The effects of sucrose on stability of human brain natriuretic peptide [hBNP (1–32)] and human parathyroid hormone [hPTH (1–34)]

Abstract: Although the effect of sucrose on the physical stability of proteins has been well documented, its impact on their chemical stability is largely unknown. The aim of this study was to investigate the potential effects of sucrose on the structural conformation of human brain natriuretic peptide [hBNP (1–32)] and the synthetic human parathyroid hormone [hPTH (1–34)], and link these effects to chemical degradation pathways of these peptides. The stability of hBNP (1–32) and hPTH (1–34) was studied at pH 5.5. Aggregation was monitored using size exclusion high‐performance liquid chromatography (SE‐HPLC), whereas oxidation and deamidation products were measured by reversed phase (RP) HPLC. Fourier transform infrared (FT‐IR) spectroscopy was used to study the peptides’ conformation. Sucrose retarded aggregation, deamidation, and oxidation of hBNP (1–32) and hPTH (1–34), with a maximum effect at relatively high concentrations (as much as 1 m ). FT‐IR spectroscopy indicated that sucrose maintained the native conformation of hBNP (1–32) and induced small conformation changes in the hPTH (1–34) structure. Sucrose enhanced the stability of hBNP (1–32) and hPTH (1–34) in liquid formulations. The stabilizing effect of sucrose was due to a large extent to retardation of oxidation and deamidation of hBNP (1–32) and hPTH (1–34).     

毕赤酵母工程菌高密度发酵肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的研究

目的研究重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)巴斯德毕赤酵母工程菌发酵工艺。方法首先用摇瓶对工程菌的甲醇诱导周期、甲醇浓度、pH进行研究 ,在此基础上 ,采用 5L发酵罐补料培养进行中试研究。结果人可溶性TRAIL巴斯德毕赤酵母菌在pH 6 .0、甲醇诱导浓度 1%的条件下诱导 96h ,目标蛋白质浓度最高 ,可达 72 .8mg/L。 5L发酵罐培养放大 ,可以达到 184mg/L。结论此发酵工艺可以较好地提高人可溶性TRAIL工程菌的分泌表达。     

细脚拟青霉总多糖对人外周血单核细胞TNF-α水平及增殖活性的影响

目的提取分离细脚拟青霉总多糖 (PtPs) ,探讨其对人外周血单核细胞 (PBMC)的调节作用。方法采用水提醇沉淀法提取PtPs成分 ;用不同浓度的PtPs单独或协同脂多糖 (LPS)在体外刺激PBMC ,酶联免疫法测定TNF α的水平 ,溴化四唑蓝法测定增殖活性。结果所得PtPs制品的纯度为 76 .1% ;适当剂量的PtPs (10 0～ 5 0 0 μg/ml)能够单独或协同LPS提高PBMC对TNF α的分泌 ;还可剂量依赖性地促进PBMC的增殖活性。结论PtPs对体外培养的PBMC具有激活作用 ,可能是发挥免疫药理作用的主要活性成分。     

反相高效液相色谱法定量检测重组人心钠素

目的 :建立反相高效液相色谱法 (RP HPLC)测定重组人心钠素 (rhANP)含量的方法。方法 :在WatersAlliance 2 6 90高效液相色谱仪上 ,以WatersYMC PackC18柱 (2 5 0mm× 4 .6mm ,5μm)为分离柱 ,996紫外可见分光光度检测器 ,检测波长 2 15nm ,流动相A :0 .1%三氟乙酸 水溶液 ;流动相B :0 .1%三氟乙酸 乙腈。进行线性梯度洗脱 ,B相 0 ,30 ,35min比例依次为 0 % ,6 0 % ,10 0 %。结果 :rhANP在 2 .12～ 2 1.2 0mg·L- 1浓度范围内呈现良好的线性关系 (r =0 .9996 ,n =5 ) ,平均回收率大于 95 %。结论 :RP HPLC法测定rhANP的方法准确、快速、可行。     

苦黄颗粒与苦黄注射液治疗病毒性肝炎各46例的比较

目的 :比较苦黄颗粒与注射液治疗急、慢性肝炎的疗效。方法 :92例病毒性肝炎病人 ,分为 2组 ,每组 4 6例。颗粒组男性 31例 ,女性 15例 ,年龄(35±s 13)a ,予苦黄颗粒 6 g ,口服 ,每日 3次 ;对照组男性 37例 ,女性 9例 ,年龄 (34± 10 )a ,予苦黄注射液 30mL加入 5 %葡萄糖注射液 5 0 0mL ,静脉滴注 ,每日 1次。疗程均为 4～ 6wk。每隔 14d检查肝、肾功能。结果 :退黄时间颗粒组为 (2 6± 9)d ,有效率 89% (4 1/ 4 6 ) ;对照组退黄时间 (2 3± 11)d ,有效率 91% (4 2 / 4 6 ) ,2组间差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。肝、肾功能均有明显改善 ,与治疗前差异有显著意义 (P <0 .0 5 ) ,2组间无差异 (P >0 .0 5 )。不良反应轻微。结论 :苦黄颗粒有良好的退黄、降酶作用 ,不良反应少 ,与苦黄注射液类似 ,可作为治疗病毒性肝炎的一线用药。     

重组人干扰素α-2b两步柱色谱分离纯化工艺研究

通过改进柱色谱条件,两步柱色谱分离纯化重组人干扰素α-2b,简化了工艺,缩短了生产流程,纯化倍率达到5.6倍,纯度98%.蛋白比活性1.43×108IU/mg蛋白,活性回收率58%.     

一种有效分离人尿激肽释放酶和人尿胰蛋白酶抑制剂的方法

人尿激肽释放酶和人尿胰蛋白酶抑制剂是存在于尿中的酸性蛋白.本文通过ZnCl2胶体沉淀和乙醇沉淀相结合的方法可有效分离两者,得率高、活性保留好.     

人类白细胞抗原B27相关性前葡萄膜炎的诊断与治疗

综述了人类白细胞抗原B27相关性前葡萄膜炎的临床表现、发病机制、诊断特点和治疗原则.     

联合新型Bcl-2反义核酸与足叶乙苷抑制人小细胞肺癌细胞的增殖

目的　研究一种新型Bcl 2反义寡核苷酸 F95 1在与足叶乙苷 (VP16 )联合使用时 ,对人小细胞肺癌细胞增殖的影响。方法　分别单独及联合应用F95 1、VP16于人小细胞肺癌细胞株NCI H4 4 6 ,通过MTT法检测细胞存活率 ,通过集落形成法检测集落生存率 ,按Welander法计算联合应用组的预测值 ,通过实测值与预测值的比较进行效应分析。结果　细胞存活率 (MTT法 )和集落生存率 (集落形成法 )均显示联合应用F95 1、VP16组的实测值明显低于预测值。结论　联合应用F95 1与VP16对人小细胞肺癌细胞的增殖有协同的抑制作用。     

IL-10与可溶性鸡Ⅱ型胶原对实验性关节炎的联合治疗作用

目的 :考察重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对可溶性鸡Ⅱ型胶原 (SCCⅡ )治疗大鼠佐剂性关节炎(AA)疗效的影响。方法 :通过测量足肿胀度、体重、胸腺与脾脏系数 ,观察不同部位淋巴细胞ConA增殖反应并检测腹腔巨噬细胞 (PMΦ)与滑膜组织细胞(SMCs)产生IL 1的水平。结果 :与SCCⅡ(0 .0 3mg·kg-1·d-1,ig)或IL 10 (1,2 μg·d-1,sc)单独治疗比较 ,二者联合治疗大鼠AA ,明显改善上述观察指标 ,同时使SCCⅡ的口服耐受诱导期缩短 ,增强了治疗效果。结论 :IL 10能提高SCCⅡ治疗大鼠AA的治疗效果。