紫草萘醌类提取物通过抑制DNA合成诱导肝癌细胞凋亡

目的 研究紫草萘醌类化合物(LE)抑制肝癌细胞生长及诱导凋亡的机制.方法 MTT法测定LE对人肝癌细胞系SMMC-7721和人胚肾细胞系HEK-293的生长抑制作用;透射电镜检查、DNA电泳和原位末端标记检测凋亡;流式细胞仪分析细胞周期.结果 LE明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721的生长.药物孵育24～72 h,电镜检查可见凋亡的典型过程;原位末端标记显示细胞核阳性染色.药物孵育16 h后流式细胞术检查:S期细胞明显减少.药物与正常传代细胞系HEK293孵育,对细胞周期没有影响.结论 LE具有专一性抗肿瘤作用,可诱导肝癌细胞凋亡.其作用机制为首先抑制DNA合成,进而引起细胞凋亡.     

镜下置入记忆合金支架治疗食管癌贲门癌梗阻

我院自1996—12～1997—12对8例无手术指症的晚期食道癌、贲门癌梗阻及合并气管瘘，采用内镜下扩张、江置入镍-钛记忆合金支架内支撑治疗，取得了良好的近期治疗效果．现报告如下．     

浅析高职院校班级管理模式的改革

高职院校的班级管理工作,直接关系着毕业生的基本素质;只有进行“以思想道德教育为核心,专业教育为重心”为主导思想的班级管理模式的不断改革,才能培养出适应社会发展需求的高素质综合型人才。     

NK细胞趋化因子和细胞因子的分泌与调节

Natural killer (NK) cells are the important members involved in innate immunity, which can kill virus-, intracellular bacteria-, and parasite-infected target ceils or tumor cells. NK cells can secrete cytokines/ chemokines as well, in order to mediate immune response and inflammation. However, its cytokine-secretion ability is related with the maturation of NK cells and is regulated by some factors, for example, P110δ. There-fore, more work should be done to elucidate the function and regulation of these factors, which have a signifi-cant influence on inflammation and tissue impairment in some diseases involving NK cells.     

紫草萘醌组分制剂逆转可移植肿瘤的免疫损伤效应

目的:观察紫草萘醌组分可溶性提取物的抗肿瘤和免疫调节作用.方法:紫草萘醌醇提物制备成可溶于水的微乳液(LE)制剂,给荷瘤模型小鼠灌胃;皮下接种HepA22肝癌细胞或S180肉瘤细胞制作荷瘤模型;观察其生存时间、瘤重和免疫学指标.结果:荷瘤小鼠胸腺和脾脏指数以及NK细胞毒、ConA诱导淋转和IL-2生成能力明显降低,胸腺皮质和脾脏生发中心严重萎缩;应用LE阻止荷瘤动物免疫器官形态改变的发生;提高其脾细胞免疫功能.结论:紫草萘醌组分制剂抑制可移植肿瘤原位增殖,逆转荷瘤对小鼠免疫系统的损害.     

获得重构基因的简捷方法--重叠延伸PCR

目的：构建IFN-β信号肽序列与白细胞介素18（IL-18）成熟肽的重组嵌合分子。方法：从BALB/c鼠基因组DNA扩增IFN-β信号肽序列;由小鼠Pro-IL-18真核表达质粒获得IL-18成熟肽序列;以非对称PCR技术得到IFN-β信号肽编码区的反义链和IL-18成熟肽正链;采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)产生具有IFN-β信号肽与IL-18成熟肽的嵌合编码序列;定向连方式构建嵌合IL-18的表达质粒并测序。结果：连续胶PAGE表明非对称PCR可分别扩增出两个靶序列的特异性单链,大小符合预期。IFN-β信号肽对称PCR产物与IL-18非对称PCR产物混合作为模板,进行重叠延伸;电泳分析可见清晰的嵌合片段;测序显示重组质粒的表达框由两个设计的靶序列构成,且无移码。 结论：重叠延伸PCR是一种获得重构基因的简捷方法。     

P-糖蛋白基因疫苗诱导小鼠实验性肝炎

目的 :观察 P-糖蛋白基因疫苗免疫小鼠诱导的免疫病理变化。方法 :P-糖蛋白基因疫苗 2 0～ 1 0 0 μg两次肌注 (间隔 9d)免疫小鼠 ,收集血清检测特异性抗体效价 ;取心、肝、肾制作组织切片 ,HE染色行病理检查。结果 :末次免疫后 5 d鼠血清特异性抗体效价达到 1∶ 4 0 0 0 ;心、肾组织正常 ,但肝脏出现自身免疫性肝炎改变。结论 :P-糖蛋白基因疫苗免疫小鼠可诱导实验性肝炎 ,实验性肝炎小鼠可作为人自身免疫性肝炎的动物模型     

基质金属蛋白酶-9基因多态性与妊娠高血压疾病的关系研究

目的：研究基质金属蛋白酶-9基因C1562T（MMP-9C-1562T）多态性与妊娠高血压疾病的相关性。方法：应用变性高效液相色谱法和限制性片段长度多态性分析方法分别检测71妊娠高血压疾病患者和66名正常孕妇的基质金属蛋白酶9基因C-1562T多态性。结果：MMP-91562CC基因型及C等位基因频率在妊娠高血压疾病组和对照组间的分布有统计学差异。结论：基质金属蛋白酶9基因C-1562T多态性可能是构成妊高征的独立遗传性危险因子。     

Unlicensed NK细胞的免疫效应

NK细胞(Natural killer cells,NK cells)在控制某些病毒感染与抗肿瘤中发挥着重要作用[1].无需抗原预先刺激与活化,NK细胞即可发挥细胞毒效应,并可分泌多种细胞因子与趋化因子.此种天然免疫细胞表达多样化活化性受体和抑制性受体.在NK细胞的激活与功能调控过程中,活化性和抑制性受体均发挥十分重要的作用[2].大多数活化性受体缺乏细胞内信号区域,而是以非共价方式结合含有免疫受体酪氨酸相关活化基序(ITAM)的衔接蛋白(Adaptor),如DAP12、CD3ζ或FcεRIγ;或者与包含Tyr-Ile-Asn-Met基序的衔接蛋白DAP10结合.衔接蛋白通过一系列下游信号激发细胞骨架重排,诱导细胞增殖与分泌可溶颗粒和细胞因子.     

人Flt3配体基因的克隆及在Hela细胞中的表达

目的：克隆人Flt3配体（FL）基因．检测其在Hela细胞中转录及表达蛋白的活性。方法：Trizol法提取K562细胞总RNA，经RT-巢式PCR得到FL的cDNA，PCR产物亚克隆入pGEM-T栽体测序，构建pcDNA3／hFL。经Lipofectamine2000介导转入Hela细胞．RT-PCR法检测转染细胞中hFL基因的转录．ELISA法检测培养上清中hFL的含量．增殖和促生存实验鏊定hFL的活性。结果：所得FL基因序列正确。转染后的Hela细胞能转录FL基因．上清中hFL蛋白含量为56．8ng／ml／l．hFL能促Raji细胞生存及抑制凋亡（P〈0.01），促进HL-60细胞增殖（P〈0.05）。结论：构建的pcDNA3／hFL质粒在Hela细胞表达系统中能够有效转录．表达的hFL蛋白具有生物学活性。