Terric acid对白色假丝酵母生长、细胞形态和大分子合成影响的研究

从海洋霉菌Aspergillus flavis No.179中分离纯化胞外抗真菌代谢产物Terric acid。以液体稀释法研究Terricacid在不同浓度下对酵母类真菌白色假丝酵母(Candida albicans)生长、细胞形态的影响。结果表明,Terric acid在较低浓度下能抑制测试菌株C.albicans AS2,538的生长,高浓度的Terric acid则能杀死C.albicans AS2,538细胞,其最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为6.25μg/mL和50μg/mL。在亚抑菌浓度下,该物质能抑制C.albicans AS2,538假菌丝的形成,并引起细胞形态发生改变。当浓度达到50μg/mL时,细胞形态变得极不规则,有些细胞体积增大或破裂溶解。用14C-缬氨酸1、4C-胸腺嘧啶3、H-尿嘧啶同位素标记物掺入的方法分别研究Terric acid对测试菌株C.albicans AS2,538蛋白质、DNA和RNA合成的影响,与对照相比,在含有5μg/mL Terric acid的培养基中培养4h后,14C-缬氨酸和1H-尿嘧啶的掺入量分别减少47.8%和70.7%,14C-胸腺嘧啶的掺入量没有明显差异。此结果暗示Terricacid能抑制测试菌C.albicans AS2,538蛋白质和RNA的合成,但对其DNA的合成没有明显影响。     

黄檀素对心肌缺血/再灌注损伤的治疗作用及机制研究

摘要 目的：探讨黄檀素（DAL）对小鼠心肌缺血/再灌注（MI/R）损伤心肌的治疗作用及其作用机制。方法：选择成年雄性C57 BL/6J小鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（MI/R）、地尔硫组（Diltiazem）和DAL低、中、高剂量组（10、30、90 mg/kg/d）,每组10只。结扎小鼠冠状动脉左前降支（LAD）,缺血30 min,再灌注1 h建立小鼠MI/R损伤模型。术后第1天起,Sham组、MI/R组小鼠均灌胃等体积生理盐水,Diltiazem组、DAL各剂量组小鼠灌胃相应药液,每日1次,连续7 d。给药结束后检测小鼠血清中肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）活性及肿瘤坏死因-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）含量;检测小鼠心肌组织中超氧化歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量;苏木精-伊红染色（HE）检测心肌损伤病理形态;Western Blot检测心肌组织中Akt和P-Akt的蛋白水平表达变化;超声检测左室舒张末内径（ESD）、左室舒张末容积（EDV）、射血分数（EF）和短轴缩短率（FS）。结果：DAL可以减轻小鼠血清中CK-MB、LDH活性及TNF-α、IL-6含量;升高小鼠心肌组织中SOD活性,减少MDA生成;增加p-Akt的蛋白水平表达,减轻心肌组织病理损伤,改善心脏功能。结论：DAL可以通过增加Akt磷酸化促进心肌细胞存活,减轻心肌组织病理损伤,进而抑制小鼠MI/R损伤,改善心脏功能,最终发挥心肌治疗作用。     

糖皮质激素对小鼠急性肝衰竭的干预作用研究

摘要 目的：探讨糖皮质激素对小鼠急性肝衰竭（Acute liver failure, AHF）的干预作用。方法：通过腹腔注射D-GaIN/LPS构建AHF小鼠模型,并随机分为对照组、AHF模型组（AHF组）和糖皮质激素处理急性肝衰竭组（GCs + AHF组）。通过全自动生物化学分析仪检测小鼠血清中ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL水平;采用ELISA试剂盒测定小鼠血清中IL-1β、TNF-α、IL-6水平;通过定量PCR检测mRNA表达水平;苏木精-伊红（H&E）染色检测肝组织病理学情况;免疫组织化学检测肝组织中SOX9表达水平;蛋白质印迹检测Hedgehog信号通路关键蛋白因子的表达水平。结果：与对照组相比,AHF组小鼠血清ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL、MDA、TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高,SOD、GSH和CAT活性水平显著降低（P＜0.01）;与AHF组相比,GCs+AHF组小鼠血清中ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL、MDA、TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著降低,SOD、GSH和CAT活性水平显著升高（P＜0.01）。H&E染色结果显示,对照组小鼠的肝脏切片显示正常的细胞结构,AHF组小鼠出现广泛的细胞坏死和炎性细胞浸润;与AHF组相比,GCs + AHF组小鼠中细胞坏死和炎性细胞浸润等病理变化显著减弱。免疫组织化学结果显示：与对照组相比,AHF小鼠肝脏中SOX9的表达水平显著升高（P＜0.01）;与AHF组相比,GCs+AHF组小鼠肝脏中SOX9的表达水平显著降低（P＜0.01）。Western blotting结果显示,与对照组相比,AHF组小鼠的Hedgehog通路关键蛋白因子Shh、Ptch-1和Gli-1蛋白表达水平显著升高（P<0.01）;与AHF组相比,GCs+AHF组的Shh、Ptch-1和Gli-1蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。结论：GCs可有效改善AHF小鼠肝功能指标,降低炎性因子表达,提高急性肝衰竭小鼠抗氧化能力,并使Hedgehog通路关键蛋白因子表达恢复正常。     

骆驼蓬碱通过LOXL1-AS1影响卵巢癌细胞CAOV3增殖、凋亡、迁移侵袭

该研究探讨了骆驼蓬碱对卵巢癌细胞CAOV3增殖、凋亡、迁移侵袭的影响及分子机制。卵巢癌细胞CAOV3分为对照组,骆驼蓬碱低、中、高剂量组,si-NC组,si-LOXL1-AS1组,骆驼蓬碱高剂量+pcDNA组,骆驼蓬碱高剂量+pcDNA-LOXL1-AS1组。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率;平板克隆实验检测细胞克隆形成数;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;Transwell检测细胞迁移和侵袭;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LOXL1-AS1表达水平。结果显示,不同剂量骆驼蓬碱处理的CAOV3细胞中细胞存活率逐渐降低,克隆形成数逐渐减少,细胞凋亡率逐渐升高,Cleaved-caspase3表达水平逐渐升高,pro-caspase3表达水平逐渐降低,细胞迁移侵袭数逐渐减少,LOXL1-AS1表达水平逐渐降低(P<0.05)。干扰LOXL1-AS1表达后,细胞存活率降低,克隆形成数减少,细胞迁移侵袭数减少,细胞凋亡率升高,Cleaved-caspase3表达水平升高,pro-caspase3表达水平降低(P<0.05)。LOXL1-AS1过表达可减弱骆驼蓬碱对CAOV3细胞增殖、凋亡、迁移侵袭的影响。该研究得出,骆驼蓬碱通过下调LOXL1-AS1表达抑制卵巢癌细胞CAOV3增殖、迁移侵袭,促进凋亡。     

应用多种生物类群评价白洋淀水环境质量变化

白洋淀是华北平原最大的浅水湖泊。近几十年来,白洋淀上游耗水增加,天然入淀水量急剧减少,使白洋淀水位明显降低;同时,随着淀泊周边农村生活污水的排入,白洋淀发生了严重的富营养化。2017年雄安新区设立,白洋淀环境治理工作的重要性空前提高。近几年通过上游水库和跨流域生态补水,白洋淀水位明显抬升,同时淀中和淀边农村实施了生活污水收集。为了解白洋淀当前水环境状况,对前期补水和治污的效果进行评估,2019年8月对白洋淀水体理化指标及水生生物进行调查,采用水质、浮游植物、浮游动物、底栖动物指标评价白洋淀水环境质量,并与2010年的调查数据进行对比,辅以沉水植物指标评价水体生态状况。结果表明: 白洋淀2019年总磷达到优于Ⅲ类水平,总氮优于Ⅱ类水平,水环境状况比2010年有较大改善。其中,总磷浓度下降了88.6%,总氮浓度下降了83.9%,叶绿素a浓度下降了47.8%,透明度增大了43.4%;浮游动物、底栖动物等生物多样性明显提高,浮游植物密度显著降低,优势种从普遍的重富营养型转变为富营养型;沉水植物清洁型种类分布范围缩小。这说明沉水植物物种评价法不适于白洋淀水环境质量评价,浮游动物多样性评价方法也不适用于当前白洋淀水环境质量评价。早期,由于污染源集中在西部,白洋淀西部水质差于东部;现在,由于自西、北、南多方向补水,淀区的水动力条件发生显著改变,加之西部实施治污工程,淀区水质呈现空间均一化的特点。     

免疫共刺激分子OX40L对乙型肝炎核酸疫苗的免疫佐剂作用

[目的]为了进一步增强HBV DNA疫苗的免疫反应,本研究将共刺激分子OX40L 作为HBV DNA疫苗的分子佐剂免疫小鼠,旨在探讨共刺激分子OX40L对HBV DNA疫苗诱导体液和细胞免疫应答的影响.[方法]我们将HBV DNA疫苗(pcDS2)单独或联合共刺激分子质粒pOX40L免疫C57BL/6小鼠;分别在第0,2,4周进行免疫,在第6周检测抗-HBs IgG、IgG1和IgG2a,T淋巴细胞增殖指数,细胞因子表达水平和体内细胞毒性T淋巴细胞杀伤作用(CTL)等免疫学指标.[结果]pceDS2联合pOX40L免疫组小鼠的抗-HBs水平显著提高,抗-HBs IgG亚类以IgG2a占优;免疫小鼠的T淋巴细胞体外经乙型肝炎表面抗原(HBsAg)刺激后,联合免疫组刺激指数(SI)明显高于pcDS2组;联合免疫组CD4 + T淋巴细胞的IL-4和IFN-γ表达水平及CD8 + T淋巴细胞的IFN-γ表达水平显著升高;DNA疫苗免疫的各组小鼠,HBsAg特异性体内CTL高于对照组,其中联合免疫组小鼠的体内CTL杀伤作用最强.[结论]共刺激分子OX40L不仅能增强HBV DNA疫苗诱导特异性体液免疫应答,还能增强特异性细胞免疫反应,尤其增强体内CTL的杀伤活性,为HBV DNA疫苗的研究奠定了基础.     

盐碱地渗水盐度与钠钾比对凡纳滨对虾生长的影响

为广泛利用滨海盐碱地渗水开展对虾养殖,本文研究了盐碱地渗水不同盐度及钠钾比（Na⁺/ K⁺）对凡纳滨对虾存活、生长、代谢及体内谷草转氨酶（GOT）、谷丙转氨酶（GPT）和Na⁺-K⁺-ATPase等3种酶活性的影响.试验用水盐度分别为5、10和15,各盐度组Na⁺/K⁺分别为20、40、50、60、70和90,试验周期为20 d.结果表明,盐度为15的条件下,凡纳滨对虾的存活、生长、代谢及酶活性表现最佳,在此盐度条件下,Na⁺/K⁺保持在40和50条件下,凡纳滨对虾存活、生长、代谢及酶活力较高.表明盐碱地渗水经适当调配可用于凡纳滨对虾的养殖.     

红果人参叶片RNA的提取

提取高质量的RNA是进行人参植物分子生物学研究的必要前提.利用CTAB法、Trizol法、Bizol法和SDS法,从红果人参叶片中提取了总RNA,通过紫外分光光度法和凝胶电泳检测,结果显示:四种方法得到的纯度都比较高,OD260/OD280值都在1.7～2.0之间;SDS法提取的RNA,凝胶电泳显示28S条带是18S条带亮度两倍,而且无污染,好于其他三种方法.通过KT-PCK,ds cDNA片段条带弥散分布大小在0.2～3.0kb,从而进一步验证了SDS法提取的RNA质量,完全可以进行下一步的分子生物学研究     

运用数理统计方法对Pecopteris lativenosa Halle 羽叶形态的复原研究

Pecopteris lativenosa Halle是栉羊齿属中羽叶形态变化十分显著的一个种。作者在详细观察的基础上,尝试性地运用定量统计和方差分析方法判定该植物具有代表性的各项特征,提出了普遍存在的5种小羽片类型、6种末次羽片类型和2种末二次羽片类型,以及各类型小羽片、末次羽片、末二次羽片和末三次羽片的空间分布关系,并以此为依据绘制了Pecopteris lativenosa Halle三次羽状复叶复原图。这一复原图能够解释以往发现的Pecopteris lativenosa Halle标本所属类型。     

基于红外相机技术调查长青国家级自然保护区兽类和鸟类多样性

野生动物多样性的有效保护与管理,需要大范围、长时间的系统监测网络的支持。红外相机调查技术近年来已成为自然保护区鸟兽调查的最有效工具之一,为了解和掌握区域性乃至全国性的生物多样性现状,提供了最直接和最基础的数据。长青国家级自然保护区位于秦岭南坡,地处秦岭自然保护区群的核心地带。自2008年至2011年,使用被动式红外触发相机调查技术在长青保护区内调查了大中型兽类与鸟类的本底资源。共完成有效调查位点435个,相机工作日15767d。获得兽类有效拍摄3 282次,记录到分属5目12科的21种野生兽类和1种家畜,其中国家一级和二级重点保护野生动物各有5种,被IUCN物种红色名录评估为濒危（EN）、易危（VU）、近危（NT）的物种分别有2、3、4种。食肉目和偶蹄目是本次调查兽类记录中物种数量（分别有9种和7种）和有效拍摄数（分别占兽类有效拍摄数的13.5%和84.0%）最高的两个类群,食肉目中相对多度指数最高的物种是大熊猫（Ailuropoda melanoleuca, 12.30）,偶蹄目中最高的物种是羚牛（Budorcas taxicolor, 114.04）。保护区内大型兽类（食肉目和偶蹄目）物种多样性沿海拔梯度,大体呈现中部高、两侧低的单峰模式,海拔1600-2200 m的中等海拔段是大型兽类多样性最高的区域。鸟类有效拍摄191次,记录到分属4目8科的17种鸟类,其中国家二级重点保护野生动物物种8种。鸡形目雉科鸟类是有效拍摄数最高的类群,占全部鸟类拍摄数的79.8%。调查中记录到的林猬（Mesechinus hughi）和鹰雕（Spizaetus nipalensis）为长青自然保护区的新记录种。调查结果提供了较为全面的区内大中型兽类和鸟类群落的本底信息,为后续的保护管理规划和长期监测提供了数据支持和指导。