M3受体激动剂毛果芸香碱对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

 目的研究M3受体激动剂毛果芸香碱对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用Langendorff灌注系统,建立离体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。观察毛果芸香碱5μmol·L^-1对复灌后冠脉流量、心肌丙二醛(MDA)含量、心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性和心肌梗死面积的影响。结果毛果芸香碱改善缺血再灌注后的冠脉流量,其中5 min(P<0.01)和10min(P<0.05)的冠脉流量增加显著;降低心肌MDA含量(P<0.05)并提高心肌SOD活性(P<0.05);缩小心肌梗死面积(P<0.05)。上述作用可被选择性M₃受体阻断剂4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine-methiodide(4-DAMP)3 nmol·L^-1所逆转。结论M₃受体激动剂毛果芸香碱通过激动心肌M3受体而对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤起保护作用。     

M3受体在脑心综合征心律失常中的作用

观察M3受体(M3R)在脑心综合征(CCS)模型大鼠心室肌中的作用及其表达,以探讨其与CCS心律失常的关系.线栓法建立CCS模型,监测心电图,激光共聚焦扫描显微镜记录激动M3R后心肌细胞内钙的变化,Western blotting检测心室肌中M3R表达水平的改变.同对照组相比,模犁组心电图QRS、QT间期显著延长(P＜0.01);Western blotting结果显示模型组心室肌中M 3R的表达水平较对照组显著降低(P＜0.05);胆碱激动M3R可以抑制KCl除极诱导的模型组心肌细胞内钙的升高幅度(P＜0.01),其特异阻断剂4-DAMP可以阻断这一作用.M3R表达降低可能是CCS心律失常的重要原因之一.激动M3R可以降低心肌细胞内钙,M3R可能是治疗CCS心律失常新的靶点.     

氧化苦参碱对大鼠急性心肌缺血时心肌细胞凋亡的影响

 目的研究氧化苦参碱对大鼠急性缺血性心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法以结扎左冠状动脉前降支方法建立大鼠急性心肌缺血模型,缺血6h后分别测定心肌梗死范围,血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量;采用HE染色检测心肌组织病理学改变;分别采用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记(TUNEL)法及SP免疫组织化学法检测心肌细胞凋亡指数,凋亡相关蛋白Fas/FasL和Bcl-2的表达情况。结果氧化苦参碱能缩小大鼠缺血心肌梗死范围,提高血清SOD活力,降低MDA含量,减轻心肌组织病理性损伤,降低心肌细胞凋亡指数,抑制Fas蛋白表达,增强Bcl-2蛋白表达,但对FasL蛋白表达无明显影响。结论氧化苦参碱对大鼠急性心肌缺血损伤保护作用的机制可能与其抗脂质过氧化作用,抑制Fas蛋白和增强Bcl-2蛋白表达从而抑制心肌细胞凋亡有关。     

激动M_3受体对间隙连接蛋白43表达的影响

目的探索激动心肌M3受体后间隙连接蛋白43的变化情况,进一步发现M3受体作为抗心律失常药物作用新靶点的作用机制。方法通过免疫组化、划痕标记荧光传输技术结合激光共聚焦显微镜和RT-PCR的方法,研究激动M3受体对间隙连接蛋白43表达的影响。结果证实激动M3受体可以改善细胞和细胞之间的通讯,改善病理条件下间隙连接蛋白43的重构,且其磷酸化水平在间隙连接蛋白的重构过程中发挥了重要作用,并且还发现激动M3受体可以恢复病理条件下下降的间隙连接蛋白43的mRNA水平。结论激动M3受体可以改善病理条件下间隙连接蛋白43的重构,并且其磷酸化形式在闰盘重构中发挥重要的作用。     

氯唑沙腙对抗HepG2肿瘤细胞的作用研究

目的研究氯唑沙腙(chlorzoxazone)对HepG2细胞存活和凋亡的影响。方法采用MTT法检测氯唑沙腙对体外培养的HepG2细胞存活率的影响,通过检测LDH释放观察氯唑沙腙对HepG2细胞的致坏死作用,通过TUNEL法评价细胞凋亡率,透射镜评价细胞的超微结构。结果氯唑沙腙在50～500μmol.L-1浓度范围内对HepG2细胞的存活率均有抑制作用,呈明显的剂量依赖效应关系。荧光显微镜和透射电镜下可见典型的肿瘤细胞凋亡改变。氯唑沙腙在100、200、300及500μmol.L-1浓度下作用48h均可诱导HepG2细胞凋亡,具有明显的剂量效应关系。氯唑沙腙100、200、300及500μmol.L-14种浓度分别作用于HepG2细胞24、48及72h,发现以上各种浓度在48h即可诱导细胞凋亡,作用时间越长,凋亡率越高,有明显的时间效应关系。结论氯唑沙腙能够抑制HepG2细胞存活和诱导细胞凋亡。     

四氧嘧啶致大鼠高血糖模型的实验研究

目的：探讨四氧嘧啶至Wistar大鼠高血糖模型的最佳实验条件。方法：根据不同条件对实验动物进行分组,使用四氧嘧啶腹腔注射导致动物产生高血糖,计算成模率和死亡率。结果：采用两次给药法,在给药剂量分别为120mg/kg(第1天）和100mg/kg（第2天）的条件下,随着体重的增高其成模率呈下降趋势。两次给药法的两组剂量（120mg/kg第1天,100mg/kg第2天;120mg/kg第1天,80mg/kg第2天）对成模率没有影响,剂量降低可减少死亡率。日照时间短,强度低,成模率明显降低,而且死亡率明显增高。结论：用四氧嘧啶制备糖尿病模型是一种经济可靠的实验方法。但实验条件要求较为苛刻。实验选取雄性Wistar大鼠,体重190-240g,在日照时间10h以上且阳光充足的条件下饲养。给药方式采取两步给药法,剂量为120mg/kg第1天,100mg/kg第2天,其成模率最高。     

山楂中总黄酮几种提取分离方法的考察及含量测定

目的 考察几种提取方法对山楂果中总黄酮含量的影响。方法 采用不同的提取方法获得山楂浸膏,经大孔吸附树脂分离提取有效成分。结果 以甲醇为溶剂,用索氏提取器提取经大孔吸附树脂分离,提取效率最高（2.00%）;以60％乙醇为溶剂,超声提取经大孔吸附树脂分离,提取效率较高（1.96%）。结论 以60％乙醇为溶剂,超声提取,经大孔吸附树脂分离,提取效率较高,且方法简便易行,适于大规模生产。     

M3受体激动剂对大鼠和家兔心脏血流动力学的影响

目的　研究胆碱对大鼠和家兔心脏M₃受体的激动作用及其引起的血流动力学改变。方法　经右颈总动脉插管入左心室,用八导生理记录仪测定大鼠和家兔血流动力学参数。结果　iv胆碱10mg·kg^-130s后,大鼠的心率(HR)比基础值明显降低,10min后恢复。±dp/dt max和LVSP于给药10min后明显降低。上述抑制作用可被选择性M3受体阻断剂4-DAMP0.12mg·kg^-1所对抗。家兔iv胆碱5mg·kg^-1后1min,心率明显降低,此作用可被4-DAMP所对抗。±dp/dt,LVSP亦有下降趋势,但无统计学差异。M3受体阻断剂4-DAMP对大鼠和家兔血流动力学无明显影响,但预先给药可阻断胆碱引起的血流动力学变化。结论　胆碱通过激动心脏M3受体产生负性肌力和负性频率作用。     

大明胶囊对2型糖尿病大鼠心肌钾通道KV4.2 mRNA表达的影响

 目的探讨大明胶囊对2型糖尿病大鼠心肌钾通道KV4．2 mRNA表达的影响。方法 建立2型糖尿病大鼠模型,筛选 空腹血糖值大于16．7 mmol·L^-1的大鼠随机分组:大明胶囊大(187．5 mg·kg^-1·d^-1)、中(93．8 mg·kg^-1·d^-1)、小(46．9 mg·kg^-1·d^-1)剂量组、糖尿病模型组,连续用药14 d,用快速血糖仪测空腹血糖值。提取心肌总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT- PCR)的方法,观察大明胶囊治疗后2型糖尿病大鼠心肌钾通道KV4．2 mRNA水平的变化。结果2型糖尿病组大鼠心肌钾通 道KV4．2 mRNA表达低于正常组大鼠(P<0．05),经大明胶囊治疗后的心肌钾通道KV4．2 mRNA表达升高(P<0．05),空腹血 糖也明显下降。结论 大明胶囊对2型糖尿病大鼠有明显的降糖作用,并且可以升高2型糖尿病大鼠心肌钾通道KV4．2 mR- NA的表达。     

药理学教学中以病例为中心教学方法的实践与探索

针对传统教学法中存在的学生自主学习意识差、对知识的综合运用能力不足的缺点，我们在药理学理论教学中，按照教学大纲的要求，与哈尔滨医科大学附属第二医院有关科室医生合作，精选临床典型病例，探索了以病例为中心的案例教学法（case-based learning，CBL），取得了良好的效果，并对该教学法中存在的问题进行了分析。