异基因淋巴细胞过继性输注抗白血病作用研究进展

<正>异基因骨髓移植（allo-BMT）目前已成为治愈恶性血液病的重要手段,但所面临的主要障碍是GVHD和移植后复发,而复发的根源又与缺乏GVL效应有关,这种受者体内异基因供者淋巴细胞诱导的GVL效应,可以消除宿主体内残留的白血病细胞,对于防止allo-BMT复发至关重要。自从Kolb1990年报道首例allo-BMT后复发慢性髓性白血病（CML）患者,采用供者白细胞输注诱导再次细胞学完全缓解后,人们对DLI诱     

B超引导下局部注射TNF治疗肝癌30例报告

我们于1994年8月至1996年8月,采用B超引导下经皮细针穿刺,予肝癌组织内局部注射肿瘤 坏死因子(TNF),治疗了肝癌患者30例,近期疗效满意,现报告如下: 1 材料与方法 1.1 临床资料 30例患者均经肝穿刺病理证实为 原发性或继发性肝癌,其中原发性肝癌22例,继发 性肝癌8例.男性24例,女性6例;年龄28岁～66岁,平均42.5岁.术前常规检查无严重肝肾功能障 碍,肝功能分级为Pugh改良ChildA、B级,无出血倾向,肿瘤最大直径9.6cm,最小直径2.0cm;AFP>400μg/L者10例,在200～400μg/L者6例;2例 患者伴有轻度黄疸及少量腹水. 1.2 B超为日产日立EUB-240型定位B超,探头     

K562和K562/AO2细胞HLA Ⅰ类分子与MICA/B的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响

本研究探讨K562亲本细胞株及多药耐药细胞株K562/AO2细胞表面HLA Ⅰ类分子和MHC Ⅰ类链相关分子(MICA/B)的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响.用流式细胞仪检测K562和K562/AO2细胞株HLAⅠ类分子和MICA/B的表达情况;LDH释放法测定3例健康人NK细胞在不同效靶比时对K562和K562/AO2细胞的杀伤活性;效靶比101时,用抗HLA Ⅰ类分子单克隆抗体(W6/32)和抗MICA/B单克隆抗体(BAMO-1)分别封闭MHC Ⅰ类分子和MICA/B,观察NK细胞杀伤K562及K562/AO2细胞活性的变化.结果表明K562和K562/AO2细胞均不表达HLA Ⅰ类分子,K562细胞的MICA/B表达较K562/AO2显增高(P＜0.01).效靶比51、101、201、301时NK细胞杀伤K562和K562/AO2细胞的活性分别为(29.32±0.12)%、(45.33±0.78)%、(58.37±0.87)%、(72.37±0.96)和(12.47±0.91)%、(24.36±1.11)%、(33.29±1.03)%、(53.87±1.27)%,各效靶比时NK细胞对K562细胞的杀伤活性较K562/AO2细胞明显增强(P=0.000);效靶比101时W6/32不抑制NK细胞杀伤K562和K562/AO2细胞的活性,BAMO-1能明显抑制NK细胞杀伤K562和K562/AO2细胞的活性.结论MICA/B在K562和K562/AO2细胞表达的差异与NK细胞的杀伤活性有关;NK细胞对K562/AO2细胞杀伤活性降低与HLA Ⅰ类分子无关;MICA/B在多药耐药肿瘤细胞的低表达导致耐药肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性下降.     

经皮微波消融联合重组人白细胞介素-2治疗肝转移癌的临床疗效观察与研究

目的 观察超声引导下经皮微波消融治疗(PMAT)联合重组人白细胞介素-2(rhIL-2)治疗肝转移癌的可行性、安全性和疗效,以及对肝癌患者免疫功能的影响.方法 采用随机数字表法将72例消化道肿瘤肝转移患者分为两组,观察组34例,接受局部病灶PMAT联合rhlL-2全身用药治疗,对照组38例,仅行单纯PMAT治疗,观察两组术后生活质量、并发症及T淋巴细胞亚群变化,并统计两组0.5、1.0、2.0年累积复发率和累积生存率.结果 观察组0.5、1.0、2.0年累积复发率分别为20.59％ (7/34)、32.35％ (11/34)、64.71％ (22/34),对照组分别为26.32％ (10/38)、60.53％(23/38)、89.47％( 34/38),两组1.0、2.0年累积复发率比较差异有统计学意义(P＜0.05).观察组0.5、1.0、2.0年累积生存率分别为91.18％(31/34)、70.59％(24/34)、38.24％(13/34),对照组分别为89.47％(34/38)、47.37％(18/38)、31.58％(12/38),两组l.0年累积生存率比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后两组患者生活质量、免疫功能均有所提高,且未出现严重并发症.结论 PMAT联合rhIL-2治疗消化道肿瘤肝转移是安全可行的,其疗效明显优于单纯PMAT治疗,可明显提高患者生活质量及机体免疫功能,延长生存时间,降低肿瘤复发率,且不良反应小,严重并发症发生率低,适合并值得临床开展.     

氩氦刀冷冻、射频消融和微波凝固治疗兔VX2肝癌疗效对比

[目的]探讨氩氦刀冷冻、射频消融（RFA）及微波凝固（MCT）治疗兔VX2肝癌的疗效。[方法]取制作成功VX2肝癌模型的新西兰大白兔45只，随机分为5组，每组9只，即氩氦刀冷冻组（A组）、射频消融组（B组）、微波凝固组（C组）、手术切除组（D组）和对照组（E组）。观察肿瘤残留和转移情况以及兔生存期。[结果]①在A、B、C、D、E组肝内肿瘤残留分别为2、4、5、0、9只，差异有显著性（Х^2=20．700，P=0．000）；肝内转移分别为1、3、4、5、9只，差异有显著性（Х^2=15．652，P=0．004）；腹腔种植转移率分别为2、5、6、0、1只，差异有显著性（Х^2=13．894，P=0．008）；肺部及腹腔淋巴结转移各组均为9只，差异无显著性。②A、B、C、D组与E组比较平均生存期有显著性差异（F=73．084，P=0．000）；A、B、C和D组平均生存期均显著高于E组；A、D组平均生存期显著高于B、C组；A组和D组之间、B组和C组之间平均生存期差异无显著性。[结论]兔VX2肝癌采用氩氦刀冷冻治疗在减少肿瘤残留和转移以及延长牛存期方面．均优于RFA和MCT治疗：而RFA治疗和MCT治疗疗效相当．     

NK细胞对人鼻咽癌细胞CNE2裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

 目的 研究同种异体NK细胞对人鼻咽癌细胞（CNE2）裸鼠皮下移植瘤的抑制作用。方法PCR-SSP法检测CNE2细胞HLA-A、B、Cw表型、NK细胞KIR表型（选择3例健康者为试验对象）,磁珠分离法分离NK细胞并进行体外培养扩增,LDH释放法测定NK细胞对CNE2细胞的体外杀伤活性。12只BALB/c裸鼠分为两组,每组6只,对照组裸鼠每只皮下接种1×106CNE2细胞,治疗组裸鼠每只皮下接种1×106CNE2细胞,同时每只经尾静脉注入3×107NK细胞,观察两组裸鼠成瘤时间、成瘤率、肿瘤体积变化、计算抑瘤率。结果 CNE2细胞表面HLA-A、B、Cw表型为A2,24;B18,35;Cw4,7,3例健康者均表达KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、KIR3DL2。效靶比5∶1、10∶1、20∶1、30∶1时,NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性分别为（9.37±2.14）%、（27.14±1.82）%、（36.40±4.28）%and（54.67±2.80）%。对照组和NK细胞治疗组肿瘤出现时间分别为（10.00±2.68）d、（18.80±1.64）d,（P〈0.01）,成瘤率分别为100%（6/6）、83.33%（5/6）,对照组和NK细胞治疗组裸鼠的瘤重分别为（2.22±0.09）g、（1.42±0.09）g,（P〈0.01）,NK治疗组的抑瘤率为36.04%。肿瘤组织石蜡切片病理学鉴定为低分化鳞状上皮细胞癌,NK细胞治疗组可见角化肿瘤细胞,较多的淋巴细胞浸润和大量细胞坏死区。结论 NK细胞对鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤有明显的抑制作用,有希望成为治疗鼻咽癌的新方法。     

热疗加阿霉素对慢性白血病K562细胞株的抑制作用

目的观察热疗联合阿霉素对慢性髓系白血病细胞株K562的体外增殖抑制作用及凋亡的影响。方法采用MTT法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化疗或与热疗的联合,选择温度40℃及42℃,体外作用于K562。作用前及48h,采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率;MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果作用48h后IC50为5μg/ml,以此为实验的工作浓度。单纯热疗60min对K562细胞有抑制作用(P<0.01),并随温度增高而增强;单纯化疗对K562细胞也有抑制作用;各热化疗组对K562均有明显的抑制作用(P<0.01),随着温度的增高而增强。流式细胞仪检测细胞凋亡,热疗组、化疗组及热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高,各组之间有显著性差异(P<0.01)。结论热疗联合阿霉素能增强对K562细胞的体外抑制作用,可以提高肿瘤细胞的凋亡率。     

热化疗对K562细胞体外增敏作用的实验研究

目的观察热疗联合阿霉素对人慢性白血病细胞株K562细胞内的药物浓度变化及凋亡的影响。方法MTT法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化疗或与热疗的联合,选择温度40、41、42℃,体外作用于K562细胞。作用前及作用48h采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率;MTT法检测肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡及细胞内药物浓度的变化。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果作用48h IC50的药物浓度作为实验的工作浓度。热化疗组对K562细胞有明显的抑制作用(P<0.01),随着温度的增高而增强;热化疗组细胞内的药物浓度明显增加(P<0.01)。结论热疗联合阿霉素能增加K562细胞内的药物浓度,提高肿瘤细胞的凋亡率。     

鼻咽癌细胞株体外诱导同种异体T细胞TCR VβCDR3谱型和细胞毒性分析

目的 用鼻咽癌细胞株CNE2体外负载同种异体树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导T淋巴细胞,使之活化为细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocyte,CTL),观察其体外特异性杀伤和克隆性增殖.方法 用GM-CSF,IL-4和TNF-α体外诱导健康志愿者外周血单核细胞,用CNE2负载,使之分化为成熟DC,流式细胞仪检测负载前后DC的表型特征.在IL-2的作用下,用负载CNE2抗原的DC诱导自身T细胞生成特异性CTL.乳酸脱氢酶释放法检测其特异性杀伤活性;采用免疫谱型分析技术分析T细胞的克隆性.结果 健康志愿者外周血单核细胞体外在GM-CSF,IL-4和TNF-α诱导下获得具有典型表型特征的成熟DC,其诱导的CTL对CNE2有明显的特异性杀伤作用;PBMC的TCR Vβ CDR3谱型呈高斯分布,而诱导后的T细胞部分家族出现优势表达.结论 负载鼻咽癌抗原的同种异体DC所诱导的CTL在体外对鼻咽癌细胞有特异性杀伤作用,优势表达的TCR Vβ CDR3家族对鼻咽癌治疗有潜在的临床应用价值.     

老年痴呆发病机理的研究

老年痴呆是一种综合病，以高级认知功能障碍为特征，病理特征以老年斑、神经纤维缠结和神经元丢失为主。随着现代社会科学的进步与发展，人类的寿命在不断地延长。在世界范围内，特别是我国人口老龄化趋势在迅速增长，老年人疾病也随之增加，特别是老年痴呆发病率呈上升趋势，严重影响老年人的生存质量。它不仅是个体疾病，而且因其带来的社会负担，已成为一个重要的公共卫生问题。老年痴呆是继肿瘤、心脏病、脑血管病之后引起老年人死亡的第四大病因，因而受到了国内、外学者的关注，并成为90年代医学研究的重大课题，WHO已将老年痴呆症定为二十一世纪五大重点疾病之一。因此对老年痴呆的研究有着重要的医学和社会意义。本文将对近年来在老年痴呆发病机理方面的研究进展综述如下。