淋巴因子活化杀伤细胞及白细胞介素-2经颅内治疗小鼠脑胶质瘤的实验研究(摘要)

材料和方法 (1)203-glioma 细胞株为20-甲基胆蒽诱发的 C_(57)BL/6小鼠成室管膜细胞瘤;(2)肿瘤颅内接种:取生长良好的5×10~5/10μl 203-glioma 细胞悬液,用25μl 注射器接种于 C_(57)BL/6小鼠右侧大脑半球内;(3)新鲜 C_(57)BL/6小鼠脾细胞2×10~6/ml、200U/ml rIL-2在 RPMI1640中培养72小时,分层离心,取活细胞为 LAK 细胞;(4)过继治疗:①LAK 细胞l0μl与瘤细胞同时注入小鼠颅内,或0.1ml 经尾静脉输入;②rIL-2 10μl 在接种瘤细胞和 LAK 细胞后48小时注入小鼠颅内或0.1ml 注入尾静脉。     

染色体22q上与胶质瘤RNA编辑相关基因的研究进展

RNA编辑与胶质瘤的发生、发展相关.胶质瘤的肿瘤抑制基因位点涉及染色体22q.新近研究结果显示,1637种基因中存在大量、新的RNA编辑位点[1],其中,位于染色体22q上的基因有29种.本文整理了这些基因与脑部疾病、肿瘤、胶质瘤及细胞中DNA复制或RNA合成相关的文献.     

不同胃黏膜病变中幽门螺旋杆菌感染分析

目的:通过检测慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、不典型增生、各型胃癌组织的幽门螺旋杆菌(Hp)感染情况,探讨Hp感染与胃癌的可能关系。方法:应用HE染色、W-S染色及甲苯胺蓝染色法观察各种不同胃黏膜病变组织中的Hp感染情况。结果:慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、不典型增生及各型胃癌组织中Hp检出率分别为40.2%、55.0%、67.9%和72%,其中慢性浅表性胃炎较其他各组均有显著性差异(P<0.05),慢性萎缩性胃炎较各型胃癌组阳性率低且差异有显著性(P=0.006),与不典型增生组比较无显著性差异(P>0.05),不典型增生组Hp阳性率与各型胃癌的阳性率无显著差异(P>0.05)。结论:Hp感染在胃黏膜病变的演变过程中起着重要的作用,其感染与胃癌的发生有着密切的关系。     

COX-2和VEGF蛋白在HCC组织中表达及其与HCC血管形成的关系 

目的：通过检测COX-2蛋白与VEGF蛋白在肝细胞癌(HCC)中的表达情况，探讨COX-2对HC血管形成的影响。方法：应用免疫组织化学（SP）法对30例肝癌组织、10例正常肝组织中的COX-2、VEGF蛋白进行定量检测。同时应用CD34标记肿瘤新生血管，根据CD34阳性的血管内皮细胞计数来测定微血管密度（MVD）值。结果：HCC组织中COX-2和VEGF表达阳性率明显高于对照组（P＜0.001），COX-2表达与VEGF表达显著相关（r=0.632,P＜0.01），且COX-2和VEGF均阳性的HCC组织MVD值明显高于两者均为阴性的组织（P＜0.01）。结论：VEGF的表达随着COX-2表达增高而增高，提示COX-2可能通过诱导VEGF表达而促进HCC血管形成。     

肝细胞生长因子受体在宫颈癌组织中的表达及其与增殖细胞核抗原的关系

目的：研究肝细胞生长因子受体（c-met）在宫颈癌中的表达，探讨其与增殖细胞核抗原（PCNA）的关系。方法：运用免疫组化（SP）方法检测14例慢性宫颈炎和50例宫颈癌组织中c-met及PCNA的表达率。结果：在慢性宫颈炎组织，c-met表达阳性率为14.3%（2/14），而在宫颈癌组织，其表达阳性率为62.0%（31/50），两者比较差异有显著性（P<0.05）。组织分化程度低组c-met表达率高于分化程度高组（P<0.05），淋巴结转移组的c-me t表达率明显高于无淋巴结转移组（P<0.05），鳞癌组与腺癌组c-met表达率比较差异无显著性（P>0.05），临床Ⅰ期和Ⅱ期组c-met表达量比较差异无显著性（P>0.05）。在慢性宫颈炎组织中，PCNA指数为24.79%±5.1%，在宫颈癌组织中，PCNA指数为39.9%±15.46%，两者比较差异有显著性（P<0.05）。组织分化程度越低、临床分期越晚PCNA的表达量越高(P<0.05)，鳞癌组与腺癌组的PCNA表达量比较差异无显著性（P>0.05）。c-met阳性表达组的PCNA指数明显高于c-met阴性表达组（P<0.01）。结论：c-met的表达与PCNA密切关联，可作为评估宫颈癌预后的一个指标。     

人铜锌超氧化物歧化酶原核表达载体的构建、表达及蛋白纯化

目的构建人铜锌超氧化物歧化酶（hCu，Zn-SOD）原核表达载体并诱导其表达，纯化及鉴定目的蛋白，为其临床应用奠定基础。方法根据已报道的hCu，Zn-SOD基因序列，采用RT-PCR技术从外周血单个核细胞（PBMC）中获得SOD cDNA序列。将所得的PCR产物插入克隆载体pGEM-Teasy中，重组质粒经酶切，PCR及测序鉴定正确后，将目的片段插入原核表达载体PET20b（＋）中并转化大肠杆菌DE3，通过IPTG诱导表达出目的蛋白，经镍固定金属亲和层析纯化。采用邻苯三酚自身氧化法测定SOD生物学活性。结果序列分析表明SOD基因成熟肽编码区含有465bp与GenBank（X02317）中已报道序列一致的SOD核苷酸。经IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析显示表达的目的蛋白分子质量约为19kD并与商品化的人SOD单抗呈特异性反应。经Ni^2＋-NTA琼脂糖纯化获得SDS-PAGE电泳下单一条带。可溶蛋白酶活力达1300U／ml。结论在大肠杆菌中获得了人SOD的高效表达，为研究其生物学功能和广泛应用奠定了基础。     

宫颈癌中肝细胞生长因子受体蛋白表达及其与血管生成的关系

目的:研究肝细胞生长因子受体(c-Met)在宫颈癌浸润转移中的作用,探讨其与血管形成的关系。方法:运用免疫组织化学SP法对14例慢性宫颈炎和50例宫颈癌组织中的c-Met进行检测。用CD34单克隆抗体检测微血管密度(MVD)。结果:慢性宫颈炎c-Met表达率为14.3%(2/14),而在宫颈癌中表达率为62.0%(31/50),二者比较差异有显著性(P<0.05)。c-Met的表达与分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05),与临床分期和组织学类型无关(P>0.05)。c-Met阳性表达组的MVD明显高于c-Met表达阴性组(P<0.01),c-Met的表达与MVD密切关联。结论:c-Met的表达与宫颈癌血管形成密切关联,可作为宫颈癌诊断和判断预后的一个指标。     

CEA串连表位-HSP70融合基因疫苗诱导小鼠的表位特异性免疫应答

目的：观察癌胚抗原(CEA)串联表位-HSP70融合基因疫苗诱导的免疫应答，为开发新型肿瘤特异性基因疫苗奠定基础。方法：在已经构建含有变异热休克蛋白(HSP)序列的基础上，插入重组CEA串联表位的编码片段获得CEA串联表位-HSP融合基因疫苗。3次肌肉注射免疫Balb/c小鼠，设立注射生理盐水的阴性对照组、注射氢氧化铝佐剂混悬CEA串联表位的阳性对照组及注射pCITriCEA_625-667-mtHSP70的实验组。FCM分析脾脏T细胞亚群；体外培养脾细胞，ELISA检测培养上清中干扰素γ(IFNγ)的相对含量；同时测定小鼠血清CEA特异性抗体的滴度。结果：阴性对照组脾细胞中CD3⁺和CD4⁺T细胞分别为55.1%±6.1%和30.2%±4.1%；实验组脾细胞中CD3⁺和CD4⁺T细胞分别为78.7%±9.2%和48.9%±4.7%，两组比较差异有显著性(P<0.01)。其体外特异性抗原肽诱导的IFNγ分泌处于本底水平，可视为生理性参数，体外非特异性和特异性的IFNγ分泌分别增加3和6倍(P<0.01)。血清中CEA表位特异性抗体滴度阴性对照组为0，阳性对照组＜1∶500,而融合基因疫苗免疫组达到1∶4 000。结论：CEA串联表位-HSP融合基因疫苗在体内诱导以激发辅助性T细胞为特征的免疫应答。     

睾丸酮数值低与胰腺癌有关

用抗雄激素疗法缓和胰腺癌是否也像缓和前列腺癌一样有效?这是伦敦皇家学院附属医院肝脏疾病科的Brain Greenway及其同事提出的。该科的早期研究工作表明,胰腺癌病人有两种酶水平升高:aromatase和5α还原酶。这两种酶均需要睾丸酮作为底物。肿瘤可能为其本身的代谢和生长而需吸收睾酮。研究工作的第二步是对患胰腺癌病人的睾丸酮水平进行测定,并与正常对照组和其他部位的癌症病人的睾丸酮水平相比较。凡患胰腺     

预示卒中危险性的温度记录法

美国纽约消息:乔治城大学的神经病学副教授Margaret R Abernathy在科学作家会议上称,对于因颈动脉狭窄而引起有卒中危险的病人来说,温度记录法是一项理想的检查方法。她指出,卒中病人中约半数确系血液供应阻断所致,是由于颈总动脉或颈内动脉狭窄或阻塞引起。