rhTPO 对60Co 照射小鼠造血系统影响的研究

目的为了检测ＴＰＯ的体内活性及其对血小板减少的治疗作用，寻找用以治疗辐射及化学药物等所致骨髓损伤造成的血小板减少与缺乏，缓解临床上的出血症状，降低死亡率的一种新途径。方法本实验应用基因工程的方法重组了人的ＴＰＯ，取昆明种正常雄性，经一次５．０Ｇｙ６０Ｃｏγ射线全身照射小白鼠为动物模型，通过对外周血血象的观察，及小鼠骨髓造血祖细胞培养的检测，研究了ｒｈＴＰＯ在体内对６０Ｃｏ全身照射处理小鼠的造血系统的影响。结果实验表明，ｒｈＴＰＯ能够减轻照射对小鼠外周血血小板及骨髓造血祖细胞中巨核系祖细胞的影响，并有促进其早期恢复的作用，且这种作用是量效相关的。结论提示，ＴＰＯ是巨核细胞系统较特异的正调控因子，具有促进巨核细胞增殖发育和刺激血小板生成的作用，是临床治疗骨髓组织损伤引起的血小板减少和缺乏及贫血的有希望的生物治疗药物。     

MUC1 粘蛋白基因表达在诊断乳腺癌隐性淋巴结转移中的临床运用

采用特异、敏感的ＲＴ－ＰＣＲ技术,检测来自２０例乳腺癌病人的１０８个ＨＥ染色阴性的腋窝淋巴结ＭＵＣ１ ｍＲＮＡ的表达,结果ＭＵＣ１１ ｍＲＮＡ在１０８个ＨＥ染色阴性淋巴结中阳性检出率为６６％。提示：这些淋巴结中存在肿瘤隐蔽淋巴结转移,这种转移可能是一个或数个肿瘤细胞的转移,以此来提高微转移诊断率,可指导术后治疗,延长患者生存期,结果表明：ＭＵＣ１１ ｍＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ分析法可用于乳癌淋巴结微转     

GST-π和MDR1 在乳腺癌中共表达水平及其临床意义

目的 :研究谷光苷肽S 转移酶 (GST π)和多药耐药基因 (MDR1)mRNA在乳腺癌组织中的表达水平 ,探讨其共表达机制及在临床的应用价值。方法 :复合定量RT PCR技术 ,检测 79例乳腺癌组织中耐药相关基因的表达水平 ,其中MDR179例 ,GST π 6 5例。观察DMR1和GST π的共表达率并与TNM分期、受体表达、是否术前化疗作相关分析。结果 :乳腺癌组织中MDR1和GST π阳性率分别为 96 2 %和 70 7% ,共表达率为78 5 % ,两者的表达水平明显相关。MDR1和肿瘤大小相关 ,而MDR1和GST π均与雌激素、孕激素受体表达及是否术前化疗无关。MDR1、GST π共表达和单独表达率与是否术前化疗无关 ,而MDR1表达水平化疗后增高 ,GST π表达水平无显著差异。结论 :MDR1、GST π共表达是乳腺癌耐药的特征之一 ,而MDR1可能发挥了主导作用。GST π和MDR1表达水平呈明显正相关 ,说明两者可能有互相调节机制。监测MDR1水平的变化可以预测继发性耐药     

钙调神经磷酸酶对前B淋巴细胞及其转化的白血病细胞凋亡影响的研究

本研究比较钙调神经磷酸酶（calcineurin,PP2B,PP3）在小鼠前B淋巴细胞系（S9）及其转化的白血病细胞系（S4C2）中的差异表达,并探讨其参与白血病细胞凋亡的可能机制.用实时定量PCR技术检测H2AX磷酸化酶ATM、ATR、DNA-PKs、JNK1、P38和γ-H2AX磷酸酶PP1、PP2A、calcineurin、PP4、PP6、PP5 γ-PP2c、WIP-1在S9细胞和S4C2细胞之间的表达差异.用CCK-8法和流式细胞术检测伊马替尼（IM）和环孢霉素A（CsA）对细胞的毒性作用和凋亡的影响.利用Western blot技术检测药物对S9细胞和S4C2细胞凋亡的影响.结果发现,钙调神经磷酸酶基因在白血病细胞S4C2中的表达约为S9细胞的3.5倍,而其余基因的表达在两种细胞间无明显差异.IM和CsA对S4C2细胞的促凋亡作用明显强于S9细胞,同时两种药物对S4C2细胞毒性作用高于对S9细胞的毒性作用.钙调神经磷酸酶蛋白在S4C2细胞中的表达高于S9细胞.CsA特异性抑制钙调神经磷酸酶活性后,DNA损伤标记物γ-H2AX在S9细胞的表达明显低于S4C2细胞,而伊马替尼对其表达的影响在两细胞系之间无明显差异,联合应用两种药物时γ-H2AX在S9细胞的表达也低于S4C2细胞.结论：钙调神经磷酸酶在B淋巴细胞白血病细胞中发挥一定的抗凋亡作用,环孢素A抑制钙调神经磷酸酶活性促进了白血病细胞的凋亡.     

8.25Gy照射后大鼠血栓形成能力的改变

以往工作表明,8.25Gy照射后3天大鼠外周血小板数相当高时,血小板聚集功能已明显降低;血浆纤维蛋白原含量却明显升高.为了解照后早期整体凝血功能障碍,我们使用较公认的能综合反映机体凝血功能状态的整体血栓形成法,观察了8.25Gy照射大鼠血栓形成变化.结果表明:(1)照后6h血小板数和血栓重量都未见明显改变.照后1天血小板数虽明显降低,但血栓重量变化不明显.照后3天血小板数明显增高时,血栓重量却明显降低.照后     

辐射对大鼠血小板寿命和分布的影响

为了认识影响照后血小板降低的因素,我们利用~(51)Cr标记法观察了照射、切脾、522和短棒菌苗等对大鼠血小板寿命及其在脏器中分布的影响。结果表明: 供体接受825拉德照射后早期,其血小板经标记输给照射同样剂量的受体时,半寿期比正常组缩短6.7小时,同样血小板在正常受体循环中的半寿期仅缩短2小时,提示受体照射对外周血小板寿命的影响不可忽视。     

抑郁症患者神经内分泌节律变化的对照研究

目的 探讨抑郁症患者下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴、下丘脑-垂体-甲状腺(HPT)轴的功能和节律变化与临床症状晨重夕轻之间的关系.方法 采用放射免疫法对49例符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-Ⅳ)重性抑郁发作患者及38例对照组,对早7:00、晚7:00血浆皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、三碘甲状腺原胺酸(T3)、四碘甲状腺原胺酸(T4)、甲状腺刺激素(TSH)水平进行测定,采用多因素方差分析比较2组各项指标的变化、并与临床症状之间的关系进行分析.结果 病例组早晨血浆CORT、早晨、晚间TSH水平[分别为(365.94±120.78)nmol/L,(6.24±2.47)μIU/ml,(6.68±2.42)±IU/ml]较对照组[(284.91±83.39)nmol/L,(3.82±1.75)±IU/ml,(4.01±1.69)μIU/ml]明显增高,差异有显著性(P<0.05);病例组早晨、晚间血浆T4水平较对照组显著降低(P<0.05);血浆皮质醇水平的早晚变化在病例组与对照组之间差异有显著性(P<0.001);病例组血浆CORT、T3、T4、TSH水平的早晚变化在单相和双相抑郁障碍、伴有和不伴有精神病性症状的临床亚型之间均差异无显著性(均P>0.05).结论 抑郁症患者血浆皮质醇水平存在早晚异常变化,可能是抑郁症的一项特异的生物学标志.     

腋淋巴结阴性乳癌患者MUC1 mRNA的表达及其临床意义

目的：探讨通过检测ＨＥ染色阴性淋巴结中ＭＵＣ１ ｍＲＮＡ的表达，以期提高乳癌患者微转移灶诊断率的临床意义。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测来自２０例乳腺癌患者的１０８个ＨＥ染色阴性的腋窝淋巴结ＭＵＣ１ ｍＲＮＡ的表达。结果：在１０８个ＨＥ染色阴性淋巴结中ＭＵＣ１ ｍＲＮＡ阳性检出率为６６％。结论：提示此类乳癌患者中存在肿瘤隐蔽淋巴结转移，对术后治疗具有指导意义，表明ＭＵＣ１ ｍＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ分析     

不同方式诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株的比较

目的 研究不同诱导方式建立的卵巢癌顺铂耐药细胞株的耐药机理。方法 采用大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立卵巢癌顺铂耐药细胞株Skov3/CDDP-P和Skov3/CDDP-50。结果 Skov3/CDDP-P和Skov3/CDDP-50的耐药指数分别为3．7和48．6,伴有形态改变、生长减慢、细胞周期改变等。耐药细胞株的细胞内药物浓度降低,与多药耐药相关基因（MDR1）、多药耐药相关蛋白（MRP）和肺耐药蛋白（LRP）的表达增强有关。谷胱甘肽S转移酶（GST－π）的表达无明显变化,拓朴异构酶Ⅱ（TOPOⅡ）活性轻度下降。不同诱导方式存在差异。结论 顺铂耐药涉及多个相关基因的表达,持续诱导方式容易产生耐药。     

应用噬菌体随机肽库筛选肿瘤MUC1/Y黏蛋白结合肽

目的：探索用噬菌体随机肽库筛选可用于肿瘤导向治疗的新型小分子载体。方法：以MUC1/Y黏蛋白的胞外段蛋白（MUC1/Yex）为靶分子,用凝胶亲和法和酶联板法分别筛选十二肽噬菌体随机肽库,ELISA鉴定阳性克隆,DNA序列测定后确定MUC1/Yex结合肽的氢基酸序列;免疫组化鉴定阳性噬菌体克隆及正常及肿瘤细胞的结合能力及特异 性。结果：通过4轮筛选,共获得3种MUC1/Yex的结合肽,分别为HHWHSRSQLSWF,HLKHKNYLPPTP和GNWYRHPHYLQP,其中HXXHS表位可能在与MU1/Yex的结合中起重要作用。阳性噬菌体克隆可与肿瘤细胞系MCF7,OVCA3,而不与正常外周血淋巴细胞结合。结论：筛选获得的MUC1/Yex结合肽具有一定的亲合力和肿瘤特异性,可进一步用于肿瘤导向治疗的研究。