变异链球菌葡聚糖结合蛋白D基因失活菌株的构建和鉴定

目的利用基因打靶技术构建变异链球菌葡聚糖结合蛋白D基因（gbpD）失活株,用于葡聚糖结合蛋白D基因功能的研究.方法体外培养变异链球菌UA159菌株并以其基因组为模板,对gbpD基因内部序列进行PCR扩增,连接自杀载体pVA8912,分别用酶切及PCR鉴定;转化变异链球菌UA159株,用PCR及Western blot鉴定.结果经鉴定PCR产物及插入片段大小与预期值相符,且为所需目的基因片段,成功构建了自杀质粒pVA8912-gbpD;经PCR鉴定及Western blot鉴定,gbpD基因失活株基因组中gbpD基因内部成功插入目的片段,且该菌株不表达GbpD蛋白.结论成功构建了用于变异链球菌gbpD基因打靶的自杀质粒和gbpD基因失活株,为该基因功能的研究奠定了基础.     

远缘链球菌细胞分裂蛋白的表达、纯化和抗体的制备

目的表达与纯化远缘链球菌克隆细胞分裂蛋白(ftsK),制备多克隆抗体并鉴定。方法利用IPTG诱导ftsK在大肠杆菌中表达,随后以再生Ni-NTA柱纯化蛋白。纯化后的蛋白多次注射于新西兰大白兔中,获取多克隆抗血清,ELISA法检测抗体效价,Westernblot法检测抗体特异性。结果获得了纯度较高的远缘链球菌ftsK蛋白及其抗体,多抗效价达到1∶10000,特异性较好。结论成功表达了远缘链球菌ftsK蛋白,获得了效价较高、特异性较强的多克隆抗体,为进一步研究ftsK蛋白功能获取了良好的工具。     

从阴虚痰浊论治胃食管反流病相关性咽异感症思路探析

咽异感症是胃食管反流病常见的食管外表现之一,主要表现为咽部黏着感、灼热感、紧迫感、瘙痒感、异物感等,症状反复,迁延难愈。 胃食管反流病相关性咽异感症病位在食管、咽喉,主要与肺胃阴虚气机难降、痰气交阻上冲咽喉有关,属虚实夹杂之证,故治疗应标本同治、虚实兼顾。 临证可从滋阴益胃扶正、理气化痰祛邪的角度入手,调节气机升降,恢复水液代谢秩序。 附验案1则以佐证。     

浅谈教学档案与提高教学质量

教学档案是教学实践活动中直接形成的具有保存价值的文字、图表、声像载体材料等，是教学过程及其质量的客观记录。既是评价以往教学的重要资料，又可为后来者提供极有参考价值的信息，使之从中学习、借鉴。经过数十年的教学积累，我们已建立起一套完整的教学档案，但以往的教学资料为文字或图片形式保存，易磨损、变色，而目前的教学多采用多媒体教学，不能直接利用以往的教学档案，随着科学技术的发展，采用微机管理教学档案，使教学档案的管理简便、存储方便、检索快捷，资料永久保存，使用方便，提高了教学档案的利用率，在原教学档案的基础上，我科建立起了完整的电子教学档案，并逐年完善。     

七年制口腔医学专业牙体牙髓病学教学实践与思考

根据七年制口腔医学专业的培养目标，在牙体牙髓病学教学中，不但要求培养学生扎实的理论知识，而且还要培养过硬的操作技能及熟练的专业外语，因此在教学实践中，我们注重从以下几个方面对学生进行培养：①加强三基训练，注重能力培养；②联系实际，培养临床思维；⑦开展第二课堂，提高科研素质；④深化外语教学，提高专业外语水平。     

儿童孤独症的护理体会

儿童孤独症的护理体会苏凌云（南京医科大学附属脑科医院儿童精神科，南京２１００２９）关键词孤独症；训练；护理；儿童婴儿孤独症最早在１９３８年由Ｋａｍｅｒ发现。１９７８年美国儿童及成人孤独症学会顾问委员会提出了孤独症定义为起病年龄在３０个月之前，并具以下...     

运用6σ评价急诊血液项目各检测阶段的性能

目的运用六西格玛（6σ）评价急诊血液项目各检测阶段的性能,以期发现问题、制定解决方案、指导质量改进。方法确定分析前、后阶段及全程的性能评价指标,统计2012年1至12月301 125例急诊标本的合格情况、危急值报告情况、报告差错情况及标本周转时间（TAT）共4项指标,计算盯值;确定分析中阶段的性能评价项目,并收集2012年1至12月各项目的室内质量控制数据及卫生部室间质评数据,计算不精密度（CV％）及百分差值,再根据允许总误差（TEa％）,计算盯值和质量目标指数（QGI）。对于分析各阶段未达6σ的指标和项目进行分析,查找原因,指导质量改进。结果急诊分析前、中、后阶段及全程的指标和项目的σ值分别为5．4,5．3、6．1、5．4。结论6σ可以有效地评价急诊血液项目各检测阶段及全程的性能,体现实验室目前所处的性能水平,有助于发现问题并推进急诊检验科的质量持续改进。     

降钙素基因相关肽对人牙髓细胞的矿化影响

目的：分析降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP)对人牙髓细胞促矿化功能的影响，探讨CGRP在牙髓炎症状态下表达量增多的生物学意义。方法：人牙髓细胞分实验组和对照组培养，实验组加入适量的CGRP。分别测定细胞的碱性磷酸酶活性、骨钙素含量、I型胶原mRNA表达量变化。结果：培养3、6、9、12、15d,5个时间点实验组比对照组细胞碱性磷酸酶活性增强、骨钙素含量增加，且有显著性差异（P＜0．01）。培养6d的实验组的细胞I型胶原mRNA表达比对照组明显高。结论：CGRP刺激牙髓细胞分化，促进矿化形成，CGRP表达增高将有助于修复性牙本质形成。     

变形链球菌GbpB融合蛋白免疫SD大鼠实验研究

目的 研究变形链球菌GbpB融合蛋白免疫别大鼠时，其所诱导的血清和唾液的特异性免疫反应。方法 用纯化的变形链球菌GbpB融合蛋白皮下免疫别大鼠，免疫后间隔一定时间收集大鼠的血清及唾液，间接ELISA检测血清及唾液中特异性抗GbpB抗体。结果 GbpB融合蛋白免疫大鼠，可引起血清中IgG及唾液中IgA的显著提高。另外，GbpB融合蛋白免疫大鼠，38天采血，血清中抗GbpB抗体效价最高，以后逐渐降低。结论 变形链球菌GbpB融合蛋白具有免疫原性，可供研制防龋疫苗。     

白细胞介素-1β诱导牙髓细胞的金属蛋白酶-1和COX2的表达

目的 :探讨白细胞介素 1β对人牙髓细胞金属蛋白酶 1(matrixmetalloproteinase 1,MMP 1)、环氧合酶 2 (cyclooxygenase 2 ,COX2 )基因表达变化的生物学意义。方法 :培养人牙髓细胞 ,传代至第 4代 ,PT PCR检测人牙髓细胞是否表达IL 1β受体 ,进而用 1nmol/L人的重组IL 1β刺激人牙髓细胞 18h ,提取细胞总RNA ,反转录为cDNA ,半定量PCR检测IL 1β对人牙髓细胞的金属蛋白酶 1、COX2的mRNA的表达变化。结果 :人牙髓细胞表达IL 1β受体 ,而且用 1nmol/L人的重组IL 1β明显地刺激牙髓细胞的金属蛋白酶 1、COX2的mRNA表达。结论 :牙髓炎时牙髓组织内的IL 1β生成增多 ,会进一步引发金属蛋白酶 1、COX2基因异常表达相应增多 ,而金属蛋白酶 1导致炎症基质降解、COX2将引发炎性痛的病理改变。