鼠源轮状病毒vp7基因的表达载体构建及转基因植物的研究

目的：构建表达鼠源轮状病毒抗原基因vp7的植物表达载体及植物转化研究。方法：抗原基因vp7经PCR扩增后直接克隆到PUC－T载体，双酶切目的片断和植物表达载体，以T4连接酶将目的片断与载体相连接，电转化方式将重组质粒转入农杆菌。结果：以重组农杆菌为介导将靶基因转入到马铃薯外植体。成功地将目的基因定向克隆到表达载体，并转入到农杆菌中；以农杆菌为介导获得抗性转基因马铃薯植株。结论：通过PCR检测，初步确定轮状病毒外壳蛋白基因vp7已成功地整合到马铃薯植株中。     

FLK1265-2493与C3d3融合基因真核表达质粒的构建及表达

目的 构建FLK1265-2493与C3d3融合基因真核表达质粒，并在体外进行表达和鉴定。方法采用PCR技术扩增FLK1265—2493片段，将该片段插入到pMDT-18载体中后，亚克隆至真核表达载体pSG．SS．C3d3．YL，构建FLD1265-2493与C3d3融合基因表达质粒。经限制性酶切鉴定和DNA序列测定结果证实后，将重组质粒pSG．SS．FLK1265—2493．C3d3．YL转染Hela细胞，检测其体外表达。结果免疫印迹和免疫细胞化学分析结果分别表明转染细胞上清液和胞浆内均有目的分子的存在。结论构建的DNA疫苗可在真核细胞内正确表达，这为进一步的动物实验打下了基础。     

农杆菌介导鼠源轮状病毒vp4基因转化马铃薯条件优化研究

目的　获得马铃薯再生和农杆菌介导的遗传转化体系。方法　以马铃薯品种“台湾红”为受体材料 ,对其再生和农杆菌介导的遗传转化体系进行了研究。结果　诱愈培养基为MS + 0 1mg L 2 ,4-D + 1mg LBA ,出芽培养基为MS + 1mg LZT +5 0mg LGA3 ,卡那霉素浓度为 5 0mg L ,农杆菌液浓度为A6 0 0 =0 5。通过该体系将一鼠源轮状病毒外壳蛋白基因vp4导入马铃薯中 ,获得了具卡那霉素抗性的转化植株。经PCR验证 ,外源基因已导入马铃薯基因组中。结论　获得相对高效的马铃薯遗传转化体系 ,并成功地将外源基因转入马铃薯中。     

小型猪外周血单个核细胞产生IFN-γ频率年龄依赖性初探

目的通过检测不同日龄小型猪外周血单个核细胞产生IFN-γ的频率，初步探讨小型猪免疫细胞功能的发育时限。方法分别取3日龄、2月龄、6月龄、1周岁及2周岁小型猪的外周血，提取单个核细胞，进行胞内细胞因子IFN-γ染色，流式细胞仪检测不同日龄小型猪外周血单个核细胞产生IFN-γ的频率。结果3日龄、2月龄、6月龄、1周岁及2周岁小型猪的外周血单个核细胞产生IFN-γ的频率分别为2．73％、3．80％、10．00％、38．09％及41．03％。结论小型猪免疫细胞功能具有明显的发育时限。1周岁以上小型猪的免疫细胞功能发育基本成熟。     

超声引导下穿刺注药治疗未破裂型异位妊娠

由于超声诊断技术的广泛运用,临床上越来越多的异位妊娠(ectopic pregnancy,EP)病例可得到早期诊断,从而为异位妊娠的早期非手术治疗提供了可能[1-3]。我院自2004年5月以来,在超声引导下经腹经阴道穿刺治疗未破裂型异位妊娠共9例,现报告如下。资料与方法一、研究对象患者共9例。年龄26~39岁,平均年龄32.1岁。至穿刺时停经天数为41~77d,平均54.7d。腹痛6例,程度轻。阴道出血2~28d,平均9d,量少,点滴状,咖啡色或暗红色,淋漓不尽。均有流产史,其中人流史7例(有人流史者中1例有右侧输卵管妊娠史,右侧输卵管已切除),药流史1例,自然流产史1例。包…     

复杂骨盆骨折的早期急救处理

目的探讨复杂骨盆骨折的早期急救处理方法及疗效。方法回顾性分析我院2006年1月至2010年4月收治的复杂骨盆骨折23例资料,采取重症监护为主、多科协作、早期积极处理并发症和合并症进行治疗,研究死亡例数、住院时间、X线结果、骨折愈合等临床指标。结果除2例患者死亡外,余病例术后双下肢等长,行走步态正常,未遗留严重后遗症。Majeed评分,优良率为87％。结论及时、快速、有效的早期处理,才能降低复杂骨盆骨折的死亡率和并发症,重症监护为辛、多科协作、早期积极处理并发症和合并症是治疗复杂骨盆骨折的重要保证。     

牛Ⅱ型胶原蛋白诱导VSIG4-/-鼠的关节炎模型

目的以Ⅱ型胶原蛋白诱导的VSIG4-/-(C57BL-6背景)小鼠关节炎模型为研究对象,探讨VSIG4在RA疾病进程中的作用。方法取SPF级DBA/1、VSIG4-/-(C57BL-6背景)以及Ncf1-/-(C57BL-6背景)小鼠,以牛Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)与完全佛氏佐剂完全乳化,尾根部皮下注射,在第21天以牛Ⅱ型胶原蛋白与不完全弗氏佐剂加强免疫获得CIA模型。定期观察小鼠关节改变,并进行关节评分。用H&E染色法观察小鼠关节组织病理学改变并采用流式细胞术检测脾淋巴细胞以及腹腔巨噬细胞中TNF-α的变化。结果与Ncf1-/-及DBA/1小鼠相似,VSIG4-/-小鼠在牛Ⅱ型胶原蛋白免疫后开始出现明显的多关节肿胀,即小鼠踝关节病理检测显示明显的滑膜增生,炎症细胞浸润以及关节坏死。进一步研究发现来源于VSIG4-/-关节炎模型小鼠与同系正常小鼠相比,虽然脾淋CD4+T巴细胞分泌的TNF-α没有显著性差异(P>0.05),但是腹腔巨噬细胞分泌的TNF-α具有显著性差异(P<0.05)。结论牛Ⅱ型胶原蛋白可诱导VSIG4-/-小鼠的关节炎,而腹腔巨噬细胞分泌的TNF-α在其发病过程中可能起关键作用。     

人BclGL基因siRNA逆转录病毒的制备及其对T淋巴细胞增殖的影响

目的:制备表达针对BclGL基因的siRNA逆转录病毒,研究其对体外培养Jurkat细胞中BclGL基因的沉默效应及Jurkat细胞增殖的影响.方法: 利用siRNA预测软件获取3条siRNA 编码序列,插入pSilencer 5.1-H1构建重组逆转录病毒siRNA表达质粒,脂质体法转染PT67细胞包装重组逆转录病毒pSilencer 5.1-H1-BclGL,体外感染Jurkat细胞,嘌呤霉素筛选病毒感染阳性细胞克隆,实时定量 PCR 及 Western 验证干扰效率;CCK-8法体外检测BclGL基因沉默后Jurkat细胞的增殖能力.结果: 酶切及测序结果证实,表达siRNA的逆转录病毒构建成功,重组病毒表达的siRNA能有效干扰Jurkat细胞内BclGL基因的表达;BclGL表达下调可增强Jurkat细胞的增殖能力ela.结论: 成功制备了表达人BclGL基因 siRNA的重组逆转录病毒,并证实其对Jurkat细胞的生长抑制效应.     

慢性阻塞性肺病伴心力衰竭营养不良的危险因素分析

目的调查慢性阻塞性肺病伴心力衰竭患者营养不良的危险因素,为预防和治疗提供证据。方法回顾性调查2007年1月~2008年10月收治的104例慢性阻塞性肺病伴心力衰竭的患者,以简易营养评价精法评估营养不良,同时筛选出营养不良的危险因素。结果慢性阻塞性肺病伴心力衰竭患者营养不良患病率为56．73％,吞咽不适、感染、厌食、较低的血清白蛋白、较低氧血症及第一秒用力呼气容积等可能为慢性阻塞性肺病伴心力衰竭患者营养不良的危险因素。结论吞咽不适、感染、厌食、较低的血清白蛋白、较低氧血症及第一秒用力呼气容积等可能是慢性阻塞性肺病伴心力衰竭患者营养不良的危险因素,正确的认知和及时的预防会在慢性阻塞性肺病伴心力衰竭患者的营养不良的预防中起到重要作用。     

先天性多指(趾)并指(趾)畸形一家三例

患儿 男,12岁,因"双手并指畸形,双脚多趾并趾畸形"就诊.查体:患儿右手中指、环指近节并指畸形,左手中指、环指及小指并指畸形,双足第2、3趾并趾畸形,双足拇趾末节胫侧多指畸形,双足小趾腓侧多趾畸形.不伴有其它先天异常.