抗HCV HVR1模拟合成肽单克隆抗体的制备及特性鉴定

目的:制备抗-HCV高变区1(HVR1)合成肽单克隆抗体(mAb),并对其特性进行鉴定。方法:以固相合成的HCV HVR1合成肽与牛血清白蛋白(BSA)偶联后,免疫8周龄的BALB/c小鼠。采用杂交瘤技术,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,制备抗-HCV HVR1 mAb。经HAT、HT选择培养及有限稀释法进行克隆化后,用相关的试剂盒鉴定小鼠mAb的Ig亚类;经中和抑制后用ELISA法检测mAb的特异性;用间接ELISA法检测mAb腹水的效价及相对亲和常数。结果:获得1株可分泌抗-HCV HVR1合成肽特异性mAb的杂交瘤细胞1A9G9F11。该株mAb的Ig亚类为IgG3;腹水效价为3.125×10-5;相对亲和常数为1.0×106L/mol。该株mAb与HBsAg、HBeAg、HBcAg、HAAg、牛血清白蛋白、酪蛋白和胸腺5肽均无交叉反应,与HCV HVR1合成肽-牛血清白蛋白出现特异性反应。结论:成功地建立了1株可分泌抗-HCV HVR1 mAb的杂交瘤细胞1A9G9F11,为进一步的实验研究提供了重要的制剂。     

临床路径在骨科临床教学中的应用

目的探讨临床路径（Clinical pathway,CP）在骨科临床教学中的应用效果。方法将在科室实习的64名临床医学本科生随机分成两组,分别采用CP教学和传统教学。实习结束后,进行理论、临床操作及临床病例分析考核,并进行比较,同时对带教的满意度进行问卷调查。结果CP教学组各项成绩均优于传统教学组（P〈0．05）;且其对带教的满意度优于传统教学组（P〈0．05）。结论CP教学能够促进骨科临床教学的标准化、系统化,有利于贯彻基于问题的临床学习,提高临床教学效果及带教满意度。     

不同环境刺激对骨髓间充质干细胞成软骨分化作用的研究进展

损伤和骨关节炎常常导致关节软骨的退变.关节软骨缺乏血管和神经,其自身修复能力很有限.软骨细胞被包裹在软骨基质里,不容易迁移到损伤区域参与修复,因此损伤的关节软骨很少能自愈.治疗关节软骨损伤的方法包括关节镜灌洗术、磨削关节成形术、微骨折术、自体细胞移植术等[1-2].尽管这些方法可以减轻病人的疼痛并在一定程度上改善关节功能,但没有能够使关节软骨完全再生,并且远期临床效果也不尽人意[3].     

兔关节软骨损伤生物标志物的蛋白质组学检测

背景:采用蛋白质组学的方法可以检测出关节、血液、尿液等体液中一些能反映关节软骨损伤程度的特异性标志物的水平。目的:进一步验证采用生物芯片技术发现兔关节软骨损伤生物标志物。方法:采用改良的Hulth方法建立兔关节软骨损伤模型,建模后自由活动,不固定伤肢。30min/d分2次驱赶,连续12周。以不做任何处理兔膝关节为正常对照。并在造模后0,4,8,12周时采取部分标本(血清、关节液),验证观察关节软骨的损伤程度;各个时间点的动物关节液、血清样本放入采用PBSⅡ-C型蛋白质芯片阅读机,采用CM10芯片检测。结果与结论:改良的Hulth造模方法建立膝关节软骨损伤模型,比较全面地反映了关节软骨损伤从早、中、晚、失代偿各期的变化。与正常对照组相比,血清学样品:模型组3475蛋白表达下调,7558,15475,33665蛋白表达上调;关节液样品:模型组7558,33278蛋白表达下调,3950,16055蛋白表达上调;质核比3475,7558,16884为血清学和关节液样本共有差异蛋白质谱波峰显著蛋白。结果提示样本中出现的部分差异蛋白质可能为关节软骨损伤的生物标志物。     

多西他赛注射液的制备及质量控制

目的制备一种稳定的多西他赛注射液,并对其进行相应质量控制和稳定性考察。方法通过对多西他赛注射液的处方工艺的系统研究,制备一种稳定的多西他赛注射液,参照注射用多西他赛的国家试行标准和安万特的多西他赛注射液(泰索帝)的内控标准,制定相应标准并对其质量进行控制和稳定性考察。结果以酒石酸为pH调节剂,当溶液的pH为3.5左右时,注射液稳定性最好。通过12个月的稳定性考察,注射液的各项指标均符合要求。结论制备工艺比较简单,制成的多西他赛注射液稳定性好,质量符合标准要求。     

HIV辅助受体结合位点配体基因的获得及合成配体体外抑制作用的研究

目的 从构建的噬菌体十肽库中筛选HIV辅助受体的配体，测序后人工合成配体并研究其体外抑制HIVgp120．抗原的活性。方法 采用噬菌体表面表达技术，构建具有一这库容量的噬菌体随机十肽库。以HIVgp120多肽做抗原，经过五轮的亲和筛选获得高亲和力的配体，测序后人工合成配体肽，以ELISA试验检测配体的抑制活性。结果 获得1个与HIV辅助受体结合位点有高亲和力的配体克隆。经核苷酸序列测定，推导出该配体的氨基酸序列并人工合成该配体多肽。结论 筛选得到的展现在噬菌体表面的配体及人工合成的配体，对HIV辅助结合位点均有较好的封闭作用。     

中枢神经系统特发性炎性脱髓鞘疾病患者血清尿酸改变的临床分析

目的 探讨血清尿酸（UA）与中枢神经系统特发性炎性脱髓鞘疾病（IIDDs）[包括多发性硬化（MS）、视神经脊髓炎（NMO）、急性播散性脑脊髓炎（ADEM）、临床孤立综合征（CIS）]的关系.方法 选择IIDDs患者100例为病例组,其中MS组30例、NMO组18例、ADEM组25例、CIS组27例.另选取非炎性神经系统疾病40例为对照组.采用酶比色法测定各组血清UA.比较病例组与对照组UA值,并分析MS组患者尿酸与Kurtzke扩展残疾状态量表（EDSS）评分相关性.结果 MS组、NMO组、ADEM组、CIS组患者血清UA值均较对照组明显降低（均P＜0.05）;MS组患者EDSS评分与UA值呈负相关（P＜0.01）.结论 除MS外,NMO、ADEM、CIS患者也存在UA水平降低;MS患者UA水平降低与其临床神经功能缺损的严重程度有关;提示低UA血症可能是IIDDs的独立危险因素,间接证实了UA在IIDDs中的保护性作用.     

HC视频喉镜与传统Macintosh喉镜用于麻醉气管插管的效果对比

目的探讨HC视频喉镜与传统Macintosh喉镜用于麻醉气管插管的临床效果。方法选取2013年1月~2014年1月于我院就诊的模拟颈椎制动患者共100例。随机分为对照组和观察组各50例。对照组患者采用常规的Macintosh喉镜进行插管治疗,观察组给予HC视频喉镜治疗,观察比较两组患者治疗效果。结果观察组患者插管时间为22.1±8.5s,对照组为55.3±9.0s;观察组患者插管难易程度评分明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。讨论采用HC视频喉镜插管治疗颈椎制动可很好的显露声门,效果明显,降低对心血管的影响,值得临床推广应用。