荧光定量PCR法在重组逆转录病毒pLXSN-BDNF滴度测定中的应用

目的制备含大鼠脑源性神经营养因子（BDNF）基因的逆转录病毒，建立荧光定量PCR测定滴度的方法。方法扩增BDNF基因，构建重组质粒pLXSN-BDNF，将其转染包装细胞，经G418筛选、病毒浓缩后用荧光定量PCR法和克隆形成法测定滴度。结果经PCR、酶切和测序鉴定，BDNF基因成功插入逆转录病毒载体中，筛选得到稳定的分泌重组病毒细胞系。重组病毒100倍浓缩后经荧光定量PCR法和克隆形成法测定的滴度分别为6．92×10^6拷贝/ml和3．2×10^5CFU/ml，两种方法测得的结果差异有统计学意义（P〈0．05）。结论成功扩增BDNF基因，制备了重组病毒pLX—SN-BDNF，建立了荧光定量PCR检测滴度的方法，为基因治疗青光眼性视神经损伤的实验研究提供重要参考指标。     

泪点栓子对干眼病患者泪膜功能的影响

目的 评价一种新型泪点栓子对干眼病患者泪膜功能的影响.方法 采用美国产新型泪点栓子治疗62例(123只眼)确诊为干眼病的患者,询问治疗前后患者的主观症状、检查治疗前后的泪膜破裂时间、荧光素染色情况和泪液分泌量的变化.结果 泪点栓子治疗后干眼病患者主观症状明显减轻;治疗后泪膜破裂时间延长,与治疗前比较差异具有显著意义;治疗前和治疗后角膜上皮点状荧光素染色差异具有显著意义(P<0.05);泪液分泌量有所增加.结论 该新型泪点栓子用于治疗干眼病能限制泪液流出,重建泪液平衡,改善泪膜的稳定性,是一种有效的、可逆的治疗干眼病的方法.     

原发性急性闭角型青光眼的红细胞膜流动性的变化

原发性急性闭角型青光眼(简称急闭)是我国眼科常见病,也是严重的致盲眼病之一。既往对其发病机理多从解剖学方面研究,近年来也有从血液流变学方面研究〔1〕,而从亚细胞水平研究急闭患者红细胞膜流动性的改变,目前未见报道。本文探讨红细胞膜流动性在急闭发病机理中的作用,为临床治疗、判断预后提供理论依据和实验手段。材料和方法一、实验对象:选用我院住院的急闭患者16例,均为一眼为急性发作期,另一眼为临床前期或先兆期,作为实验组,其中男6例、女10例,年龄42至67岁,平均年龄57.93±5.73岁。年龄相匹配的健康正常人为对照组,男6例,女10例。…     

鞭伤致眼球内巨大异物1例

患者宋××,男,农民。用皮鞭打马,被鞭梢自伤右眼。当时眩晕,剧痛倒地,眼内流血,视力丧失。次日来我所检查:右眼视力无光感,眼睑肿胀,球结膜水肿,混合性充血。角膜雾状浑浊,前房充满血液。鼻下     

吡格列酮改善胰岛素抵抗状态下氧化应激水平及分子机制探讨

目的：探讨吡格列酮（Pio）对胰岛素抵抗状态下的氧化应激水平的影响,并初步探讨Pio改善胰岛素抵抗作用的分子机制。方法：用TNF-α（4ng／mL）刺激人肝癌细胞HepG2,建立胰岛素抵抗细胞模型。MTT法观察细胞毒性作用;氧化酶法检测细胞培养液中的葡萄糖浓度;用DCFH-DA荧光探针标记,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）的水平;Western blotting检测氨基末端激酶（JNK）、磷酸化氨基末端激酶（p-JNK）和胰岛素受体底物1（IRS1）的表达。结果：TNF-α刺激HepG2后,导致葡萄糖摄取障碍,细胞培养液上清中葡萄糖浓度显著升高,细胞内ROS的水平显著升高,JNK被激活,IRS1的表达降低。Pio可显著降低ROS的水平,抑制JNK的磷酸化,促进IRS1的表达,改善胰岛素抵抗。结论：Pio通过降低氧化应激水平,抑制JNK信号通路,改善胰岛素抵抗状态。     

NADPH氧化酶源性活性氧在糖尿病及其血管并发症发生中的作用机制

2型糖尿病的发病机制为胰岛素抵抗和胰岛素分泌受损.最新的研究结果显示,氧化应激在糖尿病及其并发症的发病机制中起重要作用.在高游离脂肪酸(FFA)条件下,由于活性氧(ROS)产生过多引起的氧化应激可造成胰岛素抵抗和胰岛B细胞功能丧失,导致糖尿病的发生,而血糖升高进一步加重氧化应激,引发大血管和微血管病变,产生糖尿病并发症.通过研究氧化应激在糖尿病及其并发症发病中的作用机制,为防治糖尿病及其并发症提供新的理论依据.机体内多种酶体参与了ROS的生成,如NADPH氧化酶(NOX)、黄嘌呤氧化酶、线粒体呼吸链酶复合体、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及脂氧合酶(LOX)等.本研究旨在探讨NOX源性ROS在糖尿病及其血管并发症发生中的作用机制.     

青光眼视网膜神经节细胞凋亡的实验研究

目的 研究兔的实验性青光眼视网膜神经节细胞的死亡是否有凋亡参与。方法 前房注入固定的红细胞悬液使免眼压升高,分别在术后７,１４,２１,２８天处死动物,取视网膜组织,ＴＵＮＥＬ标记染色,电镜观察。结果 电镜下可见视网膜神经节细胞死亡特征为典型的凋亡早期特征－核浓染。免疫组ＴＵＮＥＬ法实验组发现神经节细胞凋亡,而正常对照组没有发现。结论 实验性青光眼的视网膜神经节细胞死亡有凋亡参与。这为通过调探凋亡而治疗青光眼的视网膜视神经损伤提供可能。     

DNA损伤在衰老相关疾病中的研究进展

DNA损伤是衰老相关疾病领域的研究热点,可引起细胞周期停滞、凋亡,加快个体衰老速度、增加衰老相关疾病的患病风险。本文将从细胞衰老和个体衰老两个层面阐述其与衰老之间的研究进展,并综述其与衰老常见相关疾病(肿瘤、心血管疾病、阿尔茨海默病)及早衰综合征的关系,为抗衰老研究和临床干预衰老相关疾病提供理论依据。     

POAG手术治疗进展

POAG在药物或激光控制眼压无效时常需手术治疗。目前小梁切除术是治疗POAG最主要的手术方法,但其术中、术后并发症较常见,如前房出血、术后浅前房、滤过道纤维化等。随着手术技术的不断改进,许多治疗POAG的新方法逐渐涌现。Ex-PRESS植入术以其手术切口小、术后并发症少以及无需组织切除等特点已逐渐被广泛应用。此外,SOLX黄金分流器、人工纳米引流植入物、iStent小梁微旁路系统、Eyepass双向青光眼植入物、Aquaflow青光眼植入物、Schlemm′s管成形术、小梁消融术等也分别从不同角度用于POAG的治疗。