍性贫血初步观察

通过对照观察免疫抑制剂抗淋巴细胞球蛋白（ＡＬＧ）或环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）及ＡＬＧ或ＣｓＡ合并应用ＧＭ－ＣＳＦ、Ｅｐｏ治疗重型再生障碍性贫血（ＳＡＡ）的疗效。初步发现：ＳＡＡ患者在ＡＬＧ治疗１月后和在ＣｓＡ治疗的同时加用足量、足疗程的ＧＭ－ＣＳＦ和Ｅｐｏ，３个月后有效例数分别为６／６例和４／８例，对照组分别为３／６例和２／８例，１年后基本治愈例数ＡＬＧ实验组为５／６例，对照组为２／６例。此结果表明在免疫治疗的基础上加用造血因子可加快骨髓造血功能恢复，缩短外周血白细胞、中性粒细胞、血小板及网织红细胞上升时间，减少成分输血量，降低感染率，提高疗效     

富含脯氨酸和谷氨酰胺的剪切因子:预测血液肿瘤耐药的潜在靶点

 【摘要】　目的　鉴定血液肿瘤细胞耐药相关膜抗原,探讨其在血液肿瘤细胞膜易位表达的普遍性。方法　以蛋白电泳和免疫共沉淀法分离并沉淀细胞膜抗原,以质谱分析鉴定抗原信息,通过siRNA基因干扰法和激光共聚焦显微镜法确证抗原信息及其易位细胞膜的鉴定结果,通过流式细胞术检测抗原在多种血液肿瘤细胞膜的易位表达。结果　免疫共沉淀和质谱等实验证实白血病耐药相关单抗———5D12在HL-60细胞膜抗原为细胞核因子富含脯氨酸和谷氨酰胺的剪切因子（PSF）,经一系列生物学实验确证PSF在HL-60细胞膜的易位表达,在敏感株的膜表达显著高于耐药株的膜表达。流式细胞术检测结果表明PSF的特异性单抗5D12与血液肿瘤多种细胞系的膜结合率为：HL-60（78.56±0.76）%;K562（26.54±4.42）%;Nomalwa（38.10±5.11）%;U937（64.03±7.96）%;Jurkat（29.12±5.58）%;Raji（74.92±3.41）%;CEM（12.18±3.21）%。结论　核蛋白PSF易位表达于多种血液肿瘤细胞膜,对维持肿瘤细胞对化疗药的敏感性有重要作用,是血液肿瘤耐药预测的候选靶点。     

利用PTD介导的新型大分子转染方法

 目的：构建融合蛋白PTD-Strep,用于转染常规操作中难于转染生物大分子的血液肿瘤细胞、神经细胞、干细胞等细胞系。方法：采用PCR法引入PTD和G4S序列、扩增链亲合素streptavdin序列;经酶切、连接构建重组质粒pAYZ-PTD-Strep,低磷培养基AP5诱导表达融合蛋白,E-tag亲和层析柱纯化产物,Western blot鉴定产物,FACS测定融合蛋白转染效率。结果：目的产物PTD-G4S-Strep融合蛋白以可溶形式表达,产量约为0.7 mg/L,经E-tag亲和层析柱纯化后纯度可达90%以上。融合蛋白PTD-Strep可成功将质粒运送至悬浮细胞U937内,转染效率高于PTD单体。结论：构建的融合蛋白pAYZ-PTD-Strep具有将生物大分子转入血液肿瘤悬浮细胞内的活性,有望发展成为一种高效、可靠的真核细胞转染方法。     

骨髓增生异常综合征向急性白血病转化的研究

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)向急性白血病(AL)转化(转白)的规律.方法动态观察151例MDS患者的转白情况及转白患者(postMDS-AL)的临床表现、血常规、骨髓象、染色体核型、细胞免疫表型及治疗反应、预后特点.结果8年7个月内,151例MDS患者转白21例(13.91%),中位转白时间5(1～23)个月.RA、RAEB、RAEB-t间转白率差异无显著性,逐步转白和直接转白病例均可见.影响MDS转白的因素有年龄≤40岁;三系血细胞减少;骨髓原始细胞比例≥O.150;复杂染色体核型异常;联合化疗.postMDS-AL21例皆为急性髓系白血病(AML),以M2、M4和M5为主.其中2例(9.52%)有白血病细胞浸润表现;10例(47.62%)外周血白细胞计数减少,14例(66.67%)外周血中性粒细胞计数减少,14例(66.67%)骨髓增生活跃或明显活跃.8例(47.06%)转白前后异常染色体核型发生了改变.骨髓单个核细胞髓系不成熟抗原CD33(49.83±24.50)%、CD13(36.38±33.84)%,单核细胞相关抗原CD14(38.50±24.60)%及早期造血细胞标志抗原CD34(34.67±30.59)%,也可共表达淋巴细胞系抗原CD5、CD7、CD9、CDi9.postMDS-AML的诱导化疗完全缓解率为31.25%,中位生存时间6(1～28)个月.结论MDS是一类高风险向AML转化的疾病,转化方式可渐进也可突变;postMDS-AML有独特的生物学表现,且预后差.