应用皮下负压引流器预防下消化道开放手术切口愈合不良回顾性队列研究

目的 探讨应用皮下负压引流器预防下消化道开腹手术切口愈合不良的价值。方法 回顾性分析2018年10月至2020年1月首都医科大学附属北京友谊医院普外科收治的113例下消化道开放手术病人的临床资料。根据腹壁缝合时是否放置皮下引流器,分为皮下引流组（78例）和对照组（35例）。比较两组病人切口愈合情况,分析切口愈合不良与临床特征的关系以及开放手术切口愈合不良的影响因素。结果 113例病人中,切口愈合不良发生率为14.2%（16/113）,其中皮下引流组切口愈合不良发生率为5.1%（4/78）,对照组为34.3%（12/35）,两组差异具有统计学意义（P<0.05）。多因素分析提示,影响切口愈合不良发生的独立危险因素为未放置皮下引流器（OR=14.510,95%CI 3.411~61.735,P=0.001）、糖尿病（OR=7.064,95%CI 1.286~38.789,P=0.024）及吻合口漏/残端漏（OR=15.004,95%CI 1.876~119.996,P=0.011）。结论 下消化道开放手术切口愈合不良发生率较高,应用皮下负压引流器能有效减少其发生,且操作方便、价格低廉。     

腹腔镜技术在腹股沟疝无张力修补术后感染治疗中应用价值研究

目的 探讨腹腔镜技术在腹股沟疝无张力修补术后感染治疗中的应用价值。方法 回顾性分析2015年3月至2018年12月首都医科大学附属北京朝阳医院疝和腹壁外科收治的行感染清创手术的124例无张力腹股沟疝修补术后感染病人的临床资料,其中18例直接行开放清创术,106例行腹腔镜探查。结果 106例行腹腔镜探查的病人中43例病人腹股沟区存在组织粘连并在腹腔镜下完成粘连分离;8例病人在腹腔镜下完成清创操作,98例病人腹腔镜探查后联合开放清创术。所有病例手术时间为（67.6±34.9）min。术后3例病人切口愈合不良,对症治疗后痊愈,术后随访1年,22例病人再次感染入院治疗,4例病人腹股沟疝复发再次入院行腹腔镜腹股沟疝修补术,无病人出现术后慢性疼痛等其他并发症。 结论 对于腹股沟疝修补术后发生感染的病人,腹腔镜技术安全有效,能够减少病人手术创伤和痛苦,具有一定的临床价值。     

microRNA-671-5p在肝细胞癌中的表达及其负向调控丝切蛋白2与上皮细胞-间质转化的关系

背景与目的:近年研究发现,microRNA-671-5p(miR-671-5p)参与了多种恶性肿瘤的发生发展,同时与多种病毒介导的肝损伤相关,但其与肝细胞癌(HCC)之间的关系目前仍未见报道。本研究的目的为观察miR-671-5p在HCC中的表达情况,分析其功能及其与HCC生物学行为及临床病理特征的联系,并初步探讨作用机制。方法:用qRT-PCR检测80例HCC组织及癌旁组织样本、不同HCC细胞系(Hep3B、MHCC-97H、HepG2、SMMC-7721)及人正常肝细胞(L02)中miR-671-5p的表达,且在同时分析TCGA数据库中miR-671-5p在HCC组织与癌旁组织的表达差异。分析miR-671-5p表达量与临床病理因素的关系;用miR-671-5p抑制物敲低MHCC-97H细胞系中miR-671-5p的表后,分别采用CCK-8实验及Transwell实验分别检测HCC细胞转染miR-671-5p抑制物后增殖、侵袭及迁移能力的变化。利用TargetScan及Starbase网站预测miR-671-5p的靶基因,并通过Western blot、双荧光素酶实验及TCGA数据库分析验证。用Western blot观察降低miR-671-5p表达对HCC细胞中miR-671-5p靶基因及上皮细胞-间质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、vimentin)表达的影响,以及在此基础上同时敲低靶基因的表达后,以上蛋白表达的变化。结果:miR-671-5p的表达在HCC组织中明显高于其癌旁组织,在各种HCC细胞系中均明显高于正常肝细胞,且随着样本肿瘤分期与HCC细胞的侵袭力的增加而升高(均P0.05);TCGA数据库分析也显示,miR-671-5p在HCC组织中的表达量明显高于癌旁组织(P0.05)。miR-671-5p的表达水平与AFP水平、肿瘤数目、静脉侵犯、Edmondson-Steiner分级及TNM分期明显有关(均P0.05)。转染miR-671-5p抑制物后,MHCC-97H细胞的增殖、侵袭及迁移能力均明显降低(均P0.05)。生物信息学分析及双荧光素酶实验均显示丝切蛋白2(CFL2)是miR-671-5p潜在靶基因,TCGA数据库分析也显示miR-671-5p与CFL2的表达呈负相关(均P0.05)。降低MHCC-97H细胞中miR-671-5p的表达后,CFL2蛋白的表达水平升高,同时EMT相关蛋白表达明显降低(均P0.05),但同时干扰CFL2的表达后,以上变化均有明显程度的逆转(均P0.05)。结论:miR-671-5p在HCC中表达上调,且与HCC的不良临床病理特征密切相关。miR-671-5p可促进HCC细胞的增殖、侵袭、迁移,其机制可能与抑制CFL2的表达而促进EMT发生有关。     

肝癌免疫微环境与免疫治疗：研究进展与发展趋势

肝癌微环境主要由肿瘤相关巨噬细胞、肿瘤相关中性粒细胞、骨髓源性抑制细胞、肿瘤相关成纤维细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞等细胞组分,以及细胞外基质、细胞因子等非细胞组分组成。免疫微环境在肝癌进程、免疫逃逸和治疗抵抗中发挥重要作用。近期,以调变炎症免疫微环境为基础的免疫治疗取得突破性进展,免疫疗法的出现为肝癌治疗提供了全新的选择,但仍存在客观缓解率较低、不良反应多和耐药问题。因此,深入研究微环境在肝癌发生发展中的作用及探索免疫治疗的未来发展趋势可提高现有治疗手段的应答率,对肝癌精准诊断与治疗有重要的理论价值和临床意义。     

长链非编码RNA RUSC1-AS1对肝细胞癌恶性生物学行的影响及其与微小RNA-326的关系

背景与目的:有研究表明长链非编码RNARUSC1-AS1(lnc RNARUSC1-AS1)与肿瘤的恶性生物学行为密切相关,但其对肝细胞癌(肝癌)的影响尚不清楚。笔者前期研究显示,lnc RNARUSC1-AS1与微小RNA-326(mi R-326)存在结合位点,因此本研究探讨lnc RNARUSC1-AS1在肝癌中的表达,以及是否通过靶向mi R-326调控肝癌细胞生物学行为。方法:用q RT-PCR检测41例肝癌组织和对应癌旁组织中lnc RNARUSC1-AS1与mi R-326的表达。以lnc RNARUSC1-AS1表达抑制质粒/阴性对照质粒、mi R-326模拟物/阴性对照序列、mi R-326抑制物/阴性对照序列为工具,采用MTT法、Transwell法、流式细胞术、Westernblot法观察接受不同转染处理的MHCC97-H细胞的增殖能力、迁移和侵袭能力、凋亡以及相关蛋白表达的变化。采用荧光素酶报告实验分析lnc RNARUSC1-AS1和mi R-326的靶向关系,并用q RT-PCR验证。结果:与癌旁组织比较,肝癌组织中lnc RNARUSC1-AS1表达水平明显升高,mi R-326表达水平明显降低(均P0.05)。转染lnc RNARUSC1-AS1表达抑制质粒或mi R-326模拟物后,肝癌MHCC97-H细胞的增殖能力以及迁移与侵袭能力明显降低,细胞凋亡率明显升高,cyclinD1、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平明显降低,P21、Bax蛋白表达水平明显升高(均P0.05)。MHCC97-H细胞转染lnc RNARUSC1-AS1表达抑制质粒的同时mi R-326抑制物,前者对MHCC97-H细胞以上作用被取消(均P0.05)。双荧光素酶报告实验及q RT-PCR验证结果显示,mi R-326为lnc RNARUSC1-AS1的靶分子。结论:lnc RNARUSC1-AS1在肝癌中表达上调,其可通过靶向调控mi R-326的表达促进肝癌细胞的恶性生物学行。     

微波消融辅助肝切除联合术后TACE治疗BCLC-B期肝细胞癌临床疗效分析

背景与目的:研究显示,术后行经肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗可以给肝细胞癌(HCC)患者尤其是存在复发高危因素的HCC患者带来生存获益,但在获益患者群体的确定上仍存在较大争议。因此,本研究探讨微波消融辅助肝切除联合术后TACE治疗BCLC-B期HCC的临床疗效。方法:收集空军军医大学第二附属医院2010年1月—2014年12月收治的经微波消融辅助肝切除治疗的BCLC-B期2～3个肿瘤、最大直径3cm且微血管侵犯(MVI)阳性HCC患者的临床资料,根据是否行术后辅助TACE治疗分为观察组与对照组,采用Kaplan-Meier曲线进行生存分析,Log-rank检验两组生存差异,并采用Cox回归模型分析影响患者预后的危险因素。结果:共纳入344例患者,其中173例患者接受术后TACE治疗(观察组),171例患者未行术后TACE治疗(对照组)。两组患者基线资料具有可比性。观察组和对照组的1、3、5年总生存率(OS)分别为82.7%、47.4%、28.8%和69.0%、22.3%、15.9%;观察组和对照组的0.5、1、3年无瘤生存率(DFS)分别为86.7%、75.0%、29.6%和73.8%、60.4%、10.6%,观察组的OS与DFS均明显优于对照组(均P0.001)。单因素与多因素分析结果显示,治疗方式、肿瘤直径、白蛋白、总胆红素、HBs Ag阳性均为影响OS与DFS的独立危险因素(均P0.05)。结论:微波消融辅助肝切除联合术后TACE可以给2～3个肿瘤,最大直径3cm且MVI阳性的BCLC-B期HCC患者带来明显的生存获益,但此结论仍需多中心、大样本、高质量研究加以验证。     

宽切缘肝切除术改善自发破裂性肝细胞癌的预后

目的 探讨手术切缘对肝切除术治疗自发破裂性肝细胞癌（spontaneous ruptured hepatocellular carcinoma,SRHCC）患者预后的影响。方法 回顾性分析复旦大学附属闵行医院/上海市闵行区中心医院2012年1月至2017年12月收治的30例SRHCC患者的临床资料,比较切缘范围＞1 cm（宽切缘组,19例）和≤1 cm（窄切缘组,11例）两组患者的临床病理学特征,采用Kaplan-Meier分析比较两组的无复发生存期和总生存期,采用Cox回归分析生存相关风险因素。结果 宽切缘组比窄切缘组3年无复发生存率（13.2% vs 0,P=0.036）和3 年总生存率（17.5% vs 0,P=0.002）高;多因素分析显示血清碱性磷酸酶高值（HR=1.013,P=0.008）、肿瘤分级低分化（HR=3.326,P=0.007）和手术切缘≤1 cm（HR=3.287,P=0.011）为SRHCC患者无复发生存期相关独立危险因素;血清γ-谷氨酰转肽酶高值（HR=1.002,P =0.041）、肿瘤分级低分化（HR=4.411,P=0.005）、肝外转移（HR=3.445,P=0.044）、手术切缘≤1 cm（HR=3.255,P=0.024）是SRHCC患者总生存期相关独立危险因素。结论 采取宽切缘肝切除术能够改善SRHCC患者的临床预后。     

肝细胞特异性HuR基因敲除小鼠模型的表型研究

目的 探讨肝细胞特异性敲除HuR基因对小鼠肝脏功能的影响。方法 从美国Jackson实验室引进LoxP标记的人抗原R（human antigen R,HuR）基因小鼠（HuR^fl/fl）和Alb-Cre转基因小鼠。杂交后,经数代选育配种,建立肝细胞特异性HuR基因敲除小鼠（HuR^LKO）模型。PCR技术鉴别小鼠基因型,蛋白免疫印迹和免疫荧光实验检验小鼠肝脏的HuR表达水平,同时HE染色观察肝脏结构变化。高脂喂养HuR^fl/fl/Alb-Cre和HuR^fl/fl两组小鼠,观察小鼠体重、肝重和肝体比变化,提取血清检测肝脏损伤和脂肪代谢相关指标。结果 PCR成功检测筛选子代小鼠基因型,包括HuR^fl/fl/Alb-Cre和HuR^fl/fl小鼠。蛋白免疫印迹实验和免疫荧光实验证明小鼠肝细胞特异性HuR基因敲除成功。HE染色结果提示HuR^LKO小鼠的肝细胞出现变性水肿、局部坏死。高脂喂养实验提示两组小鼠在肝重、肝体比、AST、ALT、HDL-C、血糖上的差异具有统计学意义（P＜0.05）,但在体重、TG、LDL-C的差异没有统计学意义（P＞0.05）。结论 HuR基因是维持小鼠肝细胞功能的必要基因,Cre-LoxP技术可成功构建HuR^LKO小鼠模型,且特异性高,表型明显,为研究HuR在肝脏各项疾病的发生发展中所扮演的角色,提供了一个很好的疾病模型。     

血流感染的实验室分子诊断研究进展

血流感染(BSI)是一种严重的全身感染性疾病,是由病原微生物侵入血液,繁殖并释放代谢产物及毒素引起的急性感染,随着发病率和严重程度的逐年增加,已成为死亡的主要原因。血培养是实验室血流感染诊断的参考标准和第一线工具,然而,常规实验具有较长的周转时间,无法完全满足临床危重血流感染病人治疗的时间需求。而及早使用有效的抗微生物治疗,能够提高血流感染的治愈率,减少用药时间,降低死亡率。基于分子方法的实验室检测弥补了传统的血培养的局限,可以通过快速鉴定病原体和相关的抗菌药物耐药基因来优化血流感染的诊断和治疗。快速诊断引起感染的微生物和相关的耐药基因对早期给药和改进抗菌治疗很重要。最终,这可能会提高治疗质量和保健的成本效益,并且减少抗菌药物的耐药。