相关癌基因蛋白表达与宫颈鳞癌演进机制的探讨

目的:检测宫颈上皮内瘤(CIN)和浸润性宫颈鳞癌相关癌基因蛋白表达状态,探讨宫颈鳞状上皮恶性转化及鳞癌演进机制.方法:采用SP法检测20例正常宫颈,43例CIN,38例浸润癌PCNA、p53、p21、ER、PR、nm23、c-mvc、E-Cadherin、VEGF蛋白表达状态.结果:CINⅢ级ER、PR表达下调甚至缺失,PCNA、p53、p21阳性表达率明显高于CIN I、Ⅱ级,PCNA、p53、p21和ER/PR同时2种与同时3种以上异常表达率显著高于CIN Ⅰ、Ⅱ级;浸润癌nm23、c-mvc、E-Cadherin阳性表达率明显降低,VEGF阳性表达率明显升高.结论:相关癌基因蛋白表达异常与宫颈鳞状上皮恶性转化及鳞癌演进密切相关;同时检测PCNA、p53、p21和ER/PR表达状态有助于准确判断CIN恶变潜能.     

宫颈鳞癌及癌前病变组织中VEGF、nm23表达及微血管密度研究

目的　探讨宫颈鳞癌及癌前病变组织中VEGF、nm 2 3表达情况及MVD与宫颈鳞癌发展浸润的关系。方法　采用免疫组化方法对 5 0例宫颈鳞癌、2 8例CIN和 12例正常宫颈组织进行VEGF、nm 2 3和CD3 4检测 ,计数癌组织MVD ,并结合临床资料进行统计分析。结果　宫颈鳞癌VEGF阳性表达率明显高于正常组织和CINⅠ、Ⅱ级组织 ,VEGF表达与癌组织MVD、肿瘤浸润、转移和临床分期密切相关 ;癌组织MVD与肿瘤转移密切相关 ;正常宫颈组织nm 2 3均呈阳性表达 ,而宫颈浸润癌组织nm 2 3表达率明显降低 ,但nm 2 3表达与肿瘤浸润、转移和临床分期无明显相关性。结论　宫颈鳞癌组织VEGF呈高表达、nm 2 3呈低表达 ,可能在宫颈鳞癌血管生长、肿瘤浸润转移过程中起重要作用     

天花粉蛋白对宫颈癌HeLa细胞凋亡及bax 、bcl-2 基因表达的影响

 目的 研究天花粉蛋白对人宫颈癌HeLa细胞的诱导凋亡作用并探讨其对凋亡相关基因bax和bcl-2表达的影响。方法 不同浓度天花粉蛋白分别处理HeLa细胞24～72h后，MTT法检测细胞的生长活性，显微镜观察细胞形态，流式细胞仪检测细胞周期，WesternBlot检测凋亡相关蛋白bax，bcl-2的表达。结果 显微镜下观察到细胞圆缩，染色体凝聚等凋亡细胞的形态学改变，流式细胞仪直方图上亦出现特征性的亚二倍体峰，随着天花粉蛋白浓度的增加，bax基因的表达增加而bcl-2的表达减少。结论 天花粉蛋白对HeLa细胞的生长具有抑制作用，可诱导宫颈癌HeLa细胞发生凋亡，bcl-2蛋白的减少与bax蛋白表达增多可能是HeLa细胞凋亡的机制之一。     

c-myc蛋白在宫颈鳞癌中的表达及其与HPV16/18 E6 蛋白表达的关系

目的检测 c-myc 蛋白在宫颈鳞癌中的表达,并探讨 c-myc 蛋白表达与 HPV16/18 E6 蛋白表达之间的关系.方法采用免疫组化 SP 法对 21 例慢性宫颈炎、40 例宫颈上皮内瘤(CIN)和 71 例浸润性宫颈鳞癌进行 c-myc 蛋白和 HPV16/18 E6 蛋白检测.结果慢性宫颈炎、CINⅠ级、Ⅱ级、Ⅲ级 c-myc 蛋白阳性率均很高,而浸润性宫颈鳞癌 c-myc 蛋白阳性率下降(P＜0.05);HPV16/18 E6 阳性组和 HPV16/18 E6 阴性组之间 c-myc 蛋白阳性率差异无显著性.结论浸润性宫颈鳞癌 c-myc 蛋白表达明显下降,c-myc 蛋白表达与 HPV16/18 E6 蛋白表达之间无相关性.     

HPV L1 C-末端保守序列短肽体液免疫学特性

目的 探讨一段位于HPV L1 C-末端、长30个氨基酸残基的保守序列的体液免疫学性质而进行此实验.方法 以此序列为基础人工合成短肽,以该短肽免疫小鼠和兔,获得抗血清,通过ELISA,Western Blot及免疫组织化学的方法,分别对含HPV6b,16及18 L1的细胞裂解物、重组蛋白或HPV阳性临床标本进行反应.结果 抗短肽抗血清能与含HPV6b,16及18 L1的细胞裂解物、重组蛋白发生针对HPV L1的反应,能使HPV6和16阳性的临床标本呈现阳性反应,而抗HPV16及抗重组HPV16 L1抗血清对此短肽的反应则较弱.结论结果表明由该保守序列短肽诱导的抗血清具有一定的型间交叉反应特征,这一特性可能对研究检测用广谱HPV L1抗体有一定的意义.该序列短肽抗血清对不同型HPV L1反应的差异性及抗血清对多型别HPV L1的反应是否具有中和性,尚需进一步的研究.     

天麻素抗大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤的作用

目的：观察天麻素对离体大鼠心肌缺血/再灌注（I/R）损伤的影响。方法：应用Langendorff离体心脏灌注系统建立心肌缺血/再灌注损伤模型。40只SD大鼠随机分为正常对照组、缺血/再灌注组、天麻素0.1、0.025mmol·L^-1组。除正常对照组外,各组分别平衡灌注、全心停灌和再灌注各30min,观察天麻素对左室发展压（LVDP）、冠状动脉流量（CF）、心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量以及超微结构的影响。结果：天麻素明显抑制I/R引起的LVDP和CF的下降,显著改善缺血/再灌注后的心功能,且有明显的量效关系。提高心肌SOD活力和降低MDA含量。显著减轻I/R引起的心肌超微结构的损伤性改变。结论：天麻素对I/R引起的心肌损伤有显著的拮抗作用,其机制可能与其增强清除自由基能力,减轻生物膜脂质过氧化反应,维持心肌细胞膜和线粒体的正常功能,改善能量代谢有关。     

固定对组织细胞抗原性的影响

免疫组化技术是利用已知的特异性抗体能和抗原特异性结合的特点,通过显色剂使结合部位显色,借助显微镜观察其颜色变化,从而确定组织细胞结构的化学成分或化学性质的一种方法.因此,保存组织细胞的抗原成分在免疫组化中的意义重大.抗原性即物质所具有的能刺激机体产生抗体并能与抗体发生特异性结合的特性,它主要由分布在抗原表面的抗原决定簇决定.组织在固定、脱水、透明、浸蜡、制片以及免疫组化染色过程中,都会使抗原决定簇遭到不同程度的破坏,从而影响抗原活性.本文主要介绍固定这一环节对抗原活性的影响.     

新生儿高胆红素血症血清25-羟基维生素D_3水平检测及临床价值评估

正高胆红素血症属于新生儿常见病之一,主要表现为双巩膜及全身皮肤黄染色改变[1-3]。目前,临床主要采用碱性磷酸酶、凝血酶原时间、血清总胆固醇、脂蛋白-X、胆固醇脂等实验室指标来测定高胆红素血症[4-5]。研究[6]发现,血清25-羟基维生素D3水平在高胆红素新生儿中具有一定的鉴别诊断价值。然而,针对免疫分析法检测血清25-羟基维生素D_3诊断高胆红素血症的相关报道较为少见[7-8]。为了进一步完善新生儿高胆     

兔胫骨骨折愈合微血管重建的实验研究

本实验以家兔作为骨折模型，观察其微血管重建过程，结果表明微血管重建有下列规律：（１）微血管数量生长可分为３个时期初期（约１周）骨折部位无或华裔少量新生血管；中期（２～４周）血管形成达最高峰；后期（５周以后）血管数量减少并逐渐转为正常形态，（２）侧枝循环的建立是多源性的，包括从骨膜到骨痂，从骺－干骺动脉到髓腔；皮质纵血管系统的骨痂。     

组织切片特殊染色中的防脱片处理

在组织切片特殊染色制作的过程中,因受很多不确定因素的影响,容易导致组织片从载玻片上脱落,而致染色失败,尤其是嗜银染色过程中,因组织要经过不同试剂的处理,再用蒸馏水或缓冲液反复冲洗,组织脱片的概率就更大。从而造成材料和工时的浪费,笔者总结多年嗜银染色的实践经验,就嗜银染色过程中的防脱片处理做一下介绍。