人参皂苷Rh2抑制肝癌HepG2细胞迁移的实验研究

目的:研究人参皂苷Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移的影响及其机制。方法:取对数生长期Hep G2细胞,Rh2(10~160μmol/L)诱导,同时设空白对照组,用CCK-8检测Rh2对细胞增殖影响;Transwell检测Rh2对细胞的迁移的影响;荧光素报告基因筛选可能的信号通路;Western blot检测Hep G2细胞中P-ERK、ERK、P-P38、P-38、P-JUK、JUK、MMP3等蛋白的表达;定量PCR方法检测AP1、MMP3基因的表达;荧光显微镜分别观察AP1、MMP3蛋白在细胞内的表达及分布。结果:CCK-8检测结果显示Rh2对肝癌Hep G2细胞生长抑制呈剂量和时间依赖性;Transwell检测显示Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移有明显的抑制作用;荧光素报告基因筛选出AP1转录因子;Western blot检测结果显示P-ERK、MMP3蛋白表达水平呈下降趋势,PJUK、P-P38蛋白表达水平明显升高,ERK、JUK、P38蛋白则无明显变化;定量PCR方法结果显示:AP1、MMP3的基因表达下降。荧光结果显示:AP1、MMP3均分布在胞质内,随药物浓度的增加其荧光表达量减弱。结论:人参皂苷Rh2可通过激活MAPK通路来抑制肝癌Hep G2细胞的迁移。     

吴茱萸碱逆转K562/Adr细胞多药耐药的实验研究

目的 探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对白血病K562细胞及其耐药株K562/Adr的增殖、细胞周期及多药耐药性(MDR)的影响。方法用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测EVO和/或柔红霉素(DNR)对细胞增殖的影响,并计算耐药指数(RI)和逆转倍数(RF);流式细胞仪检测EVO和/或DNR对K562及K562/Adr细胞周期的影响;流式细胞仪检测K562及K562/Adr细胞内DNR的荧光强度;定量PCR检测K562及K562/Adr细胞中MDR1基因的表达;Western blotting检测K562及K562/Adr细胞中MDR1、BCRP蛋白的表达。结果EVO、DNR作用于K562和K562/Adr细胞后,细胞增殖受到抑制,且呈剂量和时间依赖性;与K562细胞相比,K562/Adr细胞对DNR的RI为30.54,K562/Adr细胞对EVO的RI为19.09。当EVO(0.125 gmol/L)与不同浓度DNR联合作用后,能使DNR对K562/Adr细胞的IC_(50)明显下降,DNR+EVO对K562/Adr细胞的RF为12.07;EVO、DNR单独或联合作用于K562及K562/Adr细胞后,能够使K562/Adr细胞BCRP、MDR1蛋白及mRNA表达水平均明显下降。结论EVO能有效逆转白血病K562/Adr细胞对DNR的耐药现象,而这种作用可能与EVO通过减少细胞膜上多药耐药蛋白MDR1的表达有关。     

人参皂苷Rh_2通过激活GSK-3β降解β-catenin发挥抗肝癌作用研究

目的探讨人参皂苷Rh2抗肝癌作用机制。方法 HE染色观察HepG2和HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠肿瘤组织的细胞形态;免疫组化检测GSK-3β、β-catenin和MMP-3表达;ELISA法检测肿瘤细胞GSK-3β活性;PCR检测GSK-3β、β-catenin、Bcl-2、Cyclin D1、Bax和MMP-3基因的表达;Western blotting蛋白印迹法检测GSK-3β和β-catenin的表达。结果 HepG2组和HepG2-β-catenin组荷瘤裸鼠肿瘤细胞核成异型性,占整个细胞比例大,但HepG2-β-catenin组更明显。HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组和HepG2+人参皂苷Rh2组肿瘤细胞胞核固缩,出现大量破碎细胞,而HepG2+人参皂苷Rh2组肿瘤细胞核固缩及破碎细胞更明显。免疫组化结果显示人参皂苷Rh2诱导HepG2及HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠后,GSK-3β表达增强,β-catenin、MMP-3表达降低;HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin、MMP-3表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,而GSK-3β表达则无明显差异。ELISA结果显示,人参皂苷Rh2诱导HepG2及HepG2-β-catenin荷瘤裸鼠后,GSK-3β的活性均升高。PCR结果显示,HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin、Cyclin D1、Bcl-2基因表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,Bax基因表达增强更明显,而GSK-3β基因表达无明显差异。Western blotting结果显示,HepG2+人参皂苷Rh2组中β-catenin蛋白表达弱于HepG2-β-catenin+人参皂苷Rh2组,而GSK-3β蛋白表达无明显差异。结论人参皂苷Rh2对肝癌的抑制作用是通过激活GSK-3β降解β-catenin而实现的,且能抑制肿瘤的转移。     

一次别开生面的学会活动

上海解剖学会组织胚胎专业组于1996年10月18举办了一次以上海几所医学院校组胚工作者为主的联谊会,到会者有六十余人.这天正值上海开展敬老节活动期间,因而联谊会更是热闹非凡许多已退居二线的组胚老前辈也应邀出席了会议,如谢文英、朱继业、吕卫、薛同一、陈丽琏、王惠仁、童夙明、周孝湖等教授和靳安庸老师都兴致勃勃地来参加,这次联谊会的主题是:交流工作、广交朋友、加强联系、互通信息,改变了以往仅论文报告为唯一形式的学会活动.中国解剖学会和上海解剖学会副理事长黄瀛教授驱车数十里赶来发表了热情扬溢的贺词他说:这在全国来说可能也属一种富有新意的形式,因而吸引了上海老中青组胚工作者欢聚一堂.用老话说就是高明满座.继之,各校的室主住介绍了他们有特色的工作,每人限时10分钟.上海中医药大学夏炎兴教授介绍该校实行学分制的情况;上海铁道大学医学院冯于强教授谈了他们几年采用显微摄像闭路电观带教和切片口试的体会;第二军医大学王代学教授讲述了他们开展原位杂交和细胞凋亡等研究工作概况;上海医科大学钟翠萍教授对他们着手研究电脑多媒体、三维重建用于教学作了介绍;上海第二医科大学吴明章教授作了“培养和发展教研室的教学、科研和科技服务的功能”的专题发言,同时冯京生教授介绍了     

高糖合并温热下小鼠巨噬细胞对BGC—823人胃癌细胞的杀伤作用

应用自然杀伤试验-LDH释放改良法测定昆明种小鼠腹腔巨噬细胞对BGC-823人胃癌细胞的自然杀伤作用.结果显示,在巨噬细胞与胃癌细胞的混合培养液中加入不同浓度的糖(160mg/dl和300mg/dl)增加了巨噬细胞对胃癌细胞的杀伤作用(P<0.05);同时,实验表明,在温热条件下(39℃～41℃)未见巨噬细胞对胃癌细胞的杀伤作用随培养温度的升高而提高,因而认为主要是因高糖条件下提高了肿瘤细胞的热敏感性和降低了肿瘤细胞的pH,从而促进了巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用.     

正常人肝组织结构和功能单位的形态计量24例分析

目的对２４例正常成人肝小叶、门管小叶及肝腺泡等不同结构和功能单位进行形态计量测定。方法应用Ｑｕａｎｔｉｍｅｔ５７０Ｃ图像分析仪进行形态计量分析。结果测得正常肝小叶、门管小叶和肝腺泡的面积分别为１．４７２±０．２７３ｍｍ２、０．９１１±０．３０４ｍｍ２和０．６０２±０．１５８ｍｍ２；周长分别为４．２８９±１．０２２ｍｍ、４．１０６±０．９６４ｍｍ和３．２１８±０．５４８ｍｍ。肝小叶中央静脉偏位系数１．０４２±０．０３１；相邻门管小叶汇管区距离为０．８２１±０．２４８ｍｍ。结论本文为肝疾病的病理研究与诊断提供正常形态结构的客观参照指数。     

正常肝组织与肝硬化二维结构的形态计量比较分析

目的对２４例正常肝组织和１４例肝硬化进行组织学计量分析比较，提供正常肝小叶的相关数据及肝硬化各阶段及某些病理类型的客观指标，为早期肝硬化的病理诊断、发生发展以及肝硬化逆转治疗在病理指标的疗效判断上提供客观依据。方法应用Ｑｒｕａｎｔｉｍｅｔ５７０Ｃ图像分析仪对正常肝组织和肝硬化组织平面结构进行形态计量。结果测得正常肝小叶的面积和直径分别为１．４７２±０２７３ｍｍ２、１３６９±０５８９ｍｍ。正常肝组织、早期肝硬化、门脉性肝硬化以及坏死后性肝硬化的小叶中央静脉偏位系数分别为１０４２±００３１、１２０７±００５４、１８３４±０１２５、２０９１±０５２５；肝小叶大小差异系数分别为：１４７８±０２４０、１６７５±０３５４、２５８６±０４７５、５０４６±０８９４；肝小叶间质比分别为３２７７±０８８５、１２８７５±１６４５、２８５６２±２２７４、５４７６８±８０７１。结论正常肝组织、早期肝硬化，门脉性肝硬化和坏死后性肝硬化之间，多数参数差异有显著性及高度显著性，反映了肝硬化的发生和发展以及主要病变特征。     

服棉酚后久未恢复者睾丸微细结构观察——对棉酚抗生育可逆性的探讨

本研究观察服用棉酚1560～5280毫克,停药2.5～6年多尚未恢复的志愿者睾丸活检6例,正常2例。光镜下睾丸结构损伤分:精原细胞减少(1例),仅见支持细胞(3例),混合性(2例)等三型,均属严重损伤。电镜下除生精细胞受损外,值得注意是支持细胞滑面内质网明显扩张,线粒体空化;基膜及血管壁增厚。结果表明这些服药者生精功能恢复困难。对其原因作了讨论。