山豆根的化学成分和药理作用的研究进展

山豆根Sophorae Tonkinensis Radix et Rhizoma用药历史悠久,为临床常用药,具有清热解毒、消肿利咽的功效。目前已从山豆根中鉴定出200多种化合物,主要含黄酮类、生物碱类、三萜类等,其中生物碱为山豆根主要活性成分。山豆根作用广泛,对免疫系统、消化系统、循环系统等均有调节作用,具有抗肿瘤、抗炎、护肝、降压、提高免疫、解痉止泻、升血糖等诸多药理作用。综述了山豆根的化学成分和主要药理作用,为山豆根的深入研究提供参考。     

抑颤汤对帕金森病模型大鼠行为学及脑黑质细胞形态学的作用

背景：目前治疗帕金森病(Parkinson disease，PD)仍以多巴胺替代疗法为主，但因其副作用多，有效时间短等弊病，使神经保护性治疗的探索日益受到重视，而中药治疗具有良好的效果且不良反应较少，探讨其作用机制将有利于临床应用。目的：观察抑颤汤治疗PD在保护和促进黑质细胞修复方面的效果及其相关机制。设计：完全随机对照实验研究。地点和对象：解放军总医院医学实验动物中心，实验动物为SD大鼠，分为正常组、生理盐水组、抑颤汤组。干预：6-羟基多巴胺诱发建立PD大鼠模型，抑颤汤组大鼠灌胃法给药，生理盐水组和正常组生理盐水灌胃。给药后第5周开始观察大鼠行为学改变，连续观察4周，给药结束后，各组大鼠断头处死，制备大脑切片，经苏木精-伊红染色后，用光学显微镜及电子显微镜观察脑黑质细胞形态的改变。主要观察指标：各组大鼠行为学改变和脑黑质细胞形态。结果：造模后经阿朴吗啡诱发，正常组大鼠旋转次数平均为22圈／40min，无固定旋转方向；造模组大鼠旋转次数平均为343圈／40min，两组相比差异有显著性意义(t=3．390，P&;lt;0．001)；治疗后，抑颤汤组大鼠旋转次数为340圈／40min，两组相比差异有显著性意义(t=2．648。P&;lt;0．01)。病理形态学观察，抑颤汤组脑黑质细胞数量较生理盐水组明显增多，神经元体积饱满，结构清晰，细胞内高尔基体、线粒体等趋于正常。结论：抑颤汤能明显改善PD模型大鼠的旋转行为，促进受损脑黑质细胞的修复，提示其疗效具有神经保护性特点。     

高磷对牛血管平滑肌细胞钙化及护骨素表达的影响

目的:研究不同浓度磷对体外培养的牛血管平滑肌细胞钙化及其分泌护骨素(OPG)的影响.方法:用不同磷浓度(1.4～2.0 mmol/L)的培养基体外培养牛血管平滑肌细胞,观察细胞钙沉积及骨桥素的表达.用甲σ-酚肽络合酮法测定钙化量,BCA法测蛋白含量,并以细胞蛋白含量标化钙化量.Western blot法测定OPG蛋白表达.结果:(1)培养基磷浓度1.4 mmol/L组细胞仅有少量钙沉积,培养基磷浓度增高及培养时间延长,细胞钙沉积增加,第9天时,培养基磷浓度2.0 mmol/L组与培养基磷浓度1.4 mmol/L组钙沉积差异有显著性[(138.00±12.53)μg/mg protein vs(22.67±2.52)μg/mg protein,P＜0.05].(2)随着培养基磷浓度增加,OPG蛋白表达量亦相应增加.结论:高磷培养基能诱导血管平滑肌细胞发生钙化和OPG表达,且与磷浓度和作用时间有关.     

高原地区不同海拔高度严重烫伤延迟复苏大鼠肺组织中p53的表达及其意义

目的 探讨高原地区不同海拔高度大鼠严重烫伤延迟复苏后肺组织p53的变化规律及意义.方法 雄性Wistar大鼠240只,分别在1517 m和3848 m两个海拔高度随机分为延迟复苏组(DFR,n=50)、即时复苏组(IFR,n=60)和对照组(cG,n=10),建立总体表面积30%的Ⅲ度烫伤模型,分别于伤后1、6、12、24、72和168 h取材.采用组织病理学、组织芯片技术、免疫组织化学染色技术与图象分析技术,观察肺组织病理学改变及p53的表达.结果 p53的阳性表达位于肺泡上皮细胞胞核或胞浆,其表达强度实验组高于对照组,随海拔梯度上升p53表达增强,高海拔组的表达强度高于低海拔组,各海拔高度DFR高于IFR组(P<0.05).结论 p53参与了不同海拔地区大鼠严重烫伤延迟复苏后肺组织的损伤.     

男女泌尿生殖道解脲支原体感染及其耐药性分析

目的：比较不同性别之间泌尿生殖道感染患者解脲支原体感染情况及其耐药性。方法：从65例的尿道和宫颈留取标本进行培养和药敏试验。结果：65例经常规治疗后而解脲支原体培养仍阳性的患者，男性21例，女性44例，其中合并人型支原体感染21例（32．31％），男性7例（33．33％），女性14例（31．82％）；解脲支原体药敏结果显示男女对6种药物的耐药率分别为：强力霉素（38．09％、52．27％）、交沙霉素（4．76％、9．09％）、氧氟沙星（38．09％、70．45％）、红霉素（85．76％、79．55％）、四环素（61．9％、75％）、原始霉素（0、6．82％）。结论：支原体培养，男女之间解脲支原体合并人型支原体的发生率比较差别无显著性意义；解脲支原体耐药性实验显示男女之间耐药性差别亦无显著性意义。     

食管引流型与标准型喉罩通气道用于正压通气的自身对照研究

目的采用随机自身对照设计方法比较食管引流型喉罩通气道(PLMA)和标准型喉罩通气道(SLMA)用于间歇正压通气的有效性。方法选择50例经美国麻醉医师协会(ASA)身体状态分级标准分为1~2级、拟在全身麻醉下实施择期整形外科手术患者。在常规麻醉诱导后,顺序插入PLMA和SLMA,将通气罩内压充气至60cmH2O(1cm H2O=0.098kPa),评价两种喉罩通气道充气前后的肺通气满意度和气道密封压,同时进行光导纤维支气管镜(FOB)评分,确定通气罩的解剖位置。然后将潮气量设定为10ml/kg实施间歇正压通气,记录间歇正压通气后连续5次呼吸的平均呼潮气量和平均吸气峰压。结果在通气罩未充气情况下,插入PLMA后有46例(92%)患者获得了良好和尚可的肺通气效果,而插入SLMA后仅有22例(44%)患者获得了良好和尚可的肺通气效果;PLMA的气道密封压显著高于SLMA(P<0.05)。将通气罩内压充气至60cmH2O,采用PLMA的50例患者均获得良好的肺通气效果,但采用SLMA时仅有28例获得良好的肺通气效果;PLMA所需的充气量和充气后获得的气道密封压均显著高于SLMA(P均<0.05)。采用PLMA时所有患者的气道密封压均高于或等于采用SLMA时;采用PLMA时除2例患者外,其他患者所需的充气量也均高于采用SLMA时。PLMA通气罩位置的FOB评分显著低于SLMA(P<0.05)。采用PLMA维持气道的29例患者和采用SLMA维持气道的21例患者的平均呼潮气量、吸气峰压及维持气道时间差异均无显著性(P均>0.05)。结论与SLMA相比,PLMA可为正压通气提供更好的气道密封压,而且对声门和食管上端具有潜在的隔离作用,用于正压通气时PLMA比SLMA更有效、更安全。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外分离、纯化与培养适宜条件的筛选

目的:为获得大量、高纯度的骨髓间充质干细胞,筛选体外分离、纯化和培养的适宜条件。方法:实验于2006-08/2007-07在解放军兰州军区兰州总医院进行。①实验材料:2月龄SD大鼠,雄性,体质量(100±20)g,由解放军兰州军区兰州总医院实验动物科提供。②实验方法:分别采用全骨髓法(贴壁筛选法)和密度梯度离心法分离和纯化大鼠骨髓间充质干细胞。将采用密度梯度离心法获得的单个核细胞按1×107,1×108,1.5×108,2×108,1×109,2×109L-1的接种密度分别分成1～6组,接种在24孔板内,每组接种6孔。比较细胞出现伸展时间、原代培养时间。于细胞接种后第1,2,3,4,5,6天进行首次换液。将换下的部分细胞置于新的培养皿中进行培养,至少培养3d,观察是否还有新的贴壁细胞出现,以确定首次换液时间。观察体积分数为0.10,0.12,0.15,0.18,0.20血清对原代及传代后细胞生长的影响,比较不同浓度血清中细胞数量、集落形成率。集落形成率=集落数目/接种细胞数目×100%。采用流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞细胞周期。选取第5代扩增的骨髓间充质干细胞,接近完全融合后进行成骨和成脂肪诱导培养。诱导剂分别为:10nmol/L地塞米松、0.05nmol/L抗坏血酸及10nmol/Lβ-甘油磷酸钠;1μmol/L地塞米松、0.5mmol/LIBMX、0.01mmol/L人胰岛素、0.01mmol/L吲哚美辛。并设未加诱导剂培养液培养的骨髓间充质干细胞对照。③实验评估:采用碱粒酶测定成骨诱导后细胞,采用油红O染色鉴定成脂肪诱导后细胞。结果:①细胞出现伸展时间、原代培养时间:密度梯度离心法培养细胞出现伸展时间与全骨髓法相比,差异无显著性意义。密度梯度离心法原代培养时间较全骨髓法长[(9.41±1.11),(14.73±2.86)d,P<0.05]。②不同接种密度对密度梯度离心法所获细胞生长影响:1×109L-1组细胞出现伸展时间及原代培养细胞融合时间较早。1×107L-1组培养20d内不能传代。③首次换液时间对细胞生长的影响:第5天开始在换下的液体中,很少有再贴壁的细胞出现。因此首次换液时间应为第5天。④不同体积分数血清对细胞生长的影响:在其他条件相同的前提下,骨髓间充质干细胞在含体积分数为0.12胎牛血清中细胞集落形成率最高。⑤成骨及成脂诱导:成骨诱导的骨髓间充质干细胞经碱粒酶测定,结果钙化结节呈蓝色。成脂诱导的骨髓间充质干细胞经油红O染色,苏木精-伊红复染后胞内脂滴呈桔红色,核呈蓝色。结论:采用密度梯度离心法分离纯化的骨髓间充质干细胞以1×109L-1密度接种,在含体积分数为0.12胎牛血清的MEM培养基中培养,生长状况良好,增殖速度快。     

PCR技术在脑脊液病原菌诊断中的应用

本文概述以PCR技术为代表的各种分子生物学诊断技术，在中枢神经系统感染的病原菌检测中的初步应用与展望。     

高海拔地区多脏器功能障碍评分系统诊断的标准

由中华医学会中华高原医学分会主办,甘肃省医学会协办的《中国首届高原危重病急症与多脏器功能障碍综合征》学术会议于2005.9.12-9.15在兰州召开。来自青海、西藏、甘肃、重庆、宁夏、陕西、北京、上海、天津、西宁、兰州等地近100名代表参加了本次大会。国内创伤、烧伤、危重病急救和高原医学界主要学科带头人和著名专家应邀出席并参加了专题讲座和大会交流;大会还重点讨论通过了由兰州军区兰州总医院、第四军医大学、青海大学、兰州大学、青海高原医学研究所等9个协作单位共同完成的《高海拔地区多器官功能障碍综合征(HMODS)评分诊断标准》(征求意见稿)。征求稿对高原覆盖范围、标准定义、临床论证等进行了深入讨论并达成共识,建议将其作为国内首部HMODS标准向临床推荐。     

抑颤汤对帕金森病大鼠旋转行为、黑质细胞及神经递质的影响

目的:探讨抑颤汤治疗帕金森病在脑黑质细胞及神经递质方面的作用机制。方法:运用6-羟基多巴诱发法建立帕金森病大鼠模型,通过随机分组,观察抑颤汤对帕金森病大鼠行为特征的影响;采用脑组织液微透析技术,用高效液相色谱法测定各组大鼠脑组织细胞外液中儿茶酚胺类物质含量的变化,并分别用光镜和电镜观察各组大鼠脑黑质细胞的形态学变化。结果:治疗后40min旋转次数抑颤汤组为(61.63±17.93)次,生理盐水组为(340.90±52.97)次,表明抑颤汤能明显改善帕金森病模型大鼠的旋转行为(t=2.762,P<0.01);帕金森病大鼠损毁侧脑组织透析液中3,4-二羟基苯酸(DOPAC)、高香草酸、多巴胺、5-羟色胺水平明显低于未损毁侧(P<0.05或P<0.01),治疗后抑颤汤组含量则明显高于生理盐水对照组(P<0.05或P<0.01),而未损毁侧各递质的含量3组比较差异均没有统计学意义(P>0.05);病理学观察,大鼠受损侧脑黑质神经细胞数量抑颤汤组明显比生理盐水组多,且神经元体积较饱满,结构较清晰,细胞内高尔基氏体、线粒体等接近正常。结论:抑颤汤能减轻帕金森病模型大鼠脑黑质细胞的受损程度,促进其修复,改善黑质纹状体系统的分泌功能,提高脑组织中内源性儿茶酚胺类物质的含量,从而改善帕金森病大鼠的旋转行为。