非离子表面活性剂对超临界CO2从苦参中萃取苦参碱类的影响

本文探讨了超临界CO2中非离子表面活性剂吐温-80、司盘-80的多元醇混合体系对萃取苦参碱类的影响。加入非离子表面活性剂的多元醇混合体系，比只用乙醇作夹带剂进行超临界CO提取苦参总碱的效果高约1．8～2．2倍。非离子表面活性剂在多元醇混合体系中一定浓度时，溶解度急剧增加，萃取率达到92％；相反于另一定浓度时，溶解度急剧下降，萃取率仅30％，且低于乙醇作夹带剂时的萃取率。这并不是简单的浓度关系，与表面活性剂浓度以及多元醇、CO2混合比例等因素有关。     

茶多酚抗癌机理新进展

茶叶是倍受人们喜爱的饮料之一 ,与人们的生活息息相关。全世界每年生产大约 2 50万吨的茶叶 ,其中 2 0 %是绿茶 ( green tea) ,主要是一些亚洲国家消费 ;78%为红茶 ( black tea) ,主要在西方国家和某些亚洲国家消费 ;2 %为乌龙茶 ( wolong tea) ,主要是中国的东南部地区消费 [1]。茶叶具有许多生物学活性和药理效应 ,如抗突变、抗肿瘤形成、抗炎抗病毒及清除自由基和抗氧化等作用 ,而这些作用主要是由茶叶中的主要成分茶多酚介导的。流行病学研究表明 ,某些肿瘤的发生与茶叶的消费显负相关。目前 ,有关茶多酚在抗肿瘤方面的研究有了长足的…     

砷剂联合CAG方案治疗难治性急性髓系白血病18例疗效观察

几十年来，急性髓系白血病（AML）的治疗已经取得了一定的进展，初治的成人AML完全缓解率已经达到70％以上，但仍有一部分患者对一线化疗不敏感，同时其他一部分已经缓解的患者会存在复发，从而成为难治性AML，这就影响了AML的疗效。难治性的AML由于自身特性限制了常规化疗的应用，仍然是目前白血病治疗上的难点。难治性白血病的诊断标准根据1999年第二届全国难治性自血病研讨会草拟的诊断标准，基本条件为：①急性髓性白血病（AML—M3除外）用经典方案诱导化疗2个疗程未获完全缓解（CR）；②首次CR6个月内复发，或6个月后复发经正规诱导化疗失败；③多次复发。符合上述条件之一者，即可诊断为难治性急性白血病。我院2004-2006年5月应用砷剂联合CAG方案治疗难治性AML18例，取得了较好的疗效，现报告如下。     

IL-2和IL-12联合基因治疗小鼠肝癌的实验研究

目的探讨瘤内注射共表达mIL-12和hIL-2质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用.方法构建pDC511hIL2-mIL12、pDC511mIL-12、pDC511hIL-2真核表达质粒载体;ELISA方法检测各组质粒在真核细胞的表达;小鼠肝癌H22皮下移植瘤瘤内注射各组质粒DNA后,检测不同时间血清中细胞因子浓度;观察各组小鼠存活时间,肿瘤大小变化;并检测各组小鼠脾脏细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte, CTL)活性.对各治疗组在质粒DNA注射后一月进行瘤体组织学观察.结果酶切鉴定各组质粒载体,均示构建成功,并能在真核细胞内高效表达相应细胞因子.瘤内注射各组质粒载体后,pDChIL2-mIL12组在不同时间表达的hIL2和mIL12分别与pDC511hIL2 组(F=71.11,P<0.01)、pDC511mIL12组 (F=30.70,P<0.05)比较有显著性差异.mIL-12基因和hIL-2基因联合治疗组,肿瘤生长明显受抑制,疗效显著优于各单独治疗组和对照组(P<0.05),并且小鼠脾细胞CTL杀伤活性增强.双基因联合治疗组,病灶内肿瘤细胞坏死明显,炎性细胞广泛浸润.结论 IL-12、IL-2基因治疗可抑制小鼠肝癌H22皮下移植瘤的生长,提高机体的抗肿瘤免疫应答,两者联合运用可产生协同效应.为进一步运用高效基因导入技术进行肝癌基因治疗研究提供初步的实验依据.     

砷剂治疗骨髓增生异常综合征15例的效果

三氧化二砷(As2O3)应用于治疗肿瘤有一百多年的历史,20世纪90年代开始治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)并得到了极大的突破,且没有严重的骨髓抑制毒性,其治疗效果已获确认,As2O3成功治疗APL的意义还在于其独特的作用机制--促进细胞凋亡和部分分化.因此这一疗法为以后运用凋亡机制治疗血液恶性疾病提供了新思路[1].目前应用砷剂治疗骨髓增生异常综合征(MDS)国内报道不多,治疗效果未知,也缺乏相关临床数据.我院自2003年以来,应用砷剂治疗MDS 15例,取得了较好效果,现将临床资料分析报告如下.     

As2O3对NB4细胞增殖及凋亡的影响

目的研究不同浓度的三氧化二砷（As2O3）对急性粒细胞白血病细胞株NB4（APLM3）凋亡及细胞周期的影响。方法采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法测As2O3对NB4的细胞毒活性，流式细胞仪AnnexinVFITC-PI检测细胞凋亡率，溴化丙碇（PI）染色法检测细胞周期。结果1～8μmol／LAs2O3能显著抑制NB4细胞增殖，且这些变化呈明显的时间和浓度依赖关系（时间一剂量效应）。2～8μmol／LAs2O3能显著诱导NIM细胞凋亡，处理时间为12h，其早期凋亡率和总凋亡率均与剂量呈线性正相关；处理时间为24h，其早期凋亡率、中晚期凋亡率和总凋亡率与剂量呈线性正相关；As2O3处理时间为36h和48hNB4细胞以中晚期调亡为主。流式细胞检测表明，不同浓度的As2O3均使NB4细胞周期阻滞在G2／M期。结论As2O3能抑制人白血病NB4细胞增殖，其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖使细胞受阻于G2／M期。其诱导凋亡作用具有时间和浓度依赖关系。     

mGM-CSF-mMIP-3α重组质粒的构建、表达及鉴定

目的:构建pCDNA3.1mGM-CSF-mMIP-3α重组质粒,为mGM-CSF-mMIP-3α基因治疗肿瘤的研究奠定基础.方法:利用本实验室保存的pCDNA3.1mGM-CSF和pCDNA3.1mMIP-3α质粒,采用分子生物学技术构建了pCDNA3.1mGM-CSF-mMIP-3α重组质粒.用PCR、酶切进行鉴定,然后用脂质体转染B16细胞,用G418筛选后通过ELISA和Western blot检测该融合蛋白.结果:重组质粒中含有mGM-CSF-mMIP-3α基因,转染B16细胞后,其表达产物能分泌到肿瘤细胞外,分泌到细胞外的产物用ELISA和Westernblot检测证明能与特异性mGM-CSF和mMIP-3α抗体结合.结论:成功构建含mGM-CSF-mMIP-3α真核表达重组质粒,有助于进一步研究其抗肿瘤作用.     

神经酰胺诱导大肠癌LoVo细胞的凋亡

目的 探讨外源性神经酰胺诱导大肠癌LoVo细胞凋亡的作用。方法 在有或无蛋白激酶C激活剂PMA预处理LoVo细胞3h的条件下,分别用C2－和C6－神经酰胺以及C2－二羟基神经酰胺处理指数生长期的LoVo细胞,用琼脂糖凝胶电泳,Heochest 33342荧光染色和Annexin V/PI双染色流式细胞仪观测LoVo细胞的形态学和生化特征方面的改变。结果 C2－和C6－神经酰胺在一定的浓度范围内（10－25μmol/L)处理LoVo细胞12－24h可诱导其凋亡,但浓度超过50μmol/L则引起LoVo细胞的坏死增多,而与神经酰胺结构相似但缺乏鞘脂碱骨架C4－C5反式双键的C2－二羟基神经酰胺在相同甚至更大的剂量时都不引起LoVo细胞细胞的凋亡;PMA对C2－和C6－神经酰胺诱导的LoVo细胞凋亡具有抑制作用。结论 神经酰胺参与LoVo细胞凋亡的信号传导过程,并具有结构特异性;蛋白激酶C可能是神经酰胺调控细胞凋亡的下游靶分子之一。     

超临界CO_2萃取蛇床子有效成分的工艺研究

本文以蛇床子素等成分为指标,并结合药效学,对超临界CO_2萃取蛇床子有效成分的工艺进行了研究,主要探讨了压力、温度、时间、CO_2流量等因素对收率的影响,确定了最佳条件:萃取压力和温度分别为24MPa和51℃;解析釜Ⅰ压力和温度为12MPa和65℃;解析釜Ⅱ压力和温度为6MPa和44℃;流速为11kg/kg·h原料;时间为3h。结果证明,SFE-CO_2工艺比常规提取收率提高约1倍,生产周期大大缩短,质量可控,外观颜色大为改观,并保持了传统中医的用药效果。证明用SFE-CO_2萃取蛇床子有效成分是可行的。     

恶性血液病患者化疗后大剂量应用白细胞介素-2的疗效观察

目的 观察恶性血液病患者化疗后大剂量应用白细胞介素-2(IL-2)的临床疗效.方法 对65例恶性血液病患者(治疗组)化疗结束后进行大剂量IL-2治疗,对照组为随机挑选的98例恶性血液病患者,化疗结束后不进行任何免疫治疗.结果 治疗组复发率为28%,对照组复发率为42%;治疗组中位生存期44(0～80)个月,对照组21(0～80)个月,两组复发率及生存期差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 白血病、淋巴瘤等恶性血液病患者化疗结束后大剂量IL-2治疗,是一种有效的免疫治疗方法,可降低患者化疗后的复发率,并有望延长生存期.