痰标本不染色涂片直接检查的评价

用严重污染咽喉部菌群的痰标本作培养不但花费大而且结果不良。所以在培养前应进行筛选。过去的筛选法是将痰标本涂片作革兰氏染色镜检,观察涂片中的鳞状上皮细胞(SEC,squamous epi-thelial cells)或/和多形核白细胞,以判断标本     

幽门螺杆菌定植机制的研究进展

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种定植于人类胃和十二指肠中的革兰阴性细菌,世界上有1/2以上的人携带Hp,且大多数分布在发展中国家[1].     

抗幽门螺杆菌rHpaA鸡蛋黄抗体的研制

目的：采用基因工程技术表达重组幽门螺杆菌黏附素rHpaA，以此蛋白为抗原制备抗rHpaA的高特异性鸡蛋黄抗体。方法：诱导重组质粒pQE30-HpaA在大肠杆菌中大量表达rHpaA蛋白，用rHpaA免疫鸡，以水稀释法联合盐析法提取纯化IgY，采用Bradford法测定含量，SDS—PAGE电泳分析纯度，Western blot鉴定抗原特异性，ELISA测定效价和巴氏消毒后的活性。结果：IgY提纯后含量为24．6mg／ml，纯度约为90％，Western blot显示在相对分子量30000处出现单一条带，ELISA效价为1：12800，巴氏消毒后未见效价损失。结论：成功获得了高浓度、高纯度、高效价、耐巴氏消毒的特异性IgY，为进一步制备预防幽门螺杆菌感染的特异性IgY制剂奠定了基础。     

青霉素结合蛋白PBP1a的克隆表达和对肺炎链球菌耐药性的影响

目的克隆并表达肺炎链球菌青霉素结合蛋白PBP1a,探讨其对青霉素耐药的影响。方法化学合成肺炎链球菌含STMK区的pbp1a基因片段,PCR扩增后进行1.0%琼脂糖凝胶电泳鉴定。将扩增的pbp1a基因连接pUC19载体,构建重组质粒pUC19-pbp1a,转化DH5α,PCR扩增后进行1.5%琼脂糖电泳分析和DNA测序鉴定。将pUC19-pbp1a转化对青霉素敏感、中度敏感和耐药,并存在不同的pbp1a、pbp2b突变的肺炎链球菌,SDS-PAGE分析PBP1a的表达,并测定青霉素对转化菌的MIC。结果 pbp1a基因扩增产物经琼脂糖凝胶电泳为330bp,大小与预期一致。重组质粒基因全长为360bp,扩增产物约330bp,测序无碱基缺失、插入等突变。重组质粒转化存在不同的pbp1a、pbp2b突变和对青霉素不同敏感性的肺炎链球菌后,大量表达约110ku蛋白,其中对青霉素敏感和中度敏感的无pbp1a突变株MIC无变化,对中度敏感菌中的pbp1a突变株MIC略有变化,对存在pbp1a突变的耐药菌株MIC显著降低(P<0.01)。结论在肺炎链球菌中成功表达了青霉素结合蛋白PBP1a,可使其对青霉素的耐药性显著降低。     

急性δ肝炎的血清学诊断

肝炎δ病毒(HDV,hepatitis delta Virus)的感染可在乙型肝炎病毒(HBV)的感染时发生,也可是乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者的二重感染。以前诊断HDV 感染是从血清中检出抗HD,但据报道该抗体在急性自限性感染的晚期才能检出或根本测不出。作者对63名患肝炎(HBsAg 阳性)的静脉毒瘾     

应用PBL教学法进行医学微生物学教学的体会

PBL即以问题为基础的学习,是一种有别于传统教学的新的教学模式,是由美国神经病学教授Barrows于1969年在加拿大麦克玛斯特大学医学院首先试行的一种教学方法[1],目前全世界很多医学院校采用了PBL教学,我们在医学微生物学教学中也部分采用了PBL教学模式,实践证明,PBL是一种高效率的教学模式,可以增强学生学习的主动性并提高其分析问题和解决问题的能力.     

重庆地区幽门螺杆菌对甲硝唑的耐药性和耐药机制的研究

目的了解重庆地区幽门螺杆菌(Heliobacter pylori,Hp)对甲硝唑的耐药情况,探讨Hp对甲硝唑耐药的分子机制,以助于指导临床用药。方法分离培养获得96株Hp,采用琼脂稀释法进行体外抗生素敏感试验,检测Hp对甲硝唑的耐药率,比较主城区和周边区县的差异。挑选甲硝唑耐药Hp 44株,提取细菌DNA,PCR扩增rdxA基因。T-A克隆后测序,比较NCTC11637和44株临床分离株的基因序列。结果重庆地区Hp对甲硝唑的耐药率为91.67%,主城区和周边区县耐药率无统计学差异(P>0.05)。与NCTC11637的基因序列比较,耐药Hp的rdxA基因出现插入突变和碱基替换突变。结论重庆地区Hp对甲硝唑的耐药率较高,因此,甲硝唑不应再用于抗Hp治疗。另外,部分甲硝唑耐药Hp存在rdxA基因突变,故rdxA基因突变可能是重庆地区甲硝唑耐药的重要原因。     

血清CagA IgG在根除幽门螺杜菌过程中的诊断价值

多年来,众多学者的研究表明幽门螺杆菌(Helicobacter pylo ri,Hp)是慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌等多种胃疾病的重要致病因素,根除Hp感染已具有重要的临床意义[1].但根除效果的观察较困难,常需经胃镜取胃粘膜组织.多次检查,病人难以接受.国外资料报道,Hp被清除后,血清特异IgG明显下降,但所需时间长, 且难以降至正常水平[2].近年的研究表明,临床分离的Hp可分为产细胞空泡毒素( Vacuolating cytotoxin,Vac)的Toxin+和不产Vac的Toxin-两种类型,所有的Toxin+ 株能表达一种蛋白质,称为细胞毒相关基因抗原(cytotoxin associated gene antigen,Cag A).CagA在Hp中含量极微,却能引起强烈的免疫反应.     

一种新的分离A族乙型溶血性链球菌的选择培养基

用含羊血琼脂培养基(SBA,Sheep blood ag-ar)分离咽喉拭子中的A族乙型溶血性链球菌(GA-BHS group A beta-hemolytic streptococci),是一种广泛使用的方法,但常因上呼吸道正常菌群(NRF,normal upper respiratory tract flora)大量生长而使分离效果欠佳。本文介绍一种在羊血琼脂基中加有结晶紫、粘菌素和三甲氧苄胺嘧啶—磺胺甲基乙恶唑的新的选择培养基(ssA,sele c-tive group A streptococcus agar),并比较了两者对咽拭子分离的结果。     

龟分枝杆菌药物敏感性与耐药性探讨

目的：探讨龟分枝杆菌对抗生素的敏感性和耐药机理。方法：从我市工厂医院内感染标本中分离龟分枝杆菌12株。用琼脂扩散法测定抗生素的敏感性，用滤纸片进行联合药敏试验，并提取、鉴定质粒，用氟哌酸消除质粒。结果：42种抗生素中，3株龟分枝杆菌龟亚种对大多数氟喹诺酮类、氨基糖甙类的抗生素敏感。对抗结核药利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇敏感。9种脓肿亚种对大多数氨基糖甙类的抗生素敏感，对氟喹诺酮类的环丙沙星敏感，对多数抗结核药耐药。在药物间均为无关作用。从6株脓肿亚种中提取出一个9．1kb质粒，消除质粒后耐药性不变。结论：龟分枝杆菌是一种对多种抗生素耐药的细菌，药物敏感性差异较大。其耐药性与质粒传递无关。