应用差异显示从高低转移癌系克隆出基因G3BP

目的　以 ｍ Ｒ Ｎ Ａ 差异显示技术对比研究具有不同转移潜能的癌系,克隆与肿瘤转移相关的基因。方法　以肺巨细胞癌细胞系 Ｐ Ｇ 具有不同转移潜能的亚系（ Ｂ Ｅ１, Ｌ Ｈ７）为研究对象,应用 ｍ Ｒ Ｎ Ａ 差异显示技术克隆差异片段,经 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交验证后测序,进入 Ｇｅｎ Ｂａｎｋ 数据库检验同源性。结果　ｍ Ｒ Ｎ Ａ 差异显示技术对比高低转移癌系ｍ Ｒ Ｎ Ａ,分别建立了高低转移相关基因资源库。其中一个８４９ ｂｐ 片段在高转移亚系（ Ｂ Ｅ１）低表达,而在不转移亚系（ Ｌ Ｈ７）高表达,两者差异显著,经 Ｇｅｎ Ｂａｎｋ Ｂｌａｓｔｎ 检索,与 Ｇ３ Ｂ Ｐ（ Ｒａｓ Ｇ Ｔ Ｐａｓｅ Ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓ Ｈ３ ｄｏｍ ａｉｎ ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ）同源性高达 ９９％ 。结论　在高低转移癌系中 Ｇ３ Ｂ Ｐ的表达具有显著差异,提示 Ｇ３ Ｂ Ｐ与肿瘤的转移表型有一定相关性,为 Ｇ３ Ｂ Ｐ功能的研究提供了新的线索。     

KAI1基因的肿瘤转移抑制作用

ＫＡＩ1(ＫａｎｇＡｉ 1)基因是最近发现的一个新的肿瘤转移抑制基因 ,1995年Ｄｏｎｇ等[1] 首先发现并分离了该基因。ＫＡＩ1基因位于人染色体 11ｐ11 2 ,编码一个由 2 6 7个氨基酸组成的蛋白质 ,研究发现ＫＡＩ1蛋白与ＣＤ82结构相同。ＣＤ82为一种白细胞膜糖蛋白[2 ] ,在不同的实验室 ,又称为Ｒ2 [3] 、Ｃ33[4 ] 、ＩＡ4 [5]和 4Ｆ9[6 ] 。ＫＡＩ1蛋白属于一个结构特殊的家族———ＴＭ4ＳＦ (ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ 4ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙｏｒｔｅｔｒａｓｐａｎｓｕｐｅｒ ｆａｍｉｌｙ) ,ＴＭ4ＳＦ蛋白具有 4个高度保守的疏水…     

KAI1和nm23与人黑色素瘤细胞转移潜能的相关性

目的:探讨肿瘤转移抑制基因KAI1和nm23与人黑色素瘤细胞转移潜能的关系.方法:应用Northern blot杂交检测不同转移潜能人黑色素瘤细胞中KAI1和nm23基因的表达.结果:4种不同转移潜能的人黑色素瘤细胞中(WM35,WM451,WM983a,WM1341b),KAI1 mRNA和nm23 mRNA均有表达且表达量基本一致,KAI1在4种细胞中的积分光密度值分别为0.1798,0.1800,0.1501,0.1582;nm23分别为1.0428,1.0607,1.0141,1.0754.结论:KAI1基因与nm23基因的表达降低与人黑色素瘤的浸润转移无关.     

不同转移潜能人肺癌细胞系KAI1基因的表达

目的:探讨KAI1基因与人肺癌细胞系转移潜能的关系.方法:利用逆转录-PCR和Northern blot杂交法分析不同转移潜能人肺癌细胞系中KAI1 mRNA的表达,并用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测与突变的关系.结果:在高转移潜能细胞系PG中KAI1 mRNA表达降低,在无转移潜能的PAa细胞中KAI1的表达量比PG细胞高10倍以上(积分光密度比值分别为0.7313和0.0549).PCR-SSCP结果显示在PG细胞KAI1基因第7外显子出现异常改变.结论:肺癌细胞的转移潜能可能与KAI1基因表达量有关,KAI1基因的低表达可能由基因突变所致.     

严重急性呼吸综合征冠状病毒在肺组织内各种类型细胞中的表达

目的:了解肺组织内被严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome -associated coronavirus, SARS-CoV)感染的靶细胞类型, 并对SARS诱发的肺损伤发病机制进行探讨.方法: 运用SARS-CoV基因组序列合成的地高辛标记cDNA探针,对北京市7例及安徽省1例确诊的SARS死亡病例的肺组织进行原位杂交检测,在原位杂交基础上,进一步运用免疫组织化学方法显示SARS-CoV感染的靶细胞类型,如Cytokeratin(CK)标记上皮细胞,CD34标记血管内皮细胞,CD68标记巨噬细胞,Vimentin标记纤维母细胞, CD3标记全T细胞. 结果:原位杂交检测显示,8例患者肺组织中都表达SARS-CoV RNA,阳性信号位于靶细胞胞浆内,呈紫蓝色(NBT-BCIP).原位杂交和免疫组化结果显示:支气管上皮细胞、Ⅱ型肺泡上皮细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞、纤维母细胞及T淋巴细胞在所有SARS病例中都受到了病毒感染.原位杂交阳性(紫蓝色,NBT-BCIP)和免疫组化阳性(红棕色,AEC)信号同时表达于靶细胞胞浆中而呈紫红色.结论:通过对SARS患者肺组织原位杂交和免疫组织化学双重标记研究表明,肺组织内支气管上皮细胞、Ⅱ型肺泡上皮细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞及纤维母细胞等多种细胞成分广泛受到了SARS-CoV攻击,肺组织内多种细胞成分弥漫性受损以及所释放的炎性介质在肺损伤的发病过程中起着重要作用.     

G3BP在三组不同转移潜能的癌系中表达差异的检测

目的 在三组具有不同转移潜能的癌细胞亚系中,在ＲＮＡ水平及蛋白水平检测Ｇ３ＢＰ（Ｒａｓ－ＧＴＰａｓｅ－Ａｃｔｉｖｉｔｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ＳＨ３ ｄｏｍａｉｎ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ）与肿瘤转移潜能的相关性。方法 研究对象为三组具有不同转移潜能的癌细胞亚系,即ＰＧ（人肺巨细胞癌,裸鼠体内转移率１００％）与ＰＡａ（人肺腺癌,无转移）;ＰＧ亚系ＢＥ１与ＬＨ７（前者裸鼠体内转移率１００％,后者     

细胞跨膜信号传导机制与肿瘤研究

肿瘤是一种严重危害人类健康的恶性疾病。有充分证据提示细胞转化及肿瘤恶性演进(侵袭及转移)归根到底是细胞调控机制(包括细胞跨膜信号传导机制)发生紊乱造成的。到目前为止,已经识别出从细胞表面受体到细胞核基因表达的主要信号传递通路。这一进展对肿瘤研究具有非常重要的意义。目前的研究发现,在细胞信号传导系统的重要组成成分中,从生长因子及受体、GTP结合蛋白、蛋白激酶,到核内转录因子,都可见到癌基因/抗癌基因产物的存在,并在细胞转化、肿瘤生长及演进过程中参与细胞跨膜信号传导调节。研究肿瘤细胞恶性演进过程中细胞信号传导机制的变化,一方面可以揭示肿瘤细胞侵袭转移的机制,另一方面这些研究的成果可以直接转化为抗痛、抗侵袭转移药物的开发。     

八氯环腺苷酸对高转移性入肺癌细胞的诱导分化

为研究八氯环腺苷酸（８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ）对高转移性人肺巨细胞癌（ＰＧＣＣ）细胞的诱导分化作用，作者应用细胞培养，ＭＴＴ方法，体外浸润和集落形成实验检测了经８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ处理后ＰＧＣＣ细胞的生长，浸润和集落形成能力，结果表明，８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ在１０～２０μｍｏｌ／Ｌ浓度就能有效地抑制ＰＧＣＣ细胞的生长，浸润和集落形成，提示８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ能有效地诱导肿瘤细胞分化，这为肿瘤的治疗提供了新的生物     

八氯环腺苷酸对高转移性人肺癌细胞的诱导分化

为研究八氯环腺苷酸（８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ）对高转移性人肺巨细胞癌（ＰＧＣＣ）细胞的诱导分化作用，作者应用细胞培养、ＭＴＴ方法、体外浸润和集落形成实验检测了经８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ处理后ＰＧＣＣ细胞的生长、浸润和集落形成能力。结果表明：８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ在１０～２０μｍｏｌ／Ｌ浓度就能有效地抑制ＰＧＣＣ细胞的生长、浸润和集落形成。提示８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ能有效地诱导肿瘤细胞分化，这为肿瘤的治疗提供了新的生物学工具。