和厚朴酚对人结肠癌细胞及Wnt信号通路的影响及调控作用

目的探讨和厚朴酚(HNK)对人结肠癌细胞及Wnt信号通路的影响和调控作用。方法采用结晶紫染色法和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达检测HNK对人结肠癌LoVo细胞增殖的抑制作用;利用流式细胞仪和Caspase-3蛋白表达观察HNK对人结肠癌LoVo细胞凋亡的影响;利用荧光素酶报告质粒检测HNK对Wnt信号通路中β-catenin/Tcf4转录活性的影响;蛋白的表达采用Western blot检测。结果 HNK剂量依赖性地抑制细胞增殖(P0.05),并诱导细胞凋亡。荧光素酶报告质粒检测结果显示,HNK在10.0μmol/L时就能明显降低LoVo细胞中β-catenin/Tcf4转录活性(P0.05)。结论 HNK能抑制人结肠癌细胞增殖,诱导其凋亡,该作用可能与HNK抑制Wnt信号通路的转导有关。     

虎杖苷对小鼠糖尿病心肌肥厚的保护作用及机制研究

观察虎杖苷(PD)对小鼠糖尿病心肌肥厚的保护作用,并探讨其可能机制。利用小剂量STZ连续5 d腹腔注射建立小鼠糖尿病模型,以心肌肥厚指数(LVHI,左心室/右心室+室间隔)、左心室/体重(LV/BW)、组织学检查和心房利钠因子(ANF)mRNA表达为心肌肥厚指标;监测空腹血糖值(FBG),并检测血清胰岛素含量、血浆糖化血红蛋白(HbA1c)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOME.IR);分别用qRT-PCR和Western blot方法检测mRNA及蛋白表达。结果显示,模型组小鼠FBG持续超过11.1 mmol·L^-1,BW明显降低,胰岛素含量、HbA1c和HOME.IR明显升高,提示糖尿病模型建立且保持稳定;糖尿病小鼠LVHI,LV/BW及ANF mRNA均增加,细胞表面积增大,提示小鼠出现心肌肥厚。同时,模型组PPARβ mRNA和蛋白表达降低,NF-κB p65,COX-2及iNOS表达则明显增加。给予PD(50,100 mg·kg^-1·d^-1)治疗后,糖尿病小鼠BW增加,FBG,胰岛素及HbA1c含量降低,胰岛素抵抗改善,心肌肥厚指标亦明显好转,提示PD具有保护糖尿病心肌肥厚的作用。同时,PD使PPARβ的表达上调,并抑制NF-κB p65,COX-2及iNOS的表达,提示PD的保护作用可能与其激活PPARβ,抑制NF-κB及COX-2,iNOS信号通路有关。     

PPARs信号通路在小鼠糖尿病肝病中的作用

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)及炎症相关信号通路在糖尿病肝病中的作用。方法:高能量饲料喂养联合多次腹腔注射小剂量链脲菌素(STZ;40 mg·kg~(-1)·d~(-1),5 d)诱导糖尿病形成后,继续喂养4周,HE染色观察肝脏形态学改变;检测代表小鼠肝功能的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的变化;检测空腹血糖(FBG)、血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)及血清胰岛素水平(INS),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);利用q PCR和Western blot分别检测PPARs和炎症相关信号通路中相关m RNA及蛋白表达。结果:给予STZ 7 d后,小鼠FBG持续11.1 mmol/L,糖尿病形成。4周后,实验结束时血清胰岛素水平及HOMA-IR均明显增加(P0.01),血脂升高(P0.01),ALT和AST亦显著增加(P0.01),病理检查见肝细胞脂肪变性及炎性细胞浸润,提示糖尿病小鼠出现肝损伤。与正常对照组相比,糖尿病肝损伤小鼠肝脏PPARα、PPARβ及PPARγ的mRNA和蛋白表达均明显下调(P0.01),核因子κB(NF-κB)、环氧合酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的表达则明显上调(P0.01)。结论:PPARs下调及NF-κB-COX-2/i NOS信号通路激活可能与糖尿病肝损伤的发生发展有关。     

新疆维吾尔自治区维吾尔族胃癌患者血清蛋白酶原、促胃液素-17的表达及其诊断意义

目的研究新疆维吾尔自治区维吾尔族胃癌患者血清胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)与促胃液素-17(gastrin-17,G-17)的表达及其诊断价值,探讨维吾尔族胃癌患者在胃癌不同阶段及不同部位胃癌血清PG及G-17的表达特征及规律。方法将2014年1月至2015年10月于新疆维吾尔自治区喀什地区第二人民医院经内镜检查或手术及病理学确诊的维吾尔族胃癌患者198例(连续3代均为同一民族)纳入研究组,将同期58例维吾尔族健康体检者纳入对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测两组研究对象血清PGⅠ、PGⅡ及G-17水平,并计算PGⅠ与PGⅡ比值(PGR)。采用~(13)C或~(14)C-尿素呼气试验及粪便幽门螺杆菌(H.pylori)抗原检测法检测两组研究对象H.pylori感染情况。结果①研究组患者血清PGⅠ及PGR均明显低于对照组(P<0.01),而血清PGⅡ和G-17水平均明显高于对照组(P<0.01和P<0.05):②研究组患者H.pylori感染率明显高于对照组(P<0.05);③研究组中早期胃癌组患者血清PGⅠ水平及PGR均高于进展期胃癌组(P<0.01),而早期胃癌组患者G-17水平明显低于进展期胃癌组(P<0.05)。④研究组中胃窦癌组患者血清PGⅠ水平、PGR均高于胃体癌组和近端胃癌组(P<0.05),而胃体癌组与近端胃癌组患者血清G-17水平均高于胃窦癌组(P<0.05);胃体癌组与近端胃癌组患者之间血清PGⅠ、G-17水平及PGR比较均无明显差异(P>0.05)。结论血清PGⅠ、G-17水平及PGR可以作为新疆维吾尔自治区维吾尔族人群筛查和辅助诊断胃癌的血清学指标;血清PGⅠ、G-17水平及PGR变化与维吾尔族胃癌患者的肿瘤分期及不同病变部位具有相关性。     

PPARβ及NO在高糖高胰岛素诱导心肌细胞肥大中的作用

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体β(PPARβ)及一氧化氮(NO)相关信号通路在高糖高胰岛素(HGI,25.5 mmol/L葡萄糖+0.1μmol/L胰岛素)诱导心肌肥大中的作用。方法:体外培养乳鼠心肌细胞,以细胞表面积、蛋白含量和心房钠尿因子(ANF)mRNA表达作为心肌肥大的指标;利用real-time PCR、Western blotting、硝酸还原酶法和分光光度法分别检测mRNA表达、蛋白表达、NO含量和NO合酶(NOS)活性。结果:HGI诱导心肌细胞出现肥大(P0.01),PPARβmRNA和蛋白表达明显降低(P0.05),诱导型NOS(i NOS)mRNA和蛋白的表达则升高(P0.01),NO含量和NOS活性增加(P0.01)。PPARβ激动剂GW0742能抑制HGI诱导的心肌肥大(P0.01),上调PPARβ的表达,降低i NOS的表达,使NOS活性和NO含量恢复正常(P0.01)。PPARβ拮抗剂GSK0660可阻断GW0742对心肌肥大的保护作用,取消其对PPARβ、i NOS mRNA和蛋白表达水平以及NOS活性和NO含量的作用(P0.05)。结论:PPARβ下调,激活i NOS-NO信号通路参与高糖高胰岛素诱导心肌肥大过程。